Fundamentos de

Espectrofotometr
a
 Objetivos
General:
Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra
para la determinacin de concentraciones en soluciones.
Particular:
Conocer los fundamentos de la espectrofotometra y las
variables involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger.
Seleccionar la longitud de onda apropiada para las
mediciones de absorbancia
Construir una curva patrn de soluciones de yodo (serie tipo)
 Objetivos
En esta prctica tambin se explica como es que se puede
obtener la constante de proporcionalidad llamada
coeficiente de absorcin molar (M-1 cm-1) mediante el
modelo matemtico planteado, realizando una regresin
lineal con nuestros datos experimentales se obtiene el
modelo matemtico de esta experimentacin en donde la
pendiente obtenida es el coeficiente de absorcin molar que
se aplica en esta determinacin experimental.
 Introduccin

En esta prctica se trata de explicar cmo es que

con la ayuda de un espectrofotmetro se puede
realizar una curva patrn, para que por medio de
esta curva se pueda extrapolar la absorbancia
obtenida de una solucin yodo-yodurada
desconocida y as se pueda conocer su
concentracin experimentalmente.
 Cmo funciona el
espectrofotmetro?
La absorcin de la radiacin
ultravioleta o visible por
molculas orgnicas e
inorgnicas, generalmente se
produce por la excitacin de los
electrones de enlace, por lo
tanto, la longitud de onda de los
mximos de absorcin se puede
relacionar con los enlaces de las
especies absorbentes.
 Cmo funciona el
espectrofotmetro?
Los mtodos espectroscpicos se basan en la capacidad de
las sustancias de absorber (o emitir) radiacin
electromagntica. stos se pueden emplear para determinar
la concentracin de un reactivo o producto durante una
reaccin. El aparato detecta la cantidad de luz transmitida o
absorbida a travs de la solucin en la celda y la compara
con la que se transmite o absorbe a travs de una solucin
de referencia denominada blanco. La lectura en la escala
ya est convertida en absorbancia
Ley de Lambert-Beer-Bourger
La ley de Lambert-Beer Bourger es el fundamento de la
espectrofotometra.
Se cumple para una radiacin monocromtica que atraviesa una
disolucin diluida ( 0.01M), cuando la especie absorbente no
participa en un equilibrio que dependa de su concentracin.
Esta ecuacin relaciona la transmitancia de la muestra, que se
define como la relacin de la radiacin transmitida y la incidente
(T= I/ I0); la disminucin de la intensidad de la radiacin depende
de la concentracin del absorbente. Y de la longitud del camino
recorrido por el haz.
Ley de Lambert-Beer-Bourger
A = -log T
A = log ( I / I0 ) = (b)c
ABSORBANCIA = ( b) c

La ecuacin establece una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin,

donde:
: es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorcin molar,
absortividad molar o coeficiente de extincin (M-1 cm-1). Es la caracterstica de una
sustancia que nos dice cunta luz absorbe a una longitud de onda determinada.
b : es el paso ptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm).
c : es la concentracin de la especie de la cual estamos midiendo la absorbancia
(M).
 Material & Reactivos
1 Espectrofotmetro
2 Celdas espectrofotomtricas
4 Vasos de precipitados de 50 ml
6 Tubos de ensayo (15 ml)
I2 KI (0.002M - 0.2M)
1 Pipeta graduada de 10 ml H2O destilada

1 Pipeta graduada de 1 ml
1 Propipeta (o jeringa con tubo
latex)
Diseo experimental
 Datos experimentales

Calibracin del espectrofotmetro y barrido

del espectro de absorcin
Datos experimentales del espectro de absorcin
de yodo partiendo [2x-3 M] y una temperatura de
23 C en la ciudad de Mxico el da 14 de
Octubre de 2016.
 Absorbancia a diferentes longitudes de onda
Evento Longitud (nm) A (Adimensional)
Datos 1 325 1.444
2 335 1.88
experimentales 3 345 2.275
4 355 2.348
5 365 1.982
6 375 1.507
7 385 1.046
Tabla 1.
8 395 0.686
Absorbancia de 9 405 0.468
10 415 0.331
la solucin de I2 a
11 425 0.253
diferentes 12 435 0.202
13 445 0.153
longitudes de
14 455 0.113
onda. 15 465 0.082
16 475 0.058
17 485 0.041
18 495 0.027
Grfica ( Absorbancia [Adimensional] vs [nm] )

1
Espectro de la solucin de I
2.5

1.5

Adsorbancia (Adimensional)
1

0.5

0
300 350 400 450 500 550

(nm)
 Datos experimentales

Como se observa en la tabla 1 y en la grfica 1 el

cambi menos abrupto en los datos experimentales y
en la pendiente los muestran los eventos del 14-18
tomando como punto medio el evento numero 16 que
registra una longitud de onda de ( =475 nm), con la
cual se fijo cmo longitud de onda en la cual se
trabajo para determinar la absorbancia de diferentes
concentraciones de la solucin yodo-yodurada como lo
muestra la tabla 2.
 Algoritmo de clculo para las diferentes
concentraciones molares de I2

C1 = 0.002 M...
.C2= ?
V1 = 5 mL.. V2 = Siguiendo ese algoritmo, las dems concentraciones son:
0.0016 M
5mL 0.0012 M

C1V1=C2V2 Ec.1
0.0008 M
0.0004 M

Despejando a C2 de Ec.1
C2 = = = 0.002 M
 Resultados
Mezcl I2 (0.002 H2O/
Tabla 2. a M)/(ml) (ml) I2 mol/L Abs
Absorbanci 1 5 0 0.002 1.113
aa
2 4 1 0.0016 0.860
diferentes
concentraci 3 3 2 0.0012 0.640
ones
4 2 3 0.0008 0.490
molares de
I2 5 1 4 0.0004 0.202
Grfica (Absorbancia[Adimensional]vsC [mol/L] )
2
1.2

Absorbancia (adimensional) f(x) = 548x + 0

1 R = 0.99

0.8

0.6

0.4

0.2

0
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

Concentracion ( mol/L )
 Resultados
En donde comparando la ecuacin de la regresin lineal con
la ley de Lambert-Beer Bourger
y = 548 x + 0.0034.. Regresin lineal
en donde:
y = Absorbancia (adimensional)
x = concentracin (mol/L) ; m = 548
 Resultados
En donde para nuestro experimento:
b= 1cm ; por lo tanto m = ( b)
Despejando a queda: =
As obtenemos el coeficiente de absorcin molar que se
aplica en esta determinacin experimental.
= 548
 Anlisis de resultados
Como se puede apreciar en la tabla 1 y grfica 1
el cambi menos abrupto en los datos
experimentales y en la pendiente los muestra los
eventos 11, 12 y 13 tomando como punto medio el
evento nmero 12 que registra una longitud de
onda de ( =460 nm), con la cual se fij cmo
longitud de trabajo para determinar la
absorbancia de diferentes concentraciones de la
solucin yodo-yodurada.
 Anlisis de resultados
Tomando en cuenta el valor de R = 0.9961 obtenido en el
ajuste lineal de la grfica 2, nos habla de que fue un buen
ajuste pero no perfecto (factor de correlacin perfecto R 2
=1) ya que la b terica es de 0 y en este caso se obtuvo
una b de 0.0034, este error acarreado en la
experimentacin se adjudica a la mala calibracin del
espectrofotmetro a la realizacin errnea de las
disoluciones de las solucin yodo-yodurada, as como
tambin al manejo inapropiado de las celdas en las cuales
pudo haber quedado algn residuo de polvo o grasa de
nuestras manos.
 Conclusin
Se comprende que la ley de Lambert-Beer Bourger
proporciona las bases para todas las clases de
espectrofotometra de absorcin y se cumple siempre y
cuando no haya interaccin entre las molculas del soluto,
como dimerizacin o formacin de pares inicos, queda
claro cmo es que vara la absorbancia directamente
proporcional a su concentracin de la disolucin que se
trate, y se aprecia la funcionalidad de una curva patrn para
futuras referencias.
 Gracias por su atencin

Bibliografa: Chang Raymond. Ed. McGrawHill

Fisicoqumica 3 edicin, 2008. Paginas (701-711)