Professional Documents
Culture Documents
EL CULTIVO DE
CLULAS DE ANIMALES
Y PLANTAS
Carolina Gutirrez Cisneros
Ricardo Hernndez Medina
Ral Montero Faras
1
CARACTERSTICAS
GENERALES
Bacterias y Clulas Clulas de
Caracterstica
levaduras vegetales mamfero
Tamao 2-10 m 10-100 m 10-30 m
Tiempo de duplicacin 1-2 h 2-7 h 20-50 h
Sensibilidad al
Baja Moderada Alta
esfuerzo de corte
Medio de cultivo Simple Complejo Complejo
Temperatura 26-36 C 25-27 C 29-37 C
Aireacin Alta Baja Baja
pH 3-8 5-6 7.0-7.4
Escalamiento Fcil Difcil Difcil
(Prtner, 2009) 2
CONSIDERACIONES
GENERALES
Consumo de oxgeno
Produccin de CO2
Acumulacin de lactato y amonaco
Esfuerzo de corte
Anclaje o crecimiento en suspensin
(Prtner, 2009) 3
ABASTECIMIENTO DE
OXGENO
Dao celular y
formacin de
espuma
(Czermak et al, 2009) 5
AIREACIN POR
MEMBRANAS
9
CARACTERSTICAS DEL CULTIVO VEGETAL
Metabolitos secundarios/ Protenas recombinantes
12
BIORREACTORES
13
CULTIVO EN SUSPENSIN
14
HAIRY ROOT
Distribucin no uniformeaglomeraciones
Agitacin no adecuada
Aislar
Soporte matricial
Inmovilizacin (fase gaseosa)
Limitacin por transferencia de masa
Idneo para crecimiento
Drenaje y absorcin
Aprovechamiento mximo
Modo de operacin: ebb and flow (flujo y reflujo)
15
16
MODO DE OPERACIN
Induccin de metabolitos
secundarios
Perfusin
17
APLICACIN
Transformacin gentica: GMP
2.5-25 veces menos que con clulas de
mamfero
20 protenas recombinantes distintas
PMP
45 aos: produccin de metabolitos
secundarios
cido rosamarnico
Ginsensidos
18
BIORREACTORES
PARA CLULAS DE
MAMFERO
19
CARACTERSTICAS DEL CULTIVO DE
CLULAS DE MAMFERO
Son grandes, crecimiento lento y sensibles al cizallamiento.
De anclaje: Crecen en superficie de vidrio, plsticos, polmeros
naturales (colgeno).
Suspensin: Cultivo en suspensin.
La concentracin es baja: metabolitos txicos como amonio y
lactato.
20
CARACTERSTICAS DE LOS
REACTORES
Condiciones controladas: pH, T, DO.
Suministro de CO2
Relacin superficie-volumen en clulas de
anclaje
Constante remocin de agentes txicos o
productos de inters.
El reactor debe ser suavemente aireado y
agitado.
Agitados mecnicamente 20 rpm
Columna de burbujas y airlift: bajas tasas de
aireacin.
21
22
23
24
25
26
27
28
BIORREACTORES
PARA CLULAS DE
INSECTO
29
CARACTERSTICAS DEL CULTIVO DE
CLULAS DE INSECTO
Corto tiempo de duplicacin (~24 h)
Condiciones de crecimiento
28 C
6.2-6.9 de pH
CO2 PO43
>30 % dO2
Medio definido (libre de suero)
Ms sensibilidad al esfuerzo de corte
Biorreactor desechable
agitado por balanceo
33
VENTAJAS
Bajo esfuerzo
cortante
Agitador
Burbujas
Mnima mano de
obra
Esterilizacin
Limpieza
Escalamiento
hasta 500 L
(Weber y Fussenegger, 2009) 34
ASPECTOS INGENIERILES
Transferencia de masa
Desarrollo y propagacin de ondas