Espectrofotometría UV-Vis-tema8

Asignatura: ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL
Escuela: Ingeniera Qumica

Curso acadmico: 2016/I
1
CONTENIDOS
1. Introduccin
Mtodos Instrumentales de Anlisis:
Mtodos pticos. Clasificacin
Radiacin electromagntica
Espectro electromagntico
2. Absorcin de radiacin electromagntica
3. Fundamentos de la espectrofotometra de absorcin UV-Vis

Teora de la absorcin de radiacin UV-Vis
Espectro de absorcin
Especies absorbentes. Tipos de transiciones electrnicas
Bases del color
4. Leyes de la absorcin de la radiacin: Ley de Lambert Beer

Limitaciones y Desviaciones de la Ley de Beer
5. Instrumentacin
6. Aplicaciones analticas
Caractersticas analticas del mtodo
Anlisis cuantitativo. Detalles del procedimiento experimental
Aplicaciones al anlisis de alimentos
2
1. Introduccin
Mtodos Instrumentales de Anlisis

Estn basados en la medida de propiedades qumicas y fsicas de los analitos
con fines cualitativos y cuantitativos.
La medida se realiza en un instrumento apropiado.
Propiedad medida Mtodo Instrumental Mtodo
Instrumental
Absorcin de radiacin Espectrofotometra de ptico
absorcin
Emisin de radiacin Espectroscopa de emisin ptico
Potencial elctrico Potenciometra Electroanaltico
Corriente elctrica Voltamperometra Electroanaltico
Resistencia elctrica Conductimetra Electroanaltico
3
1. Introduccin
Mtodos pticos de anlisis
Mtodos que miden alguna propiedad de la radiacin electromagntica
emitida por la materia o que interacciona con ella
Clasificacin
Mtodos espectroscpicos: Existe intercambio de energa entre la
radiacin electromagntica y la materia
Mtodos de absorcin: Miden la disminucin de la potencia de la
radiacin electromagntica debida a la absorcin que se produce en su
interaccin con el analito
Mtodos de emisin: Miden la radiacin electromagntica emitida

cuando el analito es excitado por energa trmica, elctrica o radiante
Mtodos no espectroscpicos: Se producen cambios en la direccin o en
las propiedades fsicas de la radiacin electromagntica:
Dispersin
Refraccin
Difraccin
Rotacin ptica 4
1. Introduccin
La radiacin electromagntica
La radiacin electromagntica es una forma de energa que

se transmite por el espacio a gran velocidad sin soporte de
materia.
La radiacin electromagntica puede describirse segn:
la teora ondulatoria: formada por ondas sinusoidales
la teora corpuscular: flujo de partculas o corpsculos de

energa llamados fotones
5
1. Introduccin
Teora ondulatoria . Parmetros ondulatorios
La radiacin electromagntica (REM) se representa como ondas
consistentes en campos elctricos y magnticos que estn en fase y que
oscilan sinusoidalmente de manera perpendicular entre s y respecto a la
direccin de propagacin
Parmetros ondulatorios
Campo elctrico y Longitud de onda
Amplitud A
La potencia P: es la energa del haz que llega

Campo magntico z Direccin x a un rea dada por segundo
6
1. Introduccin
Teora corpuscular. Propiedades corpusculares de la radiacin electromagntica

La radiacin electromagntica es considerada como paquetes discretos de
energa llamados fotones o cuantos.
Dualidad onda-partcula:
Un fotn es una partcula de radiacin electromagntica con masa cero y energa
E proporcional a la frecuencia de la radiacin
La energa de un fotn: E = h
E = energa del cuanto de radiacin: Cal mol-1
= frecuencia de la radiacin : hertzio (Hz) = ciclos s -1
h = constante de Planck = 6,624 10-27 erg s
m = 10-6 m
Velocidad de la luz : v =
Velocidad de la luz en el vaco: c = 3,00 1010 cm s-1 nm = 10-9 m
= 10-10 m
Energa de un fotn :E = h = h c /
Cuando aumenta, disminuye la energa y frecuencia del fotn
7
1. Introduccin
Espectro electromagntico
Abarca un intervalo muy amplio de

longitudes de onda o energas.
Segn su recibe diferentes

nombres.
La luz visible, que es la nica

perceptible por el ojo humano,
representa solamente una
pequea parte del espectro, desde
350-380 a 750-780 nm.
8
Absorcin: proceso por el cual una especie, en un medio

transparente, capta selectivamente ciertas frecuencias de la
radiacin electromagntica.
El fotn absorbido hace pasar a la especie de su estado
fundamental a un estado excitado de energa M*:
M + h M*
Tras un corto perodo de tiempo, aproximadamente 10-8 a 10-9 s,
se pierde la energa de excitacin, generalmente en forma de
calor, y la especie M vuelve a su estado fundamental:
M* M + calor
Los mtodos de absorcin tienen la ventaja de producir poca o
ninguna alteracin en el sistema estudiado.
9
Requisitos
Para que la radiacin electromagntica sea absorbida por la materia

deben cumplirse dos condiciones generales:
1) debe haber una interaccin entre el campo elctrico de la
radiacin y alguna carga elctrica de la sustancia
2) La energa de la radiacin incidente debe ser exactamente igual
a la energa cuantizada que requiere la sustancia.
Ecuacin de Bohr
E = Ef Ei = h
h : energa del fotn absorbido

Ei: energa total de la materia en el estado fundamental
Ef: energa total de un estado permitido de energa superior o estado
excitado.
10
3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible
Mtodo instrumental ptico basado en la medida directa de la

absorcin de radiacin electromagntica UV-Visible, por las
molculas del analito contenido en la muestra.
La regin ultravioleta comprende entre 10 y 400 nm y la

regin visible comprende entre 350 y 750 nm.
Las radiaciones UV y visible tienen en comn el hecho de

que la absorcin de ambas regiones por molculas, provoca
la excitacin de e- de enlace a niveles de E superiores.
Los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos

de enlaces de la especie absorbente, base de su aplicacin
cualitativa
11
Asignatura: ANLISIS QUMICO
Grado: Ciencia y Tecnologa de los Alimentos
Un analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas

longitudes de onda caractersticas de la radiacin
electromagntica UV-Visible.
En este proceso, la radiacin es transferida temporalmente a la
molcula y, como consecuencia, disminuye la intensidad de la
radiacin.
Dicha disminucin, debida a la absorcin experimentada por el
analito, puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes,
siendo la Absorbancia, A, la ms comnmente utilizada en la
espectrofotometra de UV-Vis.
La aplicacin cuantitativa de la espectroscopa de absorcin
UV-Vis se basa en la medida, a una fija, de la A de una
disolucin del analito contenida en una cubeta transparente de
camino ptico b cm.
12
Atenuacin de un haz de radiacin por Transiciones energticas en la

una especie absorbente contenida en la molcula del analito
cubeta
E2
Disolucin de analito de
concentracin c
E2 = E2-E1=h2= hc/2
Radiacin
incidente Radiacin E1
P0 transmitida
P E1 = E1-E0=h1 = hc/1
Cubeta
E0
b Espectro de absorcin
Absorbancia A
Transmitancia = T = P/P0
Absorbancia = A = - log T = log P0 /P
13
, nm
Transmitancia y absorbancia
Transmitancia: fraccin de radiacin que una sustancia deja pasar cuando la
REM atraviesa la muestra.
Transmitancia = T = P/P0
T puede valer desde 0 hasta 1. %T puede valer desde 0 hasta 100 %
Absorbancia: es la atenuacin de la intensidad de la radiacin cuando sta

incide sobre una muestra. Es la cantidad de energa que la sustancia toma para
pasar a un estado ms excitado.
A aumenta a medida que aumenta la atenuacin de la radiacin.
Cuando no hay absorcin de radiacin Po= P y entonces A = 0,, mientras que si
se absorbe el 99% de la radiacin, solo se transmite el 1%, la A = 2
Absorbancia = - log T = log P0 /P

14
Espectros de absorcin
Un espectro de absorcin es una
representacin grfica de la
absorbancia de un analito (o de otra
magnitud equivalente) en funcin de la
Absorbancia A
longitud de onda de la radiacin (o de
otro parmetro relacionado con la
energa de la radiacin utilizada).
El mximo de absorbancia obtenido max nm

en el espectro de absorcin de un
analito, nos dar la longitud de onda
que proporciona la mayor sensibilidad
posible, y por tanto ser la que se
utilizar en el anlisis
espectrofotomtrico de dicho analito.
15
Teora del color
La sensacin de color se produce cuando disminuye

apreciablemente una o ms zonas de la regin visible.
Si el ojo recibe luz de todas las de la regin visible el efecto es

luz blanca.
El color aparente siempre es el color complementario del que ha

sido eliminado.
Los colores complementarios son tiles para predecir la de

absorcin de los compuestos coloreados: una disolucin
amarilla, absorber luz azul 450-480 nm, para analizarla debemos
usar luz con esta seleccionada con el monocromador o bien
usar un filtro azul, que transmite esta luz azul
16
complementario
(nm) Color absorbido (nm) Color observado
380-420 violeta 520 - 550 amarillo-verde
420 - 440 azul-violeta 550 - 580 amarillo
440 - 470 azul 580 - 620 anaranjado
470 - 500 verde-azul 620 - 680 rojo
500 - 520 verde 680 - 780 prpura
520 - 550 amarillo-verde 380 - 420 violeta
550 - 580 amarillo 420 - 440 azul-violeta
580 - 620 anaranjado 440 - 470 azul
620 - 680 rojo 470 - 500 verde-azul
680 - 780 prpura 500 - 520 verde
Una disolucin se observa de color azul cuando se ilumina con luz policromtica, porque absorbe
580-620 nm (anaranjado) y transmite o deja pasar 440-470 nm (azul)
17
Teora de la absorcin molecular. Cambios de energa durante la absorcin

Absorcin molecular
Para cada estado electrnico en
una molcula existen varios VIS UV 3
estados vibracionales y para cada 2
1
E2
uno de stos, numerosos niveles E 0
rotacionales.
Etotal= Eelectrnica + Evibracional + Erotacional

3
2
1
E1
La radiacin absorbida por la 0
molcula puede ser utilizada para

originar las diversas transiciones
electrnicas posibles.
3
E = Ef Ei = h = Energa del 2
1
E0
fotn absorbido 1 4 1 4 0
Diagrama de niveles de energa

18
Especies absorbentes
Las especies absorbentes: molculas orgnicas y
*
aniones inorgnicos que tienen electrones:
en orbitales moleculares
* en orbitales moleculares
en orbitales no enlazantes n.
Tipos de transiciones electrnicas : Cuando

n absorben fotones de E adecuada se pueden dar 4
tipos de transiciones electrnicas:
*
n *
*
n *
Transiciones electrnicas entre niveles de energa moleculares

19
Sus electrones ms exteriores o electrones de enlace

Especie pueden ser elevados a niveles de E ms altos al incidir
absorbente sobre ellas una radiacin electromagntica apropiada
Grupo atmico presente en una molcula que lleva
asociada una banda de absorcin electromagntica:
C=C; C=O; C=N.
Grupo Especies con grupos funcionales con enlaces .
cromforo Grupos cromforos dobles y triples enlaces.
Bandas en el UV cercano y visible.
Etileno, carbonilo, ster, amida, nitro
Grupos que no producen por s mismos bandas de

Grupo absorcin, pero intensifican la de los grupos
auxocromo cromforos: C-Br; C-OH
Bandas de Responsables del color de muchos iones y compuestos de

campo ligando metales de transicin que poseen orbitales d y f
20
4. Leyes de la absorcin de la radiacin
Ley de Lambert-Beer
Al interaccionar la radiacin electromagntica con la materia, tiene lugar la
absorcin si la de la radiacin coincide con la energa necesaria para que el
sistema pase a un nivel de energa superior y permitido
h = E2 - E1
Las dos leyes fundamentales que rigen el comportamiento de la fraccin de

la radiacin incidente absorbida al pasar a travs de una muestra dada son:
Ley de Lambert: predice el efecto que produce el espesor del medio-muestra

sobre la fraccin de radiacin que se absorbe.
Ley de Beer: establece el efecto de la concentracin del medio-muestra

sobre la fraccin de radiacin que se absorbe.
21
Ley de Lambert-Beer: muestra cmo la absorbancia es directamente

proporcional a la longitud b de la trayectoria a travs de la solucin y a la
concentracin c del analito o especie absorbente.
A abc A bc
a: cte de proporcionalidad llamada absortividad. (unidades L/cmg, si c=g/L)
b: longitud del camino que recorre la radiacin a travs del medio absorbente.
c: concentracin expresada en g/L (mg/L, ...).
Si la concentracin c viene expresada en mol/L, la cte de proporcionalidad se denomina
absortividad molar y se representa por (unidades L/cmmol).
La absortividad molar, , es caracterstica de cada especie a una determinada
-Disoluciones que contienen varias especies absorbentes:

Para cada : Atotal =Ai = A1 + A2 + .... + An
Como A = b c
A = 1 b c1 + 2 b c2 + . +n b cn
Siendo 1, 2, , n los componentes absorbentes.
22
Potencia del haz

Ley de Lambert- Beer antes de
atravesar la
muestra
Absortividad
Absorbancia molar Concentracin molar
total medida P0 de las especies
a la longitud
AT, = log =bc absorbentes
P
de onda
camino
ptico
Potencia del haz

P despus de
P0
= Transmitancia (T) atravesar la A=bc
muestra
A = -logT
Ley de Lambert- Beer 23
Comprobacin de la Ley de Beer. Curva de calibrado
La Ley de Beer debe comprobarse siempre antes de utilizarla para un anlisis

cuantitativo exacto.
Para ello se preparan una serie de disoluciones estndar del analito en el
intervalo en el que se supone que se encuentra la muestra.
Se registra el espectro de absorcin utilizando una de ellas.
Se mide la absorbancia de dada una de las disoluciones a la del mximo de
absorcin del analito con una longitud de cubeta dada, generalmente 1 cm.
Se representan las absorbancias en funcin de las concentraciones.
Si la ley de Beer se cumple en todo el intervalo de c estudiado: A = bc se
obtiene una lnea recta en todo el intervalo, que pasa por el origen.
La recta obtenida se llama Curva de calibrado.
Pueden aparecer desviaciones positivas o negativas a partir de una
determinada concentracin debido a Limitaciones de la ley de Beer y/ a
posibles errores experimentales cometidos
24
Desviaciones de la Ley de Beer

La proporcionalidad directa entre absorbancia y concentracin cuando b es constante, slo
se cumple en un intervalo de concentraciones del analito.
Fuera de dicho intervalo se observan en las curvas de calibrado desviaciones positivas o
negativas de la linealidad debido a las limitaciones de la Ley de Beer:
A
respuesta debida
a la autoabsorcin
A= bc o a la luz escasa que
Intervalo
atraviesa la cubeta
respuesta del blanco, lineal
interferencias o escasa
sensibilidad
concentracin
Para la aplicacin cuantitativa, las medidas de A de la muestra deben estar incluidas

en el intervalo lineal
25
Limitaciones de la Ley de Beer
Limitaciones propias o reales

Variacin de la absortividad con el ndice de refraccin n, que vara con la c.
Para c < 0,01 M n= cte: Ley de Beer se cumple.
Incumplimiento de las premisas de la ley de Beer.

Interacciones entre el soluto y la radiacin producidas por mecanismos
distintos al de absorcin.
Interacciones entre las especies absorbentes del soluto .
Radiacin no monocromtica.
26
Errores al aplicar la Ley de Beer

Errores qumicos.
Efectos debidos a sistemas en equilibrio:
equilibrios de dimerizacin
equilibrios cido-base
equilibrios de complejacin
Efectos debidos al disolvente.
Efectos debidos a impurezas absorbentes de los reactivos.
Efectos debidos a la presencia de interferencias absorbentes en la
muestra.
Errores instrumentales.
Errores de lectura:
El mnimo error relativo se obtiene para una absorbancia de 0,434
Las absorbancias deben estar comprendidas entre 0,2 y 0,8 para obtener
el mnimo error
Radiacin parsita.
Errores personales:
Utilizacin y cuidado de las cubetas de absorcin.
27
Control de Temperatura.
5. Instrumentacin
Componentes bsicos de los espectrofotmetros
Fuente de Dispositivo de
Selector Cubeta Detector
energa lectura
de muestra
radiante
Muestra
Monocromador Detector
Fuente de
radiacin
Luz Luz
compuesta monocromtica I
I0 b
28
5. Instrumentacin
Fuente de energa radiante
Caractersticas
Continua. Estable. Intensa
Lmpara de
intensidad lumnica
Lmpara de Para en
Tungsteno o Wolframio
Deuterio el Visible
300 500 700 900 1100

Para en el
longitud de onda (nm)
Ultravioleta
29
5. Instrumentacin
Selector de
Caractersticas
longitud de onda de mxima transmisin

ancho de banda efectivo
Monocromadores de prisma
Filtros de corte
Monocromadores de red
Filtros de absorcin
Filtros de interferencia
Fotmetros Espectrofotmetros
30
5. Instrumentacin
Cubetas
Caractersticas
Absorcin mnima a la longitud de onda de trabajo

Colocar con caras transparentes perpendiculares a la direccin del haz incidente
Slice Vidrio o plstico
Ultravioleta Visible
31
5. Instrumentacin
Detectores
Su funcin es convertir la respuesta del instrumento en una seal medible.
Caractersticas
deben responder a un amplio rango de longitudes de onda

deben dar respuesta rpida
deben ser sensibles a bajos niveles de radiacin
deben producir seal elctrica fcilmente amplificable
la seal debe ser proporcional a la potencia radiante
Fototubos Fotomultiplicadores Fotodiodoarray
32
5. Instrumentacin
Espectrofotmetros
Haz sencillo
Fuente de Sistema Cubeta de Registrador

radiacin selector de muestra Fotodetector Amplificador o PC

Cubeta de
referencia
Doble haz Cubeta de Fotocelda 1

muestra
Fuente de Sistema Amplificador Registrador
selector de diferencial o PC
radiacin
Cubeta de
Fotocelda 2
referencia
33
La espectrofotometra de absorcin molecular se puede aplicar tanto al anlisis

cualititativo como cuantitativo.
Anlisis cualitativo: los espectros de la muestra se comparan con los de los

correspondientes estndares, con el fin de identificar las bandas de absorcin
coincidentes. Este tipo de anlisis es ms frecuente en UV e IR para identificar
compuestos orgnicos y ms rara vez se utiliza en Vis.
Anlisis cuantitativo: est basado en la ley de Lambert-Beer en el intervalo de

concentraciones de cumplimiento de la ley.
Se establece la curva de calibrado usando estndares y la absorbancia de la
muestra de concentracin desconocida se remite a la curva (a veces basta con un
solo estndar).
En espectrofotometra Vis, el analito se suele incorporar a una especie compleja
que presente bandas de absorcin intensas.
Siempre que sea posible se debe medir la absorbancia a max
34
Caractersticas de los mtodos espectrofotomtricos

Amplia aplicabilidad: Anlisis orgnico e inorgnico
Elevada sensibilidad: los lmites deteccin de 10-4 a 10-5 M.
Selectividad de moderada a alta.
Buena exactitud: errores de concentracin 1-5% o incluso menores.
Facilidad y comodidad en las medidas espectrofotomtricas.
Se prestan a una fcil automatizacin.
Campo de aplicacin
Especies absorbentes: compuestos orgnicos que contengan grupos
cromforos y especies inorgnicas como son los metales de transicin.
Especies no absorbentes: los analitos reaccionan con un reactivo para
producir un compuesto absorbente.
35
Metodologa cuantitativa. Detalles del procedimiento experimental
Toma y tratamiento de la muestra

Realizar un espectro de absorcin de la muestra
Seleccin de la Para obtener mxima sensibilidad, realizar las medidas de A
longitud de onda a una que corresponda a un mximo de absorcin max, ya
que el cambio en la absorbancia por unidad de concentracin
es mayor en este punto.
la naturaleza del disolvente
Control de las variables el pH de la disolucin
que influyen en la absorbancia la temperatura
las concentraciones altas del electrolito
la presencia de sustancias interferentes
Elegir las condiciones para el anlisis
Determinacin de Calibracin con patrones de concentracin conocida
la relacin entre Mtodo de las adiciones estndar
la absorbancia A a) El mtodo de un solo punto
y la concentracin c b) El mtodo de las adiciones mltiples
36
Calibracin con patrones de concentracin conocida
Pocas veces es posible suponer el cumplimiento de la ley de Beer y utilizar un

nico patrn para determinar la absortividad molar.
Comprobar la ley de Beer realizando un calibrado a la del mximo de

absorcin.
Se miden las absorbancias de patrones y muestras y se obtiene la ecuacin de la

recta de calibrado generalmente aplicando el mtodo de mnimos cuadrados:
A = mc + b
Los estndares o patrones de calibracin se deben aproximar tanto como sea

posible a la composicin final de las muestras reales y deben abarcar un intervalo
razonable de concentraciones del analito.
La concentracin de la muestra se calcula a partir de la ecuacin de la recta de calibrado
sustituyendo su valor de A y despejando la c correspondiente
37
Calibracin con patrones de concentracin conocida
A ( = 508 nm)
A
muestra
Analito en la
muestra
38

Mtodo de las adiciones estndar
Cuando se analizan muestras complejas, como alimentos cenizas
vegetales, suele ser imposible o muy difcil preparar estndares que se
asemejen a las muestras.
En este caso, el mtodo de las adiciones estndar es til para contrarrestar
los efectos de matriz.
Mtodo de las adiciones estndar. El mtodo de un solo punto

Se toman dos porciones de la muestra
Una porcin se mide como de costumbre
A la segunda porcin se le agrega una cantidad conocida de la disolucin
estndar de analito
Ambas respuestas se utilizan entonces para calcular la concentracin
desconocida, suponiendo una relacin lineal entre la respuesta y la
concentracin del analito
39
Mtodo de las adiciones estndar. El mtodo de un solo punto

Absorbancia de la primera disolucin
A1 = K cx
cx concentracin desconocida de analito en la 1 disolucin
K constante de proporcionalidad.
Absorbancia de la segunda disolucin

A2 = (K vx cx / v t) +( K v s c s / v t)
vx volumen de la disolucin de concentracin desconocida de analito,

vs volumen agregado de la disolucin estndar de analito,
v t es el volumen total despus de la adicin y
cs es la concentracin de la disolucin estndar de analito
cx = A1 v s c s / A 2 v t - A1 vx
40
Mtodo de las adiciones estndar. El mtodo de las adiciones mltiples
Varias alcuotas idnticas Vx de la solucin desconocida con concentracin Cx se

transfieren a matraces volumtricos de volumen Vt.
A cada uno de esos matraces se le aade un volumen variable Vs de una
disolucin patrn del analito, con concentracin conocida Cs.
Despus, se aaden los reactivos que originan el color y se diluye cada solucin
hasta un volumen Vt.
Si el sistema qumico sigue la ley de Beer,
A i= ( b Vs Cs / Vt ) + ( b Vx Cx / Vt ) = K Vs Cs + K Vx Cx
K es una constante = b / Vt
Una grfica de AI en funcin de Vs debe originar una recta de la forma
A i = m Vs + b
Donde la pendiente m y la ordenada en el origen b vienen dadas por
m = K Cs y n = K Vx Cx
El anlisis de mnimos cuadrados de los datos se puede utilizar para
determinar m y b; despus, es posible calcular Cx a partir del cociente de esas
dos cantidades y los valores conocidos de Vx y Cs
Cx = (Cs / Vx ) ( n/m) 41
Mtodo de las adiciones estndar . El mtodo de las adiciones mltiples
A0 A1 A2 A3
A = mc+b 0 = mc muestra + b Cmuestra = b/m
c1 c2 c3 Concentracin aadida del estndar

Concentracin
de la muestra
42
Aplicaciones al anlisis de alimentos

La espectroscopia en la regin ultravioleta-visible (UV-Vis) es una de las
tcnicas de laboratorio ms comnmente encontradas en el anlisis de los
alimentos.
Ejemplos:
Cuantificacin de macrocomponentes (el contenido total de hidratos de
carbono, por medio del mtodo del fenol-cido sulfrico)
Las estimaciones de enranciamiento (el estado de la oxidacin de los
lpidos, por medio del ensayo del cido tiobarbitrico)
Determinacin de pigmentos basada en su absorcin de radiacin en la
zona del visible
Especies que no absorben
Anlisis del contenido de protenas solubles. en el Visible: mediante su
Determinacin de nitritos en jamn de York reaccin previa con
reactivos adecuados para
Determinacin de hierro en vinos dar un compuesto
Determinacin de fosfato en bebidas coloreado
43
CRDITOS DE LAS ILUSTRACIONES PICTURES COPYRIGHTS
-Logo encabezado pginas OCW-UM. Autor: Universidad de Murcia. Direccin web: http://ocw.um.es.
44

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Escuela: Ingeniera Qumica

2. Absorcin de radiacin electromagntica

3. Fundamentos de la espectrofotometra de absorcin UV-Vis

4. Leyes de la absorcin de la radiacin: Ley de Lambert Beer

Mtodos Instrumentales de Anlisis

Mtodos de emisin: Miden la radiacin electromagntica emitida

La radiacin electromagntica es una forma de energa que

La radiacin electromagntica puede describirse segn:

la teora ondulatoria: formada por ondas sinusoidales

la teora corpuscular: flujo de partculas o corpsculos de

La potencia P: es la energa del haz que llega

Teora corpuscular. Propiedades corpusculares de la radiacin electromagntica

Abarca un intervalo muy amplio de

Segn su recibe diferentes

La luz visible, que es la nica

2. Absorcin de radiacin electromagntica

Absorcin: proceso por el cual una especie, en un medio

2. Absorcin de radiacin electromagntica

Para que la radiacin electromagntica sea absorbida por la materia

h : energa del fotn absorbido

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Mtodo instrumental ptico basado en la medida directa de la

La regin ultravioleta comprende entre 10 y 400 nm y la

Las radiaciones UV y visible tienen en comn el hecho de

Los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Un analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Atenuacin de un haz de radiacin por Transiciones energticas en la

Absorbancia = A = - log T = log P0 /P

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Absorbancia: es la atenuacin de la intensidad de la radiacin cuando sta

Absorbancia = - log T = log P0 /P

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

El mximo de absorbancia obtenido max nm

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Teora del color

La sensacin de color se produce cuando disminuye

Si el ojo recibe luz de todas las de la regin visible el efecto es

El color aparente siempre es el color complementario del que ha

Los colores complementarios son tiles para predecir la de

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Teora de la absorcin molecular. Cambios de energa durante la absorcin

Etotal= Eelectrnica + Evibracional + Erotacional

molcula puede ser utilizada para

Diagrama de niveles de energa

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Tipos de transiciones electrnicas : Cuando

Transiciones electrnicas entre niveles de energa moleculares

3. Fundamento de la Espectrofotometra de Absorcin UV-visible

Sus electrones ms exteriores o electrones de enlace

Grupos que no producen por s mismos bandas de

Bandas de Responsables del color de muchos iones y compuestos de

4. Leyes de la absorcin de la radiacin

Las dos leyes fundamentales que rigen el comportamiento de la fraccin de

Ley de Lambert: predice el efecto que produce el espesor del medio-muestra

Ley de Beer: establece el efecto de la concentracin del medio-muestra

4. Leyes de la absorcin de la radiacin

Ley de Lambert-Beer: muestra cmo la absorbancia es directamente

-Disoluciones que contienen varias especies absorbentes:

4. Leyes de la absorcin de la radiacin