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2016
5.3 DETERMINACION DE
PROTEINAS
Mtodo de Micro-kjeldahl
Adicionar 2 mL de Al tubo de
acido sulfrico
destilacin
concentrado 2 mL
del perxido de Echar 10 mL
hidrogeno al 30% de hidrxido
y digerir por de sodio
completo al 50%
Colocar el erlenmeyer
Enfriar a T
en el condensador
ambiente +
cuidando que el
25 mL de agua
extremo de este
destilada y
quede sumergido
llevar
en el cido brico
a unos tubos
destilar de 50 a
de destilacin
75 mL
Calculo:
2 4 2 4 1.4007
% =
Se le adiciona
una gota de
continuar el lavado, la solucin
hasta que el saturada de
agua corra clara yodo y si se
y recoger las torna azul
muestras en se comprueba
lunas de reloj. la existencia
del almidn
%Gluten Hmedo = N/P x 100
Donde:
Colocarlas en un
Pesar 2 gramos de harina, desecador hasta que llegue
colocarla en un crisol de Filtrar recibiendo en
a temperatura ambiente,
baln volumtrico de
porcelana y secar por 5 luego aadir 5mL de HCl
100mL, calentar 2mL
horas en mufla a 550 C 6M y concentrar en bao
de vapor de HCl 6M por
5 minutos y
adicionarlo
al filtrado
}
Calculo:
CMx = (Amx.Cst)/Ast .F.D
Agitar todas
Transferir Mezclar
las diluciones
Uso de pipetas
Aadir Conteo
estriles
Recuento
de UFC
RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES
Y FECALES
Tomar
Aadir agar
Transferir Solidificar colonias y
VRBA
transferir
Incubar,
Homogenizar Mezclar Incubar examinar y
determinar
Transferir
Homogenizar Pipetear
Mezclar y estriar
Observar
MATERIALES
Baln Kjeldahl
Beakers
Baln volumtrico
Buretas
Cpsula de porcelana
Crisol
Embudo de vidrio
Erlenmeyers
Goteros
Microesptulas
Probeta graduada
Pedazo de lino
Pipeta volumtrica
Probeta graduada
Papel Tornasol Rojo
Tamiz de seda
Vidrio de reloj
EQUIPOS
Balanza analtica
Bao de Mara
Cmara de Flujo Laminar
Cuenta Colonias
Desecador
Espectrofotmetro
ultravioleta visible
Estufa
Hot plate
Horno
Mufla
REACTIVOS
Sulfato de Potasio AR
Sulfato de Cobre II Pentahidratado
AR
Solucin de Sulfato de Zinc 2% cido Sulfrico 96% AR
N
Solucin Estndar de Hidrxido de Sodio 0.4 Solucin de Hidrxido de Sodio al
cido Sulfrico 4 N 30 %
Solucin de Yoduro de Potasio 50% Acido Sulfrico 0.1 N
Solucin de Molibdato de Amonio 3% Solucin de Hidrxido de Sodio
0.1N
Solucin Estndar de Yoduro de Potasio 0.00359
Hidrxido
Solucin Estndar de To sulfat de Sodio 0.00359 N. de Sodio 1 N
cido Clorhdrico 37% AR Solucin saturada Solucin
de Yodo de Almidn
Solucin Clorhidrato de Hidroxilamina 10 % Yodato de Potasio 0.00359 N
Solucin Buffer PH 3.5 Agar plate count
Solucin de Ortofenantrolina Agua peptonada bufferada
Agar papa dextrosa
cido tartrico
Agar rojo violeta bilis
Caldo LMX
Endo caldo (Ec)
Agar eosina azul de metileno
Agar Salmonella Shigella
PREPARACION DE REACTIVOS
Solucin Estndar
Solucin de Solucin stock:
de Yodato de
Sulfato de zinc
Potasio
Agar Violeta
Cristal Rojo Agua Peptonada: Caldo EC.
Neutro Bilis
(VRBA)