4.

3
Balances de grado de
reduccin en reacciones
bioqumicas
BALANCES DE GRADO DE REDUCCIN
Debemos conocer la composicin elemental de la clula,
para lo cual se comienza por definir la composicin
molecular.
BALANCES DE GRADO DE REDUCCIN
Debemos conocer la composicin elemental de la clula:
BALANCES ELEMENTALES Y COEFICIENTES ESTEQUIOMTRICOS

Consumo de sustratos, crecimiento y formacin de producto:

Fuente de Fuente de Clula Producto
carbono nitrgeno extracelular

Las ecuaciones de balance para los elementos C, H, O y N:

COEFICIENTES ESTEQUIOMTRICOS
Tenemos seis coeficientes estequiomtricos
desconocidos (a, b, g, d, e y k) y solo cuatro balances o
ecuaciones.

Coeficiente respiratorio:

Que relaciona otro dos coeficientes

GRADO DE REDUCCIN
El grado de reduccin de un compuesto orgnico es
definido como el nmero de moles de electrones
disponibles (por g de tomo de carbono) para transferir
al oxgeno por combustin de un compuesto hasta CO2,
H2O y N2.

Es el nmero de equivalentes de electrones disponibles

por g de tomo de carbono del compuesto.

Los grados de reduccin para:

BALANCE DE GRADO DE REACCIN
Una ecuacin de balance para electrones disponibles sera:

Y se puede rearreglar como:

Como se discuti con anterioridad, en realidad hay una
restriccin menos, ya sea como el hidrgeno o el balance de
oxgeno se deben utilizar para calcular (la no medible)
velocidad de produccin de agua.

Obviamente, el agua puede ser excluida por la eliminacin del

coeficiente de rendimiento para el agua entre los balances de
O y H.
Un enfoque ms elegante es usar el llamado balance
generalizado de grado de reduccin, que se deriva como una
combinacin lineal de los balances elementales.

Este balance fue presentado por Roels (1983) como una

generalizacin de los trabajos anteriores de Erickson et al.
(1978).

Se genera mediante la adicin de los balances elementales y

despus multiplicndolos por un determinado factor.

Mediante la eleccin de los factores de multiplicacin

apropiados, los coeficientes de rendimiento (o velocidades)
del agua, dixido de carbono, y la fuente de nitrgeno se
eliminan de la ecuacin resultante.
Grado de reduccin
Es el nmero de equivalentes de electrones disponibles por g de
carbono tomo.

Carbn = +4
Hidrgeno = +1
Oxgeno = -2
Nitrgeno = -3

Glucosa: CH2O = 1(4) + 2(1) + 1(-2) = 4 + 2 2 = 4

Basados en sta convencin:

Dixido de carbono CO2 = 1(4) + 2(-2) = 0

Agua H2O = 2(1) + 1(-2) = 0
Amoniaco NH3 = 1(-3) + 3(1) = 0
Balances elementales en un modelo simple de caja negra
Volvemos al modelo de caja negra.

Con la composicin elemental de la biomasa dado

anteriormente, podemos escribir la composicin elemental
de la matriz E como:

X e C W S O N
Cuando r se sustituye por un vector que especifica los coeficientes de
rendimiento:
La primera y ltima filas son idnticas a los balances
derivados anteriormente para el carbono y nitrgeno,
respectivamente.

Los saldos de hidrgeno y oxgeno introducen dos

restricciones adicionales.

Sin embargo, debido a que la tasa de formacin de agua es

imposible de medir, una de estas ecuaciones se deben utilizar
para el clculo de este ndice (o rendimiento).

Esto deja slo una restriccin adicional a partir de estos dos

balances.
Vamos a considerar los balances elementales encontrados, y
multiplicar el balance de carbono por 4, el balance de
hidrgeno por 1, el balance de oxgeno en -2, y el balance de
nitrgeno por -3 para obtener lo siguiente:

La ecuacin resultante es el balance generalizado de

grado de reduccin para el sistema.
Algunas consideraciones

1. Por supuesto, este balance no es independiente de los

otros balances elementales.

2. Normalmente reemplaza el balance ya sea de oxgeno o el

de hidrgeno, mientras que el otro se utiliza para calcular
la velocidad de formacin de agua.

3. Finalmente, se tienen los balances del carbono, nitrgeno,

y el balance del grado de reduccin a utilizar para el
anlisis de la consistencia o para el clculo de las
velocidades no medibles.
Interpretacin

En la formulacin original de Erickson et al. (1978), el factor

de multiplicacin de cada uno de los balances de C, H, O y N
fue interpretado como el nmero de electrones libres
disponibles en el C, H, O y N, respectivamente, para la
transferencia al oxgeno en la combustin de cada elemento
del agua, dixido de carbono, y amonaco (como fuente de
nitrgeno).

Para el balance de nitrgeno el multiplicador siempre fue

tomado -3, ya que esta es la valencia predominante del
nitrgeno en la biomasa.
Interpretacin (contina)

En el concepto generalizado de Roels, los factores de

multiplicacin son coeficientes arbitrarios libres para ser
elegidos de tal manera que los coeficientes resultantes para
el agua, dixido de carbono, y la fuente de
nitrgeno desaparecen.

De esta manera, si se utiliza otra fuente de nitrgeno, por

ejemplo, nitrato de amonio, se selecciona un factor de
multiplicacin diferente para el balance de nitrgeno con el
fin de eliminar el coeficiente de rendimiento para la fuente
de nitrgeno a partir del balance generalizado del grado de
reduccin.
El coeficiente que multiplica el rendimiento en el balance
generalizado de grado de reduccin se llama el grado de
reduccin del compuesto correspondiente.

Con la generalizacin de Roels, el grado de reduccin de los

compuestos que contienen nitrgeno depende de la fuente
de nitrgeno utilizada.

En la mayora de los casos el amonio se utiliza ya sea como

nica fuente de nitrgeno o en combinacin con otra fuente
de nitrgeno, obtenindose la siguiente expresin general
para el grado de reduccin k de un compuesto con la
composicin elemental CHaObNc:
Con la introduccin de un grado de reduccin k de
compuesto, el balance generalizado del grado de reduccin
para cualquier sistema viene dado por:

Este balance es muy til ya que es fcil de configurar y, junto

con los balances de carbono y nitrgeno, contiene todas las
limitaciones impuestas por los cuatro balances elementales.
 Balance generalizado de grado de reduccin
Considerar la j reaccin intracelular, generar una
combinacin lineal de los I balances elementales
multiplicando el i balance elemental por el factor li, y
sumar todos los balances.

donde el ndice j en las matrices estequiomtricas indica la fila j de

la matriz.
 Balance generalizado de grado de reduccin
Los factores de multiplicacin se recogen en el vector
de la columna de dimensin I.

El i elemento (ki) en uno de los vectores Ks, Kx y Kp es

llamado grado de reduccin generalizado de las i
especies.

Al elegir los li factores de multiplicacin tales que el

grado de reduccin generalizada se convierta en cero
para algunas de las sustancias, la ecuacin se reduce a
una ecuacin algebraica donde los coeficientes
estequiomtricos para estas especies desaparecen.
 Obtencin de los valores de los multiplicadores

Biomasa Producto metablico Fuente de carbono

1
Fuente de nitrgeno

Fuente de S Fuente de P

Ocho (8) Coeficientes estequiomtricos: g, bp, bc, bw, aN, aO, as y ap.
Seis (6) Balances elementales: C, H, O, N, S y P.
Sobran dos (2) coeficientes que deberan ser determinados experimentalmente.
El balance generalizado del grado de reduccin est dado por:

Buscamos los seis factores arbitrarios li .

lH = 1 se usa como un factor de escala
Se busca eliminar a los coeficientes bC, bW, aN, aS y aP
De sta manera se obtiene una relacin lineal entre g, bP y aO para li
 Grados de reduccin generalizados
De la biomasa

Para la fuente de carbono

Para el producto metablico

Por nuestra eleccin del factor de multiplicacin, el grado de

reduccin de CO2, H2O y las fuentes de nitrgeno, azufre y fsforo
se han establecido a cero.
Definicin del grado de reduccin
(Erickson, 1978 & Roels, 1983)

El grado de reduccin es el nmero de electrones disponibles para

transferir al oxgeno en la combustin del compuesto.

Si despreciamos el contenido de S y de P de la biomasa y se usan

los valores de los multiplicadores indicados, el grado generalizado
de reduccin de la biomasa est dada por
Ejemplo
Aplicacin del balance generalizado del grado de reaccin
Retomamos algunas ecuaciones obtenidas anteriormente

NADP+ + H+ + 2e- - NADPH = 0

NADH (o NADPH) pueden considerarse como H2 y un grado de

reduccin generalizado apropiado es 2.

El ATP (y el ADP) acta como un acarreador de la energa libre, su

grado de reduccin generalizado es cero.
A partir del balance de carbono, g32 es 1 C-mol PYR / C-mol CO2,

g342 g32kPYR = 0
-g542 + 4 = 0

Insertando kPYR = 10/3 = 3.33, se obtiene

g34 = 1.67 moles NADH / mol CO2;

g54 = 2 moles NADH / mol oxgeno.
Ejemplo
Crecimiento anaerbico con formacin de etanol
El etanol es el metabolito primario principal cuando el piruvato
sirve como aceptor de electrones..

El balance de grado de reduccin generalizado es

kxg ks + kpbp = 0
El tpico rendimiento de biomasa a partir de glucosa para la
fermentacin anaerbica de levaduras es de 0.115 g biomasa por g
de glucosa.

Con una composicin de la biomasa de CH1.8O0.5N0.2 que

corresponde a 0.140 C-mol biomasa por C-mol de glucosa

bp = ks/kp (kx/kp)g = 4/6 (4.2/6)0.14 =

0.569 C-mol etanol / C-mol glucosa
 Ejemplo
Crecimiento aerbico con formacin de metabolito
En un medio mnimo con glucosa, amoniaco y sales inorgnicas.
Se producen dixido de carbono y etanol.
La composicin de la biomasa es CH1.8O0.5 N0.2

El proceso es descrito por la reaccin

gCH1.8O0.5N0.2 + bcCO2 + bpCH3O1/2 + bwH2O CH2O aNNH3 aOO2 = 0

El balance de carbono
g + b c + bp 1 = 0
El balance generalizado de grado de reduccin
gkx + bpkp ks + 4aO = 0
Resolviendo a partir de las ecuaciones anteriores

(4 kpRQ)aO + kp ks
g =
kp kx

(4 kxRQ)aO + kx ks
bp =
kx kp
g (C-moles de biomasa formados por C-mol de glucosa consumido)
bc (C-moles de etanol formados por C-mol de glucosa consumida)
RQ = bc/aO (moles de CO2 producido / moles de O2 consumido) = 3.
aO (moles de oxgeno usados por C-mol de glucosa consumida) = 0.1
Los grados de red.: biomasa (kx=4.2), etanol (kp=6) y glucosa (ks=4)

g = 0.333 C-mol biomasa / C-mol glucosa

bp = 0.367 C-mol etanol / C-mol glucosa
Anlisis de la consistencia de datos en cultivos
anaerbicos de levaduras

Datos de los cultivos continuos anaerobios de S. cerevisiae de

Schulze (1995).

Los coeficientes de rendimiento (todos en C-moles o moles por

C-mol de biomasa), obtenidos en condiciones de limitacin de
glucosa:

Glucosa (Yxs), etanol (Yxe), bixido de carbono (Yxc), y glicerol (Yxg)

En primer lugar, el balance de carbono

se cumple dentro del 2% en D = 0,1 h-1 y del 1% en D = 0,2 h-1.

Tales desviaciones (estimado en relacin con el suministro de

carbono en forma de glucosa) son muy satisfactorias.

El balance generalizado del grado de reduccin:

La composicin elemental de la levadura se determin en

CH1.78 O0.60N0.19.
Por lo tanto, el grado de reduccin de la biomasa es 4,01, y,
tras la sustitucin de los coeficientes de rendimiento a partir
de la tabla anterior, el balance generalizado del grado de
reduccin se encontr cercano a 3% en ambos casos (de
nuevo la desviacin se da en relacin a la glucosa) .

Es interesante observar que para D = 0,1 h-1 el grado de

reduccin de la "falta de carbono" se encuentra (invocando
el balance de carbono de tal manera) a estar cercano a 6, lo
que indica que la medicin de etanol puede estar
subestimada.

Este es un problema general en la levadura y otros cultivos

en los que se producen compuestos voltiles, y una prdida
de carbono en el entorno de menos de 2% en estos cultivos
generalmente se considera aceptable.