UNIDAD I

LAS BACTERIAS
 OBJETIVO DE LA UNIDAD
Al finalizar la unidad el alumno ser capaz
de aplicar el conocimiento acerca de las
caractersticas estructurales, morfolgicas,
bioqumicas, genticas, patognicas y
taxonmicas de las bacterias, para apoyar
el diagnstico y orientar la teraputica.
 PROCARIOTAS
1.Su material gentico (DNA) no est
rodeado de una membrana.
2. Carecen de organelos membranosos.
3. Su DNA no est asociado a protenas
de la clase de las histonas
4. Sus paredes celulares contienen casi
siempre pptido glucano, un
polisacrido complejo.
5. Suelen dividirse por fisin binaria. En
este proceso se copia el DNA y la clula
se divide en dos.
 BACTERIOLOGA.

Subdisciplina de la
Microbiologa que se encarga
del estudio de las bacterias.
 BACTERIOLOGA
Louis Pasteur.
Robert Koch

Pasteurizacin.
Vacuna contra el
antrax.
Postulados de Koch.
Mycobacterias.
BACTERIAS DE INTERS EN MEDICINA
VETERINARIA.

Actinobacillus
pleuropneumoniae.
Pasteurella multocida.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mannheimia haemolytica
Mycobacterium bovis.
Escherichia coli en aves.
Salmonella spp.
Escherichia coli
Lawsonia intracellularis
Campylobacter spp.
Clostridium spp.
 BACTERIAS DE INTERS EN
SALUD PBLICA
Salmonella spp.
Campylobacter spp.
Serotipos de
Escherichia coli.
Brucella spp.
Mycobacterium spp.
Leptospira spp.
Bacillus spp
BACTERIAS DE INTERS EN LA
INDUSTRIA.
ALIMENTOS: LACTOBACILLUS
(YOGHURT, QUESO, CREMA,
MANTEQUILLA).
ANTIBITICOS: TETRACICLINA,
ESTREPTOMICINA.
BIOTECNOLOGA: HORMONAS (
INSULINA), PROTENAS (INTERFERON)
TRANSGNICOS
PCR: Thermus aquaticus.
BACTERIAS
MORFOLOGA
COMO ES UNA BACTERIA ?
MORFOLOGA BACTERIANA
PEQUEAS ( 1m).

IDENTIFICACIN
MICROSCPICA
BASADA EN:
FORMA DE LA
CLULA Y DE
AGRUPACIN,
REACCIN DE
GRAM, MOTILIDAD.
MORFOLOGIA BACTERIANA
COCOS:

FORMAS
REDONDAS.

Ejem:
Staphylococcus
spp, Streptococcus
spp.
 COCOS
SE AGRUPAN
EN PARES,
TTRADAS,
CADENAS Y
RACIMOS.
MORFOLOGIA BACTERIANA
BACILOS:
FORMAS
ALARGADAS
EN FORMA DE
BASTON.
Ejem:
Escherichia
coli, Bacillus
spp.
BACILOS
MORFOLOGA BACTERIANA

ESPIRALES:
EN FORMA DE
RESORTE.

Ejem: Leptospira
spp,
Campylobacter
spp.
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Estructura bacteriana
ESTRUCTURA DE LAS BACTERIAS
 COMO CRECE UNA
BACTERIA ?
CRECIMIENTO = INCREMENTO EN EL
NMERO DE CLULAS POR FISIN BINARIA.
NUTRIENTES NECESARIOS EN CANTIDADES
SUFICIENTES.
CONDICIONES MEDIO AMBIENTE (
TEMPERATURA, pH, OXGENO
 FISIN BINARIA
Se copia el material gentico
(DNA) y se deposita en los
extremos de la clula.
Protena de fisin se ensamblan en
forma circular al centro de la clula.

El citoplasma se divide en dos sin

afectar al DNA. En muchas
bacterias la pared
celular es sintetizada.
FISIN BINARIA
 FISIN BINARIA

TIEMPO GENERACIONAL.

E. coli = 20 min.
Mycobacterium = 24 hrs.
CROMOSOMA BACTERIANO

Escherichia coli
4.7 millones de pares
de bases.
Puede sintetizar 1700
enzimas.
Tiene genes para 1700
ARNm.
 PLSMIDOS

DOBLE CADENA CIRCULAR DE DNA CON

CAPACIDAD DE AUTOREPLICACIN.

NO CODIFICAN PARA FUNCIONES ESENCIALES

POSEE INFORMACIN PARA RESISTENCIA A
ANTIBITICOS O CAPACIDAD DE CONJUGACIN (
FACTOR F).
PLASMIDOS
 MECANISMOS DE
PATOGNESIS BACTERIANA
ENFERMEDADES CAUSADAS POR
BACTERIAS: UN EJEMPLO.
INGLATERRA 1665.
PESTE NEGRA
(GRAN PLAGA,
PESTE BUBNICA).
100,000 MUERTOS.
 LA GRAN PLAGA

En 1849 durante una epidemia

en Hong Kong Alexandre
Yersin y Shibasaburo Kitasato
(Tokio), aislaron al bacilo
Pasteurella pestis (ahora
Yersinia pestis) responsable
de la peste bubnica.
2001. Genoma completo.
Bioterrorismo.
 ESTUDIOS DE PATOGENICIDAD

Robert Koch obtuvo en 1905 el

Premio Nobel de Fisiologa y
Medicina.
Padre de la bacteriologa
moderna.
Demostr que las enfermedades
infecciosas estn provocadas
por microorganismos y elabor
tcnicas para aislar e identificar
bacterias patgenas
 POSTULADOS DE KOCH
1.- El agente siempre deber ser
encontrado en los animales
enfermos pero no en los sanos.
2.- El agente deber ser aislado de los
animales enfermos y poder aislarse
en cultivo puro.
3.- El agente aislado en cultivo puro
deber iniciar un proceso infeccioso
cuando sea inoculado en un animal
susceptible.
4. El agente deber ser aislado de
nuevo del animal infectado de
manera experimental.
MECANISMOS
DE
PATOGNESIS
BACTERIANA
 PATOGENICIDAD
HABILIDAD PARA
PRODUCIR
ENFERMEDAD EN
UN HUSPED.

PATGENO.
 VIRULENCIA
GRADO DE PATOGENICIDAD.
FACTORES DE VIRULENCIA
CARACTERSTICAS GENTICAS,
BIOQUMICAS O ESTRUCTURALES
QUE LE PERMITEN A UN
MICROORGANISMO PRODUCIR
ENFERMEDAD EN UN HUSPED.
 INTRODUCCIN
LAS BACTERIAS
CAUSAN DAO AL
HUESPED POR DOS
MECANISMOS:

INVASIVIDAD

TOXIGNESIS
INVASIVIDAD
 INVASIVIDAD:

COLONIZACIN (ADHERENCIA Y
MULTIPLICACIN).
EVASIN DE LOS MECANISMOS DE
DEFENSA DEL HUESPED.
PRODUCCIN DE SUSTANCIAS QUE
FACILITAN LA INVASIN
 INVASIVIDAD
COLONIZACIN:

ESTABLECIMIENTO DEL PATGENO

EN LOS TEJIDOS DEL HUESPED (TGI,
TGU, TR, CONJUNTIVA).
ADHERENCIA: RECEPTORES Y
ADHESINAS
 INVASIVIDAD
FACTORES DE
ADHERENCIA:

Fimbrias o pilis
Cpsula
LPS
Acidos teicoicos y
lipoteicoicos
ADHERENCIA
ADHERENCIA
INVASIN DE TEJIDOS
INVASIN DE TEJIDOS
FACTORES DE DISEMINACIN
HIALURONIDASA (Streptococcus
spp Staphylococcus spp,
Clostridios).

COLAGENASA (C. perfringens).

NEURAMINIDASA (Patgenos
entricos).

ESTREPTOQUINASA
(Streptococcus spp)

ESTAFILOQUINASA
(Staphylococcus spp)
ENZIMAS QUE PRODUCEN POROS
EN LA MEMBRANA CELULAR

FOSFOLIPASAS

LECITINASAS

HEMOLISINAS
BACTERIAS INTRACELULARES
BACTERIAS QUE PUEDEN
SOBREVEVIR Y
MULTIPLICARSE DENTRO
DE LOS MACRFAGOS:

Listeria monocytogenes
Mycobacterium tuberculosis
Brucella abortus.
Salmonella spp
Evaluacin de la sesin.
TOXIGNESIS
 INTRODUCCIN
DOS TIPOS DE TOXINAS
BACTERIANAS:

EXOTOXINAS
ENDOTOXINAS
 TOXIGNESIS
POR SU NATURALEZA QUMICA:

EXOTOXINAS: PROTENAS. LIBERADAS EN

EL MEDIO EXTRACELULAR POR BACTERIAS
VIVAS

ENDOTOXINAS: LIPOPOLISACARIDOS (LPS).

ASOCIADOS A LA MEMBRANA EXTERNA DE
LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
EXOTOXINAS
 EXOTOXINAS
SON PROTENAS
SON ALTERADAS POR EL CALOR,
ACIDOS, ENZIMAS PROTEOLTICAS.
TIENEN ACTIVIDAD BIOLGICA ALTA.
TIENEN UNA ACCIN ESPECFICA.
 EXOTOXINAS
TOXINAS PROTEICAS
PROTEINAS SOLUBLES SECRETADAS POR
LAS BACTERIAS VIVAS EN LA FASE DE
CRECIMIENTO EXPONENCIAL.

BACTERIAS GRAM + o -

FORMAN TOXOIDES ( TOXOIDE TETNICO).

Clostridium tetani, C. botulinum, Bacillus

anthracis, S. aureus, E. coli,
 EXOTOXINAS
Se pueden clasificar en varias categoras
basadas en su efecto biolgico en la clula
husped:
Neurotoxinas.
Citotoxinas
Enterotoxinas
Ejemplo: Neurotoxina C. botulinum
Acta sobre las motoneuronas evitando la
liberacin de acetil colina en las uniones
neuromotoras, produciendo parlisis flcida.
ENDOTOXINAS
 ENDOTOXINAS (LPS).
ASOCIADAS A LA MEMBRANA
EXTERNA DE LAS BACTERIAS GRAM
NEGATIVAS (E. coli, Salmonella
spp,Pseudomonas spp, Haemophilus spp)

LIPOPOLISACARIDOS
 ENDOTOXINAS (LPS).

LIPIDO A:
COMPONENTE
TXICO

NCLEO DE
POLISACARIDOS:
DETECCIN DE
TOXINA

POLISACARIDO O:
DETERMINANTE
ANTIGENICO
(ANTGENO
SOMTICO)
 CARACTERSTICAS DE LAS
ENDOTOXINAS
MENOS ESPECFICAS
SON TERMOESTABLES
SU TOXICIDAD RADICA EN EL LIPIDO
A DE LOS LPS.
NO FORMA TOXOIDES
SON ANTGENOS DBILES.
LIBERACION DE LA
ENDOTOXINA
 EFECTOS DE LAS
ENDOTOXINAS
FIEBRE
LEUCOPENIA
HIPOGLUCEMIA
HIPOTENSIN Y CHOQUE
COAGULACIN INTRAVASCULAR
REACCIN DE SHWARTZMAN
ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO
(INFLAMACIN AGUDA).
 CARACTERISTICAS DE LAS
ENDOTOXINAS Y EXOTOXINAS
BACTERIANAS
PROPIEDADES ENDOTOXINA EXOTOXINA

NATURALEZA LPS PROTEINA

QUIMICA
RELACION CON MEMBRANA EXTERNA EXTRACELULAR
LA CELULA
EFECTO DEL NO SI
CALOR
ANTIGENICA POBRE SI

FORMA TOXOIDES NO SI

POTENCIA BAJA ALTA

 CRITERIOS DE
CLASIFICACIN BACTERIANA
 INTRODUCCIN
LAS BACTERIAS SE CLASIFICAN E
IDENTIFICAN PARA DISTINGUIR UN
ORGANISMO DE OTRO.
NOS PERMITE AGRUPAR A LOS
MICROORGANISMOS DE ACUERDO CON
DIFERENTES CRITERIOS DE INTERS.
EL NIVEL MAS IMPORTANTE ES LA
ESPECIE
LAS ESPECIES SON IDENTIFICADAS EN EL
LABORATORIO A TRAVS DE:

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS,
BIOQUMICAS Y PATOGNICAS.
PRODUCCIN DE TOXINAS, PRESENCIA DE
PLSMIDOS ESPECFICOS.
PATRONES DE SENSIBILIDAD A
BACTERIFAGOS.
GENES O SECUENCIAS ESPECFICAS
 TAXONOMIA
CIENCIA DE LA CLASIFICACIN,
IDENTIFICACIN Y NOMENCLATURA.

NIVELES DE ORGANIZACIN:

FAMILIA: ENTEROBACTERIACEAE
GNERO: SALMONELLA
ESPECIE: ENTERITIDIS
 CLASIFICACIN
ARREGLO ORDENADO DE LAS BACTERIAS
EN GRUPOS.
CON BASE EN CRITERIOS NO CIENTFICOS
MAS BIEN POR INTERESES.
SEROTIPO
PATRONES DE RESISTENCIA
ANTIMICROBIANA PRODUCCION DE
TOXINAS, MUTACIONES ESPECFICAS Y
PLSMIDOS.
 IDENTIFICACIN
USO PRCTICO DE LOS CRITERIOS DE
CLASIFICACIN PARA DISTINGUIR
CIERTOS ORGANISMOS DE OTROS,
CON EL FIN DE VERIFICAR LA
AUTENTICIDAD O UTILIDAD DE UNA
CEPA O PARA AISLAR E IDENTIFICAR
EL ORGANISMO QUE CAUSA CIERTA
ENFERMEDAD.
 NOMENCLATURA
MEDIO A TRAVS DEL CUAL SE
DEFINEN LAS CARACTERISTICAS DE
UNA ESPECIE Y SE NOMBRAN.

EL NOMBRE DE UNA ESPECIE DEBE

SIGNIFICAR LOS MISMO PARA TODOS
LOS MICROBILOGOS.
 DOS NOMBRES
GENERO: Salmonella, Brucella,
Pasteurella, Streptococcus,
Staphylococcus, Pseudomona,

ESPECIE. pullorum, abortus, multocida,

uberis, aureus, aeruginosa.
 BASADO EN:
MORFOLOGA.
REACCIN DE
GRAM
REQUERIMIENTOS
DE OXGENO
FORMACIN DE
ESPORAS
 OTROS FACTORES
CULTIVOS:
MORFOLOGA
COLONIAL.
ANTIGNICOS
REACCIN
BIOQUMICA.
DNA: CONTENIDO G+C
SECUENCIA
RIBOSOMAL
SECUENCIA
GENMICA TOTAL.
 CINCO GRUPOS
GRAM POSITIVAS
GRAM NEGATIVAS
ESPIROQUETAS
ACIDO ALCOHOL
RESISTENTES
(Mycobacterias).
BACTERIAS CARENTES
DE PARED CELULAR (
Mycoplasmas).
 COMO SE ESCRIBEN LOS
NOMBRES DE LAS BACTERIAS ?
GNERO Y ESPECIE.
USAR CURSIVAS O SUBRAYADO
GNERO: Mayscula al inicio.
ESPECIE: minscula.
Brucella abortus
Escherichia coli.
SI SLO SE MENCIONA EL GNERO
USAR spp.

Salmonella spp.
Brucella spp.
Haemophilus spp
 DONDE CONSULTAR ?
BERGEYS MANUAL OF
DETERMINATIVE BACTERIOLOGY.
NOVENA EDICIN 1994.

SITIO DE LA SOCIETY FOR

SYSTEMATIC AND VETERINARY
BACTERIOLOGY
http://www.bacterio.cict.fr/sbsv/sbsvenglish.htm
TOMA DE MUESTRAS PARA
ESTUDIO BACTERIOLGICO
CARACTERSTICAS DE LAS MUESTRAS
PARA ESTUDIO BACTERIOLOGICO

Tomar muestras de animales que presenten

signos y lesiones caractersticas del problema

Tomar las muestras para bacteriologa al

principio de las necropsia

No considerar animales que ya presenten

cambios post mortem
rganos: 300 gr aprox.
Colocar en bolsas limpias
individuales e
identificadas.

Fluidos (articulaciones,
LCR, cavidad pericrdica):
Colectar con jeringa estril

Hisopos ticos u oculares:

Colocar el hisopo en un
tubo estril con SSF. No
romper el hisopo.
 Orina: Cistocentesis o catter.
Transportar en una jeringa o frasco
estril. Guardar en refrigeracin no mas
de 8 hrs.

Heces: 2 a 3 gr, en bolsas limpias y en

algunos casos hisopos en tubos estriles
con SSF.
Casos de aborto: Feto
completo, pulmn,
hgado, pieza de
placenta.

Abscesos: Tomar con

jeringa estril 3ml de
pus de abscesos recin
formados.

Leche: Tomar 30 ml en
un frasco estril previa
desinfeccin.
Muestras de agua:
Colectar directamente de la
fuente de agua utilizando un
contenedor estril ( mnimo
50 ml).

Conservar en refrigeracin a
4C
Muestras colectadas lo ms
aspticamente posible.

Siempre deben ser colectadas antes de

la administracin de cualquier agente
antimicrobiano
SIEMPRE CONSERVAR LAS
MUESTRAS EN
REFRIGERACION A 4C
FUNDAMENTOS DE LAS TECNICAS DE
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO EN
MEDICINA VETERINARIA
DEMOSTRACION

Tcnica barata y rpida. Se puede realizar

en el material biolgico o en las colonias
Determinar la forma, tamao y agrupacin
de las bacterias.

Ejemplos: Tincin de Gram*

Ziehl-Neelsen
Campo oscuro
 TINCION DE GRAM

GRAM NEGATIVAS GRAM POSITIVAS

TINCIONES ESPECIALES

TINCION DE
TINTA CHINA
PARA LA
DEMOSTRACION
DE CAPSULA
 AISLAMIENTO

Medios de cultivo: A.S,

MaC,V.B,CHOC.
Atmsfera de
Incubacin:O2, CO2, AN
O2
Temperatura de
incubacin:37C,42C
Tiempo de incubacin:
24 a 48 hrs, 48 a 72 hrs,
3 a 8 sem.
 IDENTIFICACION PRIMARIA

Tincion de Gram

Morfologa (bacilo,
coco, cocobacilo o
espiral)

Crecimiento o no en el
medio MacConkey

Catalasa y oxidasa
IDENTIFICACION SECUNDARIA
 OTRAS PRUEBAS

INMUNODIFUSION
AGLUTINACION EN PLACA
COAGLUTINACION
FIJACION DE
COMPLEMENTO
ELISA
INMUNOFLUORESCENCIA
BIOLOGA MOLECULAR
 PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS
ANTIMICROBIANOS
Se utilizan para tomar decisiones
teraputicas

Estudios epidemiolgicos sobre resistencia

Debe ser el complemento del aislamiento de

un agente bacteriano sobre todo cuando es
difcil predecir su sensibilidad.
 MTODO DE DILUCIN

Es un mtodo cuantitativo

Consiste en inocular un nmero conocido de

microorganismos en tubos o placas que
contienen un medio de cultivo con
concentraciones especficas de un
antimicrobiano

CMI: mnima concentracin del frmaco capaz de

inhibir el crecimiento bacteriano.
 MTODO DE
DIFUSIN

Es el mtodo ms utilizado y su interpretacin

es cualitativa.

Correlaciona la concentracin de un antibitico

con la distancia que la droga difunde desde un
disco de papel que contiene una cantidad
estndar de un antibiotico dado con la CMI.
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
DEL LABORATORIO DE
BACTERIOLOGA
 I NTRODUCCIN

AISLAMIENTO E
IDENTIFICACIN.

PRUEBAS DE
SENSIBILIDAD A
LOS
ANTIMICROBIANOS.
 INTERPRETACION DE
RESULTADOS: AISLAMIENTO E
IDENTIFICACIN.

Flora normal: Mezcla de

organismos.
Cuantificacin del
crecimiento: ligero,
moderado o intenso. Cultivo
puro.
Ausencia de patgenos
especficos: Salmonella,
Campylobacter.
Cultivos sin crecimiento.
REPORTE DEL LABORATORIO
MUESTRA: PULMN.

RESULTADO:

1.- Se aisl Pasteurella multocida.

2.- No hubo crecimiento bacteriano
Causas de fallo en el aislamiento de un
agente
Presencia de contaminantes en
la muestra
Muerte del agente durante el
transporte de las muestra al
laboratorio
Que el animal haya recibido
terapia antimicrobiana antes de
la toma de la muestra
RESPONSABILIDADES DEL MVZ

Seleccin de la muestra
Toma de la muestra
Conservacin y envo de la
muestra
Historia clnica completa
Diagnstico presuntivo
Interpretacin de resultados
INTERPRETACIN DE RESULTADOS:
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS
ANTIMCIROBIANOS

APOYO EN EL ESTABLECIMIENTO DE
UN PLAN TERAPUTICO.

RESISTENCIA ANTIMICROBIANA
 INTERPRETACION
NCCLS: National Comittee for Clinical
Laboratory Standards.

Puntos de corte para cada antimicrobiano con

base en cepas de referencia. Por ejemplo:

Gentamicina 10g
S= >15 mm, I =13-14mm, R=<12mm
 INTERPRETACIN

Sensible: se espera respuesta

al tratamiento con dicho
frmaco a la dosis
recomendada.

Resistente: la infeccin
causada por el microorganismo
no responder al antibitico en
cuestin, cualquiera que sea la
dosis y la localizacin de la
infeccin.
 Interpretacin.
Intermedio: cepas con
sensibilidad
disminuida.

Zona de transicin
entre cepas sensibles y
resistentes.

No se recomienda su
uso como alternativa
teraputica.
 INTERPRETACIN.
PREDICEN LA RESPUESTA
ESPERADA AL
TRATAMIENTO PERO NO
SON UNA GARANTA.
TOMAR LOS RESULTADOS
COMO UNA GUA.
CONSIDERAR LOS
ASPECTOS DE
FARMACODINAMIA Y
FARMACOCINTICA DE
CADA ANTIMICROBIANO
 RESULTADOS DE ANTIBIOGRAMA

ANTIBIOGRAMA DE Escherichia coli

GENTAMICINA 10g S
ENROFLOXACINA 5 g S
TETRACICLINA 30 g I
AMPICILINA 10 g R
 INTERPRETACIN

Resultados de susceptibilidad
antimicrobiana proveen una parte de la
informacin que se necesita para formular
terapias antimicrobianas.

La interpretacin y la aplicacin al caso

clnico es responsabilidad del MVZ.