INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

EQUIPO 2 LABORATORIO 3
EQUIPO LABORATORIO 4
Determinar el PTM y TTM de los microorganismos a probar en
diferentes soportes, con la finalidad de poder determinar el
mecanismo a utilizar para la eliminacin de contaminacin.
Observar y analizar la influencia que tienen las caractersticas de
cada soporte utilizado en la prctica en la determinacin del PTM y
TTM de los microorganismos
Establecer para que puede ser til esta determinacin.
 La temperatura es uno de los parmetro
ambientales mas importantes que
condicionan el crecimiento y la
supervivencia de los microorganismos.
Cada microorganismo muestra una
curva caracterstica de tasa de
crecimiento en funcin de la
temperatura, donde podemos distinguir
tres puntos caractersticos llamados
temperaturas cardinales.
Microorganismos psicrfilos: crecen a temperaturas desde -5C a
5C
1. Psicrfilas obligadas su temperatura de crecimiento optima va
de 15 a 18C
2. Psicrfilas extremas: 4C
3. Psicrfilas facultativas: 20C a 30C
Microorganismos mesfilos: presentan temperaturas optimas de
25C-40C y mximas entre 35C y 47C
Microorganismos Termfilos: son capaces de crecer por encima de
los 65C, presentan temperaturas optimas de 50C a 75C y mximas
de 80C a 113C
 La resistencia a la temperatura varia en cuanto a los diferentes
microorganismos.
La utilizacin de temperatura como bactericida y su eficacia
depende de dos factores:

Punto trmico mortal Tiempo trmico mortal

(PTM) (TTM)
 Es la temperatura mnima que mata a todas las bacterias en un
tiempo determinado (normalmente el tiempo de referencia
empleado es de 10 min).

Es el tiempo mnimo requerido para que mueran todas las bacterias

de una determinada suspensin a una determinada temperatura
 Agua destilada.
Propiedades:
Color: incolora.
Olor: inodora.
Sabor: inspida.
Textura: lquida.
pH (despus de calentar): 6
Es muy buen conductor de temperatura
El calor penetra mejor y se distribuye en forma ms uniforme en el
clula.
 Jugo de naranja.

Propiedades organolpticas:
Color: amarillo.
Olor: cido.
Sabor: dulce.
Textura: viscosa
pH (despus de calentar): 3
El efecto del calor es mayor si el pH es bajo (cido), adems
disminuye ms despus de calentar.
 Leche descremada.
Propiedades organolpticas:
Color: blanco azuloso.
Olor: sin olor.
Sabor: puede cambiar.
Textura: consistencia lquida, pegajosa y ligeramente viscosa.
pH (despus de calentar): 7
Los lpidos y carbohidratos pueden ser utilizados para la sntesis de
componentes estructurales.
Tiene mayor nmero de macromolculas, lo que obstaculiza el paso de la
temperatura.
 Sacarosa.
Propiedades organolpticas:
Color: amarillo.
Olor: sin olor.
Sabor: dulce.
Textura: consistencia lquida, pegajosa y ligeramente viscosa.
pH (despus de calentar): 5
La elevada concentracin puede tener un efecto protector frente al
calor, ya que las viscosidad obstaculiza el paso de la temperatura.
Presin osmtica.
Escherichia coli. Bacillus subtilis.
Gram negativo Gram positiva
Bacilo corto Bacilos largos
Aislado En cadenas
No forma esporas Forma esporas
Aadir 1ml de
cultivo E. coli o B.
subtilis a cada uno
de los soportes Jugo de naranja Sacarosa Agua Leche
 50C 60C 70C 80C 92C Bao de agua

Testigo
durante 10
minutos
Soporte

50C 60C
1ml

Testigo
70C

80
92C
C
 5 10 15 20 30

Testigo
Bao de agua a 70C

Soporte

1ml
5 10

Testigo
15

30 20
Bacillus subtilis Eq. 1 Bacillus subtilis Eq. 4
Bacillus subtilis Eq. 7 Bacillus subtilis Eq. 5

Escherichia coli Eq. 2 Escherichia coli Eq.3

Escherichia coli Eq. 1 Escherichia coli Eq3. Escherichia coli Eq. 4

Bacillus subtilis Eq. 2 Bacillus subtilis Eq. 5 Bacillus subtilis Eq. 7 Bacillus subtilis Eq. 8
 Temperatura aplicada durante 10 minutos (laboratorio 4)
Cepa soporte Testigo 50C 60C 70C 80C 90C PTM
Agua + + + - - - 70C
Jugo de 70C
+ - + - - -
naranja
Escherichia
coli Leche 70C
+ + + - - -

70C
Sacarosa + + + - - -

70C
Agua + + + - - -

Jugo de 70C
+ + + - - -
Bacillus naranja
subtilis
Leche + + + + + - 90C

Sacarosa + + + + - - 80C
 Temperatura aplicada: 70C

cepa soporte Testigo 5 10 15 20 30 TTM

Agua + - - - - - 5
jugo de
Escherichia + + - - - - 10
naranja
coli
Leche + - - - - - 5

Sacarosa + - - - - - 5

Agua + + + + + + >30
Jugo de
Bacillus + + + + + - 30
naranja
subtilis
Leche + + + + + + >30

Sacarosa + + + + + + >30
 Temperatura aplicada durante 10 minutos (laboratorio 3)
Cepas Soporte testigo 50C 60C 70C 80C 92C PTM
Agua + + + - - - 70C
Jugo de
Escherichia + + + - - - 70C
naranja
coli
Leche + + + - - - 70C
Sacarosa + + + - - - 70C
Agua + + + + + - 92C
Jugo de
Bacillus + + + - - - 70C
naranja
subtilis
Leche + + + + - - 80C
Sacarosa + + + + - - 80C
 Temperatura aplicada 70C a diferentes tiempos (laboratorio 3)
cepa Soporte Testigo 5 10 15 20 30 TTM

Agua + - - - - - 5

Jugo de
+ - - - - - 5
Escherichia naranja
coli
Leche + - - - - - 5

Sacarosa + - - - - - 5

Agua
? ? ? ? ? ? ?

Jugo de
+ - - + - - 20
Bacillus naranja
Subtilis
Leche + + + + + + >20

Sacarosa + + + + + + >20
 De acuerdo a los resultados obtenidos, los soportes que presentaron
una mayor proteccin frente a las temperaturas y tiempos de
exposicin, fueron: leche descremada y sacarosa al 50%.
Leche descremada: al contener carbohidratos y protenas, pudieron
haber sido utilizadas para la sntesis de componentes estructurales;
adems de no tener una buena distribucin del calor, debido a las
macromolculas que contiene.
Sacarosa: a pesar de ser un medio hipertnico, la viscosidad del
soporte obstaculiza el paso del calor, evitando una mejor
distribucin en el microorganismo.
 Los soportes que presentaron una menor proteccin fueron el agua
destilada y el jugo de naranja.
Agua destilada: al ser un buen conductor de la temperatura, ocasiona
un mayor poder de penetracin y distribucin del calor en los
microorganismos, provocando su muerte.
Jugo de naranja: la acidez que presenta el jugo de naranja disminuye
la capacidad para mantener muchos microrganismos vivos en el
soporte adems, despus de calentar disminuye el pH por lo que
elimina a ms microrganismos.

Adems de las caractersticas de cada soporte, un factor importante

es el cambio de pH antes y despus del calentamiento, sin embargo
no se realiz su determinacin antes del proceso.
 En cada soporte diferente se puede observar como las propiedades
de estos influyen en la proteccin del microorganismo o como estas
pueden favorecer la muerte del microrganismo, adems de tomar en
cuenta las caractersticas de cada microrganismo.

Esta tcnica puede ser utilizada en procesos donde se necesite

disminuir la carga microbiana de los alimentos, sin afectar las
propiedades organolpticas de estos y sin daarlos; como por
ejemplo en la pasteurizacin. As mismo esta tcnica puede ser
utilizada en la esterilizacin de instrumental tanto quirrgico como
de laboratorio.
1. De acuerdo con sus resultados, Cul soporte ofrece mejor
proteccin al microorganismo de prueba?
En este caso se pudo observar que la leche y la sacarosa son los mejores
protectores a los microorganismos.
2. A que se le puede atribuir tal proteccin?
En la leche se le puede atribuir a que los carbohidratos y las protenas
que contiene, pueden ser utilizadas para la sntesis de componentes
estructurales.

En la sacarosa, la viscosidad que presenta, obstaculiza el paso de la

temperatura.
3. De que otros factores depender la determinacin del TTM y PTM?
Tamao de poblacin, tipo de microorganismo, pH, estado fisiolgico del
microorganismo.
 https://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/13agfisicos.htm#_Toc59451619
Enrique Iaez Pareja. 2006. curso de microbiologa general. Departamento de
microbiologa, facultad de ciencias. Universidad de granada. Espaa
Jawetz, E.,J. Melnicj y E. Adelberg. 2001. microbiologa medica. 17ava edicin.
Editorial manual moderno, S.A., Mxico D.F.