UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

ESCUELA DE POSTGRADO

SECCIÓN DE POSTGRADO DE LA FACULTAD DE

INGENIERIA ELECTRICA Y ELECTRONICA

MAESTRIA EN INGENIERIA BIOMEDICA

TESIS

“ESPECTROFOTOMETRO PARA ANALISIS CLINICOS ”

MAESTRISTA :LEOPOLDO FRANCISCO GUILLEN SARAVIA

CALLAO-PERÚ

AGOSTO, 2014
 ESPCTROFOTOMETRO
PARA ANALISIS CLINICOS
 Fundamento Físico
• El presente sistema en sí, está fundamentado
en los principios físicos de absorción
electromagnética selectiva de las sustancias a
una determinada longitud de onda de luz, lo
que nos lleva a tratar el tema de la
espectrofotometría, descrita por la ley de
Lambert-Beer
 La intensidad de luz absorbida por una muestra cuando se hace
incidir sobre esta un haz de luz de una determinada longitud
de onda depende de la densidad de la sustancia que este haz
encuentra en su paso.

TRES FENÓMENOS SON RESPONSABLES DE LA ATENUACIÓN DE LA

INTENSIDAD DE LA LUZ SALIENTE QUE ATRAVIESA UN MEDIO
ABSORBENTE:

• La concentración del medio que esta siendo atravesado.

• La distancia que la luz tiene que «viajar» a través de dicho medio
(trayecto óptico)
• Probabilidad de que el fotón de cierta longitud de onda sea
absorbido por el material (coeficiente de absorción o de extinción
molar del material).
 Ley de Lambert-Beer
• Trata de la medición de la absorción de la
intensidad luminosa, de las distintas
frecuencias del espectro electromagnético,
cuando un haz se hace incidir en un tubo de
prueba conteniendo una muestra problema,
teniendo en cuenta que numerosas
determinaciones analíticas, terminan en el
laboratorio con la medición de energía
radiante absorbida por una solución.
 Veamos:
Io=Intensidad del haz de luz incidente al medio
I=Intensidad del has de luz saliente del medio.
Є=Absortividad molar o coeficiente de absorción molar, o tambien
coeficiente de extinción (M-1 cm-1). Es la característica de una
sustancia que nos dice cuánta luz absorbe a una longitud de onda
determinada.

L=longitud del la sustancia atravesada

C= Concentración de la sustancia atravesada por el haz

I = Io10−ЄLC
I
𝓣= = 10−ЄLC Transmitancia
Io
I
log = −ЄLC=A
Io
A=Absorbancia
• Luego
A = -log T
A = log ( I / Io ) = (ε×L)×c
• ABSORBANCIA = (ε × L) × c
 Io I Io I

L Є

𝑰 𝐈𝐬
𝐓= 𝐓=
𝑰𝒐 𝑰𝒐
TRANSMITANCIA
𝑰
𝑰
𝓣 = 𝑰𝒐 Entonces: 𝓣=
𝐈𝐬 𝑰𝐬
𝑰𝒐
PERDIDADAS POR REFLEXION
Tipos de equipos que utilizan luz para
adquisición de datos de muestras
 Elementos y partes Principales del
Espectrofotómetro
• SISTEMA OPTICO
• SISTEMA ELECTRONICO (Hardware)
• SOFTWARE.
FUNDAMENTO FISICO DE
INCORPORACION DE
IDENTIFICACION DE
SUSTANCIAS
Espectro Electromagnetico
ESPECTRO DE LA LUZ VISIBLE
 0.80
Etinilestradiol (26 mg/L)

Absorbancia
0.60 Gestodeno (5.4 mg/L)
Levonorgestrel (7.2 mg/L)
0.40

0.20

0.00
220.0 240.0 260.0 280.0 300.0
Longitud de onda (nm) CH3
OH
CH3 C CH OH
CH2 C CH

CH3
OH
CH2 C CH
HO
O
ETINILESTRADIOL (ETE) LEVONORGESTREL (LEV)

O
GESTODENO (GTD)
NaSO3 N=N COONa

HO

SO3Na

Tartracina (E-102)

OH

NaSO3 N=N

SO3Na

A. Anaranjado (E-110)
• Si la luz blanca pasa a través de una
muestra de hidrógeno, átomos de
hidrógeno absorben energía que un
electrón es excitado a mayores niveles
de energía (órbitas con n ≥ 2). Si la luz
que emerge se pasa a través de un
prisma, se forma un espectro continuo
con negro líneas (correspondientes a
ninguna luz que pasa a través de la
muestra) a 656, 468, 434, y 410
nm. Estas longitudes de onda
corresponden a lan = 2 a n = 3, n = 2
a n = 4, n = 2 a n = 5, y n = 2 a n = 6
transiciones. Por tanto, cualquier
elemento dado tiene tanto un espectro
de emisión característico y un espectro
de absorción característico, que son
esencialmente imágenes
complementarias.
Espectros de emisión y de absorción forman la
base de la espectroscopía , que utiliza los
espectros para proporcionar información sobre la
estructura y la composición de una sustancia o un
objeto. En particular, los astrónomos utilizan
espectros de emisión y absorción para
determinar la composición de las estrellas y la
materia interestelar. Como ejemplo, considere el
espectro de la luz solar se muestra en la Figura
6.14 "El espectro visible de la luz del sol" . Debido
a que el sol es muy caliente, la luz que emite es
en la forma de un espectro de emisión
continuo. Superpuesta sobre el mismo, sin
embargo, es una serie de líneas oscuras debido
principalmente a la absorción de frecuencias
específicas de luz por átomos más frías en la
atmósfera exterior del sol. Al comparar estas
líneas con los espectros de los elementos
medidos en la Tierra, ahora sabemos que el sol
contiene grandes cantidades de hidrógeno, el
hierro y carbono, junto con pequeñas cantidades
de otros elementos. Durante el eclipse solar de
1868, el astrónomo francés Pierre Janssen (1824-
1907) observó un conjunto de líneas que no
coinciden con las de ningún elemento
conocido. Sugirió que se deben a la presencia de
un nudel griego helios , que significa "sol". Helio
fue finalmente descubierto en minerales de
uranio en la Tierra en 1895.
evo elemento, al que llamó helio ,
Sistema óptico del analizador químico
 Bandeja de Tubos
de prueba
Foto
Detector i/v ADC

Fuente de Luz
Monocromática
Control de
Exposición y CPU mon
Giro itor

consola Printer

DIAGRAMA DE BLOQUES SIMPLIFICADO DE

ESPECTROFOTOMETRO
La fuente de luz
Patrón de la Fuente de Luz
Diagrama que muestra cómo al
manipular la nanoestructura de los
cristales fotónicos de tungsteno se
modifica el espectro de la luz que
emiten
 ESTRUCTURA OPCIONAL DE
PLATAFORMA GIRATORIADE LA
BANDEJA DE TUBOS
SISTEMA DE GIRO PARA ESCANEO DE
LA LONGITUD DE ONDA ADECUADA
PRESENTACIÓN DELA
INFORMACION
PRESNTACACION DE LA MEDICION