Pemeriksaan Skrining

Hepatitis B Virus (HBV)

dan
Anti-HCV (HCV)
pada Ibu hamil di Puskesmas
menggunakan
RDT (Rapid Diagnostic Test)

Dr.Sondang Maryutka Sirait SpPK

 Deteksi antigen HBV (HBsAg) dan Antibodi (Anti-HCV)
dengan metode :

 EIA ( Enzyme Immunosorbent Assay).

Pemeriksaan berdasarkan Enzyme Immunosorbant
Assay untuk mendeteksi Antigen HBV spesifik dan
antibodi. Pemerksaan awal dan bila positif harus
dikonfirmasi.

 RPHA (Reverse Passive Hemagglutination Assay).

Pemeriksaan ini dapat mendeteksi HbsAg melalui
reaksi aglutinasi dengan anti-HBs. Sensitifiti adalah
25ng/ml dan spesifisity (95-98)%. Tetapi false
positifnya (10-20)%.

 PHA ( Passive Hemagglutination Assay).

Digunakan untuk mendeteksi anti-HBs melalui reaksi
aglutinasi dari HbaAg dan HDP (high density particle).
Sensitifity adalah 80 mIU/ml dan spesifisity adalah (80-
90)%. False positifnya adalah (10 – 20)%.
www.standardia.com
 RIA (Radio Immuno Assay).
Dapat mengidentifikasi HbsAg atau anti-HBs
antibodi dengan reaksi antara radioisotop
menggantikan enzym.

 CLIA ( Chemoluminescence Immunoassay).

Menggunakan bahan kimia yang berluminesens
dan konsentrasi dibaca dengan alat CLIA analiser.

 ICA (Immunochromatography Assay )= Rapid test.

Dibuat untuk deteksi kualitatif dari antigen HBV
(HBsAg) atau antibodinya menggunakan konjugasi
emas.
Waktu pemeriksaan hanya (5 – 20)menit.

www.standardia.com
1. Akurat.
sensitivity dan specificity yang tinggi.
berkorelasi baik dengan ELISA, PHA, RIA dan CLIA

2. Hasil yang cepat diperoleh

dapat dibaca dalam waktu 20 menit.

3. Sederhana dan gampang digunakan dimana saja.

hanya selangkah saja mengerjakannya sesudah
pengumpulan sample. Tidak memerlukan peralatan
yang rumit di tempat pemeriksaan.

4. Biaya lebih irit.

biaya yang lebih murah dan waktu pemeriksaan yang lebih
cepat.
www.standardia.com
 Koloid emas

Antigen
 Prinsip :
Sample Conjugate Patient Control
pad pad Window Window
Patient   Control
Serum Selenium colloid Recombinant
HBsAg antigen conjugate antibodi &
synthetic
peptides

 Serum pasien dengan HBsAg berikatan dengan Selenium colloid an

tigen conjugate dan kemudian berikatan juga dengan antibodi yang t
erdapat di jendela pasien sehingga terbentuk garis merah pada jende
la pasien

 Jika serum tidak mengandung HBsAg , Selenium colloid antigen conj

ugate mengalir melewati jendela pasien sehingga tidak terbentuk garis m
erah pada jendela pasien

 Pada jendela kontrol: selalu terbentuk garis merah

 Darah vena diambil dengan tehnik
phlebotomi oleh tenaga terlatih.
 Darah vena didiamkan selama 20 menit
kemudian pemisahan serum dilakukan
dengan sentrifugasi 5 menit, kecepatan
sentrifus 3000 rpm.
 Serum tidak boleh hemolisa.
 Pisahkan serum menggunakan pipet Pasteur
atau mikropipet ke dalam tabung serum.

www.standardia.com
 Prinsip :
 Melakukan penusukkan pada bagian ujung
jari secara aseptis untuk mendapatkan
sempel darah perifer.

 Alat – alat / bahan :
 Lancet steril.
 Kapas alkohol.
 Tabung penampung ukuran mikro.
 Kapas kering.
 Mikropore.
.
www.standardia.com

1. Dibersihkan dengan kapas alkohol 70 % bagian
yang akan ditusuk,biarkan kering dengan
sendirinya.
2. Bagian jari yang akan ditusuk dipegang agar tidak
bergerak dan jangan diremas.
3. Tusuk dengan cepat memakai lancet steril dengan
posisi lancet tegak lurus.
4. Tetes darah pertama dilap dengan kertas kering,
tetes berikutnya diperlukan sebagai sempel sesuai
keperluan pemeriksaan.
5. Setelah selesai diambil darahnya, bekas luka
ditutup dengan kapas kering dan diplester dengan
mikropore.

www.standardia.com
 Prosedur pemeriksaan disesuaikan dengan
keterangan pada Kit Insert.

www.standardia.com
Step 1 Step 2

Step 3
Result

10sec.

www.standardia.com
 Positive

20 mins.
Negative

www.standardia.com
 Kondisi penyimpanan reagensia yang tidak normal atau tidak sesuai
dengan yang dianjurkan pada kit insert.

 Konsentrasi rendah dari HBV antigens

- Rapid : 1~5 ng/ml
(SD BIOLINE HBsAg Rapid – 2 ng/ml )
- jadi, bila pemeriksaan HBsAg rapid test dengan konsentrasi sangat rendah
antara 0.1~1ng/ml, maka hasil false negatif bisa terjadi.

 Walaupun garis hasil yang sangat halus warnanya dapat

diinterpretasikan sebagai hasil (+).

www.standardia.com
PEMERIKSAAN SKRINING HCV
(ANTI-HCV)

www.standardia.com
 Koloid emas

Antibodi
 Prinsip :
Sample Conjugate Patient Control
pad pad Window Window
Patient   Control
Serum Anti Selenium colloid Recombinant
HCV antigen conjugate antigen &
synthetic
peptides

 Serum Anti HCV berikatan dengan Selenium colloid antigen conjugat

e dan kemudian berikatan juga dengan antigen yang terdapat di jend
ela pasien sehingga terbentuk garis merah pada jendela pasien

 Jika serum tidak mengandung Anti HCV, Selenium colloid antigen con
jugate mengalir melewati jendela pasien sehingga tidak terbentuk garis
merah pada jendela pasien

 Pada jendela kontrol: selalu terbentuk garis merah

1. Add 10㎕ of serum, plasma 2. Add 3 drops of assay diluent
to the sample well (s). Into the sample well (s).
POS NEG

( +++ ) ( ++ ) (+) weak(+) trace (-) Invalid

Apa yang menyebabkan hasil positif palsu?

Penyimpanan yang tida dalam kodisik benar.

Bila kit tidak disimpan dalam temperatur yang

dianjurkanatau pembungkus aluminium rusak dan terpapar
dengan kelembaban yang tinggi, hasil false positif bisa
terjadi. Kit harus disimpan pada suhu 1~30℃ dan
penutupnya harus baik.
Apa yang meyebabkan hasil negatif palsu?

Konsentrasi yang rendah dari anti-HCV antibody

Penderita pada awal infeksi mungkin belum menghasilkan
konsentrasi antibodi yang tinggi.sehingga tidak dapat
dideteksi.juga sebagai tambahan ada penderita yang
kekurangan respon imun sehingga titernya rendah daan
tidak dapat terdeteksi, sehingga memberikan hasil. Sebagai
tambahan, beberapa penderita ada yang mempunyai
kelemahan respon imun dan bisa menyebabkan hasil yang
false negartif.
Walaupun dengan hasil garis test yang sangat lemah bisa
dikatakan hasil negatif.
Bila spesimen memberikan titer mendekati nilai cut-off dan
titer antibodi anti-HCV mendekati batas deteksi bisa dibaca
sebagai ‘positif lemah”.
 APD (Alat Pelindung Diri) : sarung tangan, jas
lab.
 Desinfektan.
 Wadah limbah infeksius.
 Timer.
 Mikropipet dan tip.
 Spidol.
 Formulir hasil pemeriksaan.

www.standardia.com
 Gunakan kit RDT HBsAg dan anti-HCV yang
belum kadaluarsa.
 Simpan kit reagen ditempat yang sesuai dengan
anjuran di kit insert dan jauhkan kit reagen dari
cahaya matahari .
 Teteskan volume serum sesuai prosedur dalam
kit insert.
 Baca hasil sesuai dengan batas waktu yang
ditetapkan dalam kit insert.
 Jangan gunakan serum yang hemolisa  positif
palsu.
 Gunakan 1 tip atau 1pipet Pasteur untuk satu
sample. www.standardia.com
 Ibu hamil (semua umur kehamilan) yang datang ke
puskesmas .
 Petugas laboratorium mengambil darah vena 6mL
dengan tehnik phlebotomi.
 Diamkan tabung darah selama (20-30) menit sebelum
disentrifugasi.
 Lakukan pemisahan serum dengan sentrifugasi
selama 5 menit dengan kecepatan 3000 rpm.
 Pindahkan serum (± 3mL) ke tabung serum
menggunakan mikropipet atau pipet Pasteur.
 Beri label no tabung serum yang sama dengan tabung
darah.
 Lakukan pemeriksaan skrining HBV dengan
menggunakan rapid HBsAg dan anti-HCV.
www.standardia.com
 Catat semua data sample yang sudah dilakukan
skrining awal HBV dan HCV di formulir
pencatatan atau buku yang sudah disediakan
dengan nomor kode pasien sesuai dengan
propinsi-puskesmas- klinik KIA yang ditunjuk
mengikuti program ini.
 Laporkan hasil pemeriksaan yang reaktif ke
Dinkes Propinsi secara periodik supaya
pasien/bumil tersebut dirujuk ke RS Rujukan
Propinsi atau RSUD yang ditunjuk.

www.standardia.com
• Sample yang hasil pemeriksaan HBsAg dan/atau
Anti-HCV tidak dirujuk lagi ke BBLK/Labkesda
untuk pemeriksaan Konfirmasi seperti program
tahun lalu.
• Sisa sample bisa segera dimusnahkan sesuai
prosedur pemusnahan limbah atau bilamana
diperlukan dipakai untuk pemeriksaan lainnya.
Terima kasih