DETERMINACION DE

METABOLISMOS SECUDARIOS A
PARTIR DE B ACILLUS SUBTILIS CON
EFECTO BIOCONTROLADOR SOBRE
FUSARIUM SP.
 RESUMEN

• El uso de agentes de control biológico es una alternativa eficaz para

el crecimiento de las enfermedades en plantas, contribuyendo en la
disminución del uso de pesticidas químicos.

• Microorganismos del genero Bacillus se han convertido en el centro

de interés por su prodducion de metabolitos de tipo secundario con
propiedades antifúngicas.
 INTRODUCCIÓN

Bacillus subtilis es un agente de biocontrol que produce lipopeptidos, metabolitos primario o

secundarios, con espectro antibiótico. Los compuestos producidos por Bacillus sp son:
• Surfactina.
• Fengicida.
• Inturina A,B y C.
El gen que codifica la producción de la surfactina es el srfA, que contiene cuatro marcos de
lectura abiertos (ORFs),srfA-B/,srfA-C y srfA-Te.
La familia Iturina comprende de la bacilomicina, iturina y micosubtilina los cuales son
lipoheptapepidos cíclicos unidos por un residuo β-amino acido.
La fengicina es un antifúngico que inhibe hogos filamentosos pero es inefectivo contra levaduras
y bacterias.
 MATERIALES Y MÉTODO

• Cepa bacteriana. Cepa UCMC TB2 correspondiente a

B.subtilis, suministrada por la colección de Microorganismos de
la Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca. Conservada a -
70°C optenida de la rizosfera de Ornithogalum umbellatum
(estrella de Belén).
 Aislamiento en agar
sangre.

Caldo infusión cerebro

Caracterización fenotípica de
corazón.
24h 37°C la cepa. Coloración de Gram
 PREPARACIÓN DE
MEDIOS DE CULTIVO

• Para el precultivo del microorganismo se

utilizo el medio modificado de Luria-Bertani.
• Para el proceso de fermentación se utilizo el
medio modificado 3s.
 FERMENTACIÓN LIQUIDA

1 2
Un stock de B.subtilis fue inoculado en Posteriormente 1ml del precultivo fue
100ml de medio LB e inoculado inoculado en 100ml del medio 3s,
durante 18 horas a 37°C y 180 rpm. dejándolo en agitación contante
durante 24 horas, a 37°C y 150 rpm.
 EXTRACCIÓN DE METABOLITOS

1 2 3 4
Se adicionaron 45 La mezcla se dejo El extracto de Se recolecto el
ml de metanol al en agitación etanol fue filtrado para el
producto obtenido constante durante centrifugado a proceso de
de la fermentación una hora a 150 5000 rpm durante identificación por
en shaker. rpm. 10 min a 4°C. cromatografía.
 IDENTIFIC ACIÓN DE METABOLITOS
SECUNDARIOS POR CROMATOGRAFÍA EN
FASE REVERSA.