Control de mo.

F. Físicos y Químicos
 Esterilización (Físicos o Químicos)
 Métodos Químicos: Desinfección (Sanitización),
Antisepsia.

 F. Físicos/Químicos: Disminución Aw, P. osmótica,

Temperatura, pasteurización, pH
 Quimioterapéuticos
 Esterilización

 Métodos Esterilización
 Físicos.

 Calor (húmedo y seco)

 Filtración
 Radiaciones (ionizantes y no ionizantes)
 Químicos: Óxido Etileno
 Esterilización
 Proceso, que mata o elimina (remueve) toda
forma de vida. Físicos:
Calor (húmedo y seco)
Filtración
Radiaciones (ionizantes y no ionizantes)
 Calor

 Por arriba temp. Máxima:

Efecto Letal, exponencial.
 Temp. más elevada,
muerte más rápida.
 Ajuste de tiempo y
temperatura.
 Naturaleza calor:
 húmedo, mayor poder
penetración, calor seco.
 ESPORAS, Esterilización por calor:
 Procedimientos, Condiciones, maten espora.
 Endosporas,
 estructuras más resistentes al calor, Ag Q; rad
 Resistencia al calor: Cantidad
cubierta corteza
y estado del agua. cubiertainterna exospori
s um
 Cubiertas
externa
– Deshidratado:
 10-30% agua/C.veg (Consistencia
gelatinosa): core
– Temo-Resistencia o
prot
olast
o
pared
celular membran
Bacillus cereus a
plasmáti
ca
 C. HÚMEDO
Autoclave

 Equipo hermético: vapor de agua a presión.

 Presión: 1.1kg/cm2= 15 lb/pulg2:
 121 C
 Tiempo: 15 min
 Objetos voluminosos, o grandes volúmenes: tiempos más largos.
 Muerte mo:
 No por presión,
 Elevada temperatura: vapor de agua a presión: 121 C
 Muerte endosporas: Calentar Temp > pto eb agua (121C).
 Resistencia al calor endosporas:
 Resisten ebullición por 6 horas.
 Resisten 120ºC durante 15 min
 ( Esterilización ).

Eliminar Aire
 Esterilización por calor húmedo
Temperatura
[°C]
Presión
[atm] Descarga
Descarga de Descarga de Sin descarga
completa del
2/3 del aire 1/2 del aire del aire
aire

1/3 109 100 90 72

2/3 115 109 100 90

1 121 115 109 100

4/3 126 121 115 109

5/3 130 126 121 115

2 133 130 126 121

Influencia de la descarga incompleta de aire en la temperatura del autoclave

 Autoclave. Aplicaciones
 El autoclave
 Equipos de área aséptica, quirofanos
(ropa)
 Esterilizar M. cultivos y soluciones no
termolábiles:
 Material vidrio, protegido filtros algodón: pipetas, matraces,
tubos, cajas Petri vidrio.
 Mangueras silicón, conexiones.
 (Envueltos papel, bolsas, estraza, grado médico)
 Material contaminado: cajas petri, pipetas vidrio, plástico etc
 No formen emulsiones con el agua (aceites)
 No se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100°C.
 No polvos (talco)
 No termo sensibles.
 Suelos, …
Filtro de algodón
 1854 Schröeder y von Dusch.
 Origen, uso del algodón como filtro.
 Evitar contaminación de medios cultivo (Schwann)
 Calor Húmedo

 Desnaturalización/coagulación pt:
2 razones:
 Estructuras biológicas: DNA/RNA/pt:
Sintetizadas por reacciones que eliminan agua.
 Reacciones inversas (introducir agua: Vapor

agua a presión, desnaturalización mol

biológicas)
 Estructuras secundarias y terciarias
 Puente de hidrógeno intramoleculares

 Rotos/agua altas temperaturas.

 Calor Húmedo

 Coeficiente de transferencia de calor más

elevado, eficiente,.
 Mat. húmedos, conducen calor, más
rápidamente, que materiales secos.
 Calor húmedo
 Ventajas
 Rápido (calentamiento y penetración )
 Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo
 No deja residuos tóxicos
 Hay un bajo deterioro del material expuesto
 Económico

 Desventajas
 No soluciones, emulsiones con el agua: aceite
 No talcos, polvos..
 Corrosivo, ciertos instrumentos metálicos
 No apropiado para substancias termolábiles
 Calor seco

 El Horno, artefacto, esterilizar por calor

seco.
 Calor genera resistencias, corriente eléctrica.
 Transferencia de calor menos, eficiente, vapor agua-aire, seco.
 Mayor temperatura/tiempo de exposición que el autoclave.
 Temperatura varía entre 140° y 180° C.
 140° C / 5 horas de exposición,

 160° C/2 horas de exposición.

Calor seco
 Aplicaciones:
 Horno Pasteur:
 Esterilizar material vidrio vacío, en el laboratorio:
 Vidrio (C Petri, pipetas; Garrafones 20 L,

frascos etc): p aluminio, Recipientes-cilindros metálicos.

 Metales (Material quirúrgico), no corrosivo,

 Aceites, parafinas...

 Sustancias viscosas no volátiles.

 Polvos, talco, parafinas.

 Inyectables: Eliminar pirógenos material vidrio

(Hornear)

 No, medios de cultivo, mangueras, ropa.

 PIRÓGENOS
 Un pirógeno es cualquier agente productor de fiebre
: hipotálamo
 Microbiano, como LPS bacterias (Endotoxina),
 o no microbiano
 moléculas de alto peso molecular y de
naturaleza polimérica,
 como los lipopolisacáridos.
 Los pirógenos mas potentes: Gram-negativas.
 Productos estériles
PIRÓGENOS

 asépticas, con materiales estériles y/o a-

Se fabrican en áreas

pirogénicos (agua estéril, libre de pirógenos: AFI)

 Para la eliminación de pirógenos del material de vidrio debe

someterse a 250º C durante 2-3 h por calor seco.

 Para eliminar los pirógenos en agua, se puede emplear la

ultrafiltración
 Calor Seco

 Calor seco, desecación de la célula.

 Oxidación comp celulales, fusión de
membranas. (CO2, H20, cenizas)
 Efectos tóxicos: concentración, niveles elevados
de electrolitos.
 Puente de hidrógeno, más difíciles de romper por
el calor seco.
 aire es mal conductor del calor.
 Calor seco

 Ventajas
 No corrosivo, metales e instrumentos Q.
 Esterilización de:
 Sustancias en polvo .
 Sustancias viscosas no volátiles.

 Desventajas
 Requiere mayor tiempo de esterilización, respecto al calor
húmedo.
 No, material orgánico: medios de cultivo
INDICADORES QUÍMICOS.
Calor Húmedo

Este proceso se lleva a cabo a una temperatura

de 121ºC con una presión de 15 lb/pulg2 con un
tiempo mínimo de 15 minutos que puede variar
dependiendo de la carga que se va a esterilizar
INDICADORES BIOLÓGICOS
 Geobacillus stearothermophilus ha demostrado ser muy resistente a ciclos de
vapor , a 121ºC y a ciertos vapores químicos: Calor Húmedo.

 Bacillus subtilis ha demostrado ser el más resistente a ciclos por calor seco
Calor

Existen otras formas de eliminar microorganismos por calor

seco:
 Flameado a la llama: asa de siembra, lancetas, agujas disección-

 Incineración,
 materiales, desecho contaminado; Cadáveres animales exp..

Calor, más común ,eficaz, esterilización líquidos.

, LIQUIDOS SENSIBLES AL CALOR, GASES?????.

 Filtración.
 Esterilización, sustancias termolábiles, líquidos/gases (aire)
sensibles calor.
 Membranas con poros de tamaño determinado.
 Bacterias, 0.3 a 10 micras (1-3 u).

 Filtros Absolutos 0.22u, los laboratorios,

 no retienen virus: 20 nm: 0.020 micras.
Proceso, que mata o se elimina (remueve)
toda forma de vida.
 Esterilización
 Proceso, que mata o elimina (remueve) toda
forma de vida. Físicos:
Calor (húmedo y seco)
Filtración
Radiaciones (ionizantes y no ionizantes)
 Existen tres tipos básicos de filtros:

 Filtros profundos o Filtros de profundidad:

 Filtro de Membrana o Membranas filtrantes.
 Filtro Nucleopore o Filtros de huella de
nucleación (Nucleoporo):
 Existen tres tipos básicos de filtros:

 Filtros profundos o Filtros de profundidad:

 papel, asbesto o fibras de vidrio.
 Retención partículas, paso tortuoso, profundidad estructura.
 Retención mecánica
 Pre-filtros, evitar tapar filtros proceso
 Filtro Nucleopore:
 Fabricación:
 Películas finas policarbonato, 10 µ.
 Radiac nuclear: daños localizados
 Trat químico: agranda poros.

 Orificios muy uniformes, casi verticales

 partícula ret. En superficie

 Usos Microscopia electrónica de Barrido.

 Filtro de Membranas, esterilizantes :
 Acetato o nitrato de celulosa.
 Fabricado, contener gran número diminutos agujeros. 0.22 u
 Retención, superficie filtro: tamaño.
 80-85% espacios: Flujo elevado.
 COMO SE REALIZA PROCESO
FILTRACIÓN:

 Esterilización líquidos.
 Membranas filtrantes.
 AcetatoNitrato celulosa 0.22 u
 Pequeños volúmenes:
 Filtros desechables
 Jeringa
Vol intermedios

Bomba peristaltica
 • Grandes volúmenes:
Filtro de membrana en cartucho;
Ensamble Armazón de acero inoxidable. Industría farmaceútica
a) Membranas , plegadas.
Filtros de membrana en equipos de filtración de cartucho
 Filtración
Industria Farmacéutica, Biológicos:
 La filtración se utiliza para
 Soluciones termolábiles: I. Esterilizar aire
 Soluciones de antibióticos y vitaminas.
II. AFI, Libre pirógenos
UltraFiltración (LPS)
 Hormonas
 Sueros
 Soluciones oftálmicas,
 Soluciones intravenosas,
 Medios para cultivos celulares, virus
 Productos estériles
PIRÓGENOS

 asépticas, con materiales estériles y/o a-

Se fabrican en áreas

pirogénicos (agua estéril, libre de pirógenos: AFI)

 Para la eliminación de pirógenos del material de vidrio debe

someterse a 250º C durante 2-3 h por calor seco.

 Para eliminar los pirógenos en agua, se puede emplear la

ultrafiltración
 Radiaciones
Electromagnéticas

 Su acción depende de:

 Tipo de radiación:

 Ionizantes, No ionizantes
 Efectos de las radiaciones ionizantes
 Rayos X, Rayos Gamma:

 Colisonan bio-moléculas mo, producción desprendimiento

de iones, otras especies moleculares, e-; OH-;
 Tóxicos, Daño Estruct, polímeros biológicos DNA, RNA, Pt, etc:
 Muerte célula.
 Aplicaciones de las radiaciones
ionizantes
 Fuentes de Radiación: .

 Uso comercial, Nucleídos:

 Radioisótopos, fisión nuclear: Co60 y Cs137: R Gamma

 Tubos rayos catódicos: Rayos X

.
 Fuentes de Radiación:

06/04/2018 43 43
 Aplicaciones de las radiaciones ionizantes
 FDA: Material uso médico, I. Alimentos:

 Irradiación de especias, alimentos envasados (en algunos países).

 Material quirúrgico
 guantes cirujano, jeringas, pipetas plástico desechables.

 Suturas, catéteres, prótesis, etc).

 agujas, bisturíes,

 Hueso, cartílago, piel: injertos

 Gran penetrabilidad:
 Escala industrial, Bajos costos.
 Inhibir crecimiento mo,
medios sólidos y
líquidos
 Radiaciones NO Ionizantes.
Ultravioleta

 Molécula Blanco en mo, DNA

 Dímeros de pirimidinas (Timina) adyacentes
 Dímeros, distorsión DNA, inserción bases erróneas: Errores en la
duplicación .
 Letal y muta génico
 Muta génico: No sint proteína o función
alterada.
 Muerte: Letal

El espectro de acción = 100-400 nm

Mayor P germicida : 260 nm, ab base púricas y pirimidicas
No tienen actividad ionizante,
No produción prodigiosina-Proteasa
 Radiaciones NO Ionizantes.
Ultravioleta
 Uso limitado.
 Baja penetración ;
 Desinfectar superficies, aire.
 Campanas de flujo laminar, seguridad biológica.

 Desinfección de aire en hospitales: quirófanos, laboratorios

 En investigación: muta génesis
 No ag esterilizante:
 Elevas dosis matar esporas, no costeable
 Radiaciones NO Ionizantes.
L. Ultravioleta

 Lámparas de vapor de mercurio (emiten a

254 nm)
 No penetra en sólidos,
 poco en líquidos y vidrio

06/04/2018 48 48
Factores, sensibilidad bact UV

 Fase de crecimiento. Log

 Porcentaje T
 Esporas
 Bacillus pumilus, el más resistente a la radiación gamma.
 Control de mo.
F. Físicos y Químicos

 Esterilización (Físicos o Químicos)

 Métodos Químicos: Desinfección (Sanitisación),
Antisepsia.
 Oxido de Etileno, Gas esterilizante

 Ag. alquilante de grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos,

hidroxilos: Pt, Enz, comp órganicos, etc.
 Industria farmacéutica:
 Esterilizar m. termosensible: desechable/ plástico (cajas Petri,
jeringas, pipetas etc).
 Eficaz microbicida y mata endosporas bacterianas.
 Muy peligroso: inflamable y explosivo, y además cancerígeno, muy
tóxico e irritante.
 Autoclaves especiales: control de humedad, temperatura y presión.
 Las esporas de Bacillus subtilis var. Niger, monitoreo de la esterilización con oxido de etileno

 Control de Microorganismos
 Métodos de esterilización
 Físicos

 Calor (húmedo y seco)

 Filtración

 Radiaciones (ionizantes y no ionizantes)

 Ag. Químicos (Oxido de etileno).

 Antisépticos
 Desinfectantes
 Esterilizantes
 Quimioterapéuticos: Antibióticos, Sulfas..
Definiciones

 Agentes esterilizantes: agente químico q mata toda

forma de vida.

Esterilización: Proceso, que mata o elimina

(remueve) toda forma de vida.
Definiciones

 Agentes desinfectantes : productos químicos, inhiben o

matan mo. patógenos (infecciosos); elevada toxicidad,
sobre material inerte (fenol, aldehídos, Cloro).
 Patógeno. Todo agente biológico que puede producir enfermedad o
daño a un huésped: Humano, animal o vegetal

 Agentes antisépticos: S. químicas, que matan o inhiben

mo, con toxicidad reducida tejidos vivos (benzal,
merthiolate, Hg; ).
 Evitan la sépsis: putrefacción de materiales vivos.
 Control Químico del crecimiento.
Antisépticos y desinfectantes
vs quimio-terapéutico.

 Antisépticos y desinfectantes (fenol):

 Compuesto químico, inhibe o mata mo:
 Efecto similar todo tipo de células.
 No tienen blanco específico (antibióticos)
 Acción indiscriminada (dañar tejidos humanos)
 Definiciones.

 Agentes quimio-terapeúticos: S. químicas, que matan o

inhiben mo, debido a su toxicidad selectiva (Más tóxico
sobre mo, que sobre células animales), pueden ser de uso
interno (antibióticos, sulfas, etc),
 Penicilina, PC de bacterias
 Tratamiento Enfermedades infecc. Matar mo. sin dañar húesped.
 Control Químico del crecimiento.
Antibióticos

 Toxicidad selectiva, blanco específico.

 Más tóxicos mo, que células animales:
 Penicilina- Pared Celular.

 Agentes quimioterapeúticos: Tratamiento Enfermedades infecc

 Matar mo sin dañar húesped.
 Ag microbicida S. químicas, que matan
mo,
 Ag. Microbiostático. S. químicas, que
inhiben mo,
 AG Bacter-Microbiolítico. S.
químicas, que lisan al mo,
Agentes químicos
Alcoholes (70% alcohol en agua)

Solución de Iodo
Antisépticos. Nitrato de plata;
Matan o inhiben mo, baja toxicidad, Detergentes catiónicos (benzal)
tejidos vivos
Órgano Mercuriales (Merthiolate)
Colorantes.
Peróxido de Hidrogeno
Cloro y Compuestos clorados

Aldehídos
Desinfectantes y/o Esterilizantes.
Matan o inhiben mo, uso sobre objetos Oxido de Etileno (E)
inanimados, elevada toxicidad.
Compuestos Fenólicos
Ácidos y Álcalis.
Dicloruro mercúrico. Sulfato de cobre