ENZIMAS DE

RESTRICCIÓN
¿Qué son?
• Enzimas que reconocen secuencias de doble cadena específicas en el DNA y las
escinden a nivel de los elementos fosfodiéster de la doble hélice del DNA en el
lugar de reconocimiento o cerca de éste.
• Las enzimas de restricción son producidas por las bacterias como un mecanismo
de defensa contra las infecciones víricas. Restringen o impiden la infección vírica
degradando el ADN de los virus invasores.
Los sitios de corte pueden estar
Dan lugar a cadenas de DNA con
localizados de manera
extremos romos
inmediatamente opuesta entre sí

O puede ocurrir que las zonas de Da lugar a la aparición de resaltes

fragmentación queden laterales en los extremos 5’ o 3’ de
desfasadas por unas pocas bases la cadena de DNA denominados
en cualquier dirección extremos cohesivos.
• En la actualidad se conocen más de 3.500 enzimas de restricción, cada una de las
cuales posee su propio sitio de reconocimiento constituido generalmente por
cuatro o seis pares de bases, aunque algunas tienen sitios de reconocimiento de
mayor tamaño.
P. ej. La enzima de restricción
EcoRI reconoce la secuencia
específi ca de seis bases
5’GAATTC-3’ allí donde la
encuentra en una molécula de
DNA de doble cadena
El corte genera dos
La enzima corta el DNA en
fragmentos, cada uno con un
este sitio de restricción entre
segmento de cadena simple
la G y la A, en la secuencia de
5’-AATT-3’ de cuatro bases en
reconocimiento GAATTC.
su extremo.
• La digestión de una molécula de DNA con una enzima de restricción determinada
fragmenta el DNA en un conjunto de fragmentos característico y reproducible,
que refleja la frecuencia y la localización de los lugares de corte específicos.
• Las enzimas de restricción son una especie de tijeras moleculares sofisticadas para
cortar el ADN en fragmentos del tamaño deseado.
• El tamaño de los fragmentos de restricción de ADN producidos al digerir el ADN
con una enzima concreta puede estimarse a partir del número de veces que una
enzima de restricción dada corta el ADN.
• El tamaño real de los fragmentos producidos por la digestión del ADN con una
determinada enzima de restricción es variable, ya que el número y la localización
de las secuencias de reconocimiento exhiben un tipo de simetría denominada
palíndromo: la secuencia nucleotídica se lee igual en ambas cadenas del ADN en
dirección 5'-3'.
• Cuando una enzima de restricción corta ambas cadenas en el mismo punto
generando extremos romos, la DNA ligasa puede unirlos sin necesidad de que
exista una compatibilidad entre dichos extremos.
Gracias.