Cromatografía de gases

• Método de separación que se basa en la

distribución entre dos fases (diferentes
grados de afinidad entre los componentes
y la fase estacionaria)
• La fase estacionaria es un lecho
estacionario de gran superficie por el que
se desplaza la fase gaseosa
• Mayor afinidad son retenidos mas
fuertemente, tardan mas tiempo en la
salida o tienen mayor tiempo de
residencia en la columna
• El grafico que se obtiene toma el nombre
de cromatograma
• El grafico es el registro de la respuesta del
detector en el eje y y el tiempo en el eje x.
• tr es el tiempo de retención y se utiliza
para el análisis cualitativo
• Con la respuesta del detector se de la
concentración (con la altura o área del
pico) es decir proporciona información
cuantitativa
• A t=0 es el punto de inyección
• Se puede separar componentes de peso
molecular similar
• En una columna de cromatografía de
gases se puede diferencia isómeros de la
posición del doble enlace
• Se inyecta 1-2 uL o menos
 Ventajas
• Análisis cualitativo
• Análisis cuantitativo
• Rápido
• Pequeñas cantidades de muestra
• Se separan mezclas simples o complejas
 Columnas empacadas
• Las separaciones no son muy eficientes
(picos anchos)
 Columnas capilares
• En este tipo de columnas se mejora la eficiencia (los
picos son mas agudos)

• Longitud de la columna 100 m

 Separaciones isotérmicas
• Se dan a una sola temperatura
 Separaciones programadas
• Cambio de temperatura programada
• Ejemplo: 0ºC Temperatura inicial – 200ºC
Temperatura final; 2ºC/min razón de
programación (gradiente)
• 8 min hold at 0ºC, hold at 200 ºC
 Split
• Significa que no toda la muestra va a la
columna
• Es el divisor
• Ejemplo: 0,2 uL split 100:1 significa que
solo una centésima parte de lo que se
inyecta se dirige hacia la columna
• Si se inyecta demasiada muestra la
columna se satura
 Ejemplos
• Separación de ácidos grasos para calidad
de aceites. Se puede determinar el origen,
calidad (C18-2), insaturados (disuelven el
colesterol)
• La calidad del aceite esta dada por el
método de extracción
• Determinación de aromas, aceites
esenciales
• Controlar procesos de biodegradación
• Un liquido o sólido debe ser volátil para
ser analizado por cromatografía de gases
• A= Wxh/2 A= W*h Wb aprox 2 Wh
• Wh = ancho de pico a la mitad de la altura
• La línea base debe ser paralela al eje x de
lo contrario se tiene algún problema.
 Eficiencia de la columna
• Se puede determinar por el numero de platos
teóricos (N)
• Eficiencia es la capacidad de separación que
tiene determinada columna
2 2
 tr   tr 
N  16 *    5,54 *  
 Wb   Wh 

• Se determina con una sustancia de referencia

• 200 000 – 100 000 platos teóricos
(columna capilar)
• 2 000 – 5 000 platos teóricos (columna
empacada)
• HETP.= altura equivalente de un plato
teórico = L/N (longitud de la
columna/numero de platos teóricos)
• *grafico
 B
H  A   C *u
u
• A=camino múltiple
• B=difusión molecular
• u= velocidad lineal
• C=resistencia a la transferencia de masa
• B/u debe ser muy pequeño
• La columna es mas eficiente a cierta velocidad
conocida como la velocidad optima
 Resolución
• Es la separación entre dos picos (*ej)

 
 T T 
R 2 1 
 Wb2  Wb1 
 
 2 
• Columnas empacadas – baja resolución,
baja eficiencia
• Columnas capilares depende del largo de
la columna y del diámetro
Cromatografo de gases
 Gas portador
• Debe ser inerte. Sirve para transportar la
muestra a través de todo el sistema
cromatografico.
• Para su selección de debe considerar:
– Pureza.- alta pureza ya que las impurezas
afectan la respuesta del detector (3 ppm de
O2 pueden dañar permanentemente el
detector). Filtros para eliminar impurezas
además de oxigeno como agua, CO2
 – Efecto en la separación.- tamaño de la
molécula
– Disponibilidad
– Costo
– Seguridad en la operación
• Los gases mas usados son:
– H2
– He
– N2
• La selección del gas depende de dos
factores
– Tipo de columna
– Tipo de detector (TCD solo con He)
• Columna capilar: He o H2 (mejores
separaciones pero se debe importar)
• Columna empacada: N2 o He
 Cámara de inyección
• Sitio donde se
introduce la
muestra
• Microjeringa y
septum)
• El septum se debe cambiar cada cierto numero
de inyecciones
• La temperatura de la cámara debe ser lo
suficientemente alta para que se volatilicen los
componentes pero no muy alta para que no se
descomponga la muestra
• Ejemplo: Pesticidas 280 ºC
Petróleo 350 ºC
• Columna capilar: inyector capilar
• Septum.- puede ser de caucho (20
inyecciones), silicona (50 inyecciones).
Por la temperatura se desprende los
componentes volátiles del septum
• Purga del septum
 Sistemas de inyección
• “La muestra debe ser introducida y
evaporada de forma instantánea y
transportada a la columna con un mínimo
de ensanchamiento de la banda”
• Selección:
– Características de la muestra
• Estado físico (inyector para muestras gaseosas)
• Concentración de los componentes (split)
• Volatilidad (temperatura)
• Polaridad
• Estabilidad térmica
 Tipo de columna
• Empacada.- adentro tienen material de
empaque
• Capilar (diámetros de 0,1 o 0,2 mm)
• Megabore (*graf)
• En la columna es donde ocurre la
separación. Es el corazón de la
cromatografía
• El éxito de una separación depende de la
selección adecuada de la columna
• La fase estacionaria es una fina película
de un polímetro liquido (silica fundida)
inerte al 100%
• Material del tubo
– Empacadas: metálicas (acero inox, no es
100% inerte). Ferrul de acero
– Vidrio (100% inerte para pesticidas o
productos farmacéuticos)
• Silica fundida (SiO2) que es 100% inerte
para las capilares y Megabor. Ferrul de
grafito y tuerca de acero
• Dimensiones: catálogos con
características generales de las columnas
en diámetro y longitud)
• Para disminuir la caída de presión se debe
usar H2 en lugar de He en columnas
capilares ya que tiene menor viscosidad
• Las columnas capilares no se regeneran
• Las columnas empacadas se pueden
regenerar cambiando el empaque
• El soporte sólido de las columnas
empacadas es la tierra de diatomeas.
Esqueletos siliceos de algas marinas que
se recubren de una fina película de
silicona
 Estructura de las CE
• Área superficial
• Dureza
• Porosidad
• Estabilidad térmica
 Fase estacionaria
• Tiene una temperatura máxima de operación
TMO, depende del polímero
• Debe ser no volátil. Estabilidad térmica
• Químicamente inerte (no reactiva)
• Solubilidad diferencial
• Se tienen:
– Fases estacionarias polares (muestra polar)
– Fase estacionaria no polar (muestra no polar)
– Intermedia
– Especificas
Constante de partición

C f estacionaria A
KA 
C f movil A
C f estacionaria B
KB 
C f movil B
• KA ≠ KB solubilidad diferencia
• KA = KB hay que cambiar las condiciones o de
columna
• KA=0 CA fase estacionaria =0 A sale con el gas
portador
• K=∞ A CA fase móvil =0 A se queda al inicio de la
columna
• K=1 A se queda en la mitad
• Es decir podemos saber donde esta A de
acuerdo a KA
• El coeficiente de partición o de distribución
es el cociente entre las concentraciones
de una sustancia en dos fases inmiscibles
en equilibrio.
• Cuando KA=KB se puede cambiar la
temperatura, el flujo, ya que los
parámetros de la columna son fijos
 Detectores
• La temperatura del inyector y el detector
debe mas alta que de la columna (al
menos 50ºC entre columna y detector)
• La función del detector es monitorear el
gas efluente de la columna.
• Mide variaciones en su composición
originadas por los componentes eluidos
respecto al tiempo
• Mide una propiedad física que da una
respuesta
 Principales características
• Sensibilidad.- Respuesta frente a un cambio
de masa
• Mas sensible cuando la respuesta es mayor
• Depende de la propiedad física que se este
midiendo (conductividad térmica o eléctrica)

R
S
m
• Menor sensibilidad ppm (10-6)
• Mayor sensibilidad 10-12
• Estabilidad.- la señal no cambia con el
tiempo
• Linealidad.- Respuesta directamente
proporcional a la concentración
• Rango lineal.- rango de concentraciones
en que la respuesta es lineal, se
determina experimentalmente
• Cantidad minima detectable.- menor
concentración que se puede detectar
depende de la propiedad física que se
determina (limite de detección)
• Universalidad.- Los detectores son menos
sensibles cuanto mayor universales son.
• Facilidad de uso.- esto pasa a segundo
plano frente a las necesidades del
laboratorio
• Graf*
 Detectores
• TCD detector de conductividad térmica
(10-3 – 10-6)
• FID detector de ionización de llama (10-4 –
10-7)
• ECD detector de captura de electrones
(alta sensibilidad 10-9 – 10-12) pesticidas
órgano clorados
• PID detector de fotoionización
• FPD detector fotométrico de llama
• NPD detector de nitrógeno fósforo
• ELCD Detector de conductividad
electrolítica
• MSD detector de masas selectivo
• IRD detector de infrarrojo
• AED detector de emisión atómica
• uECD detector de captura
microelectrónica