ESPECTOSCROPIA ULTRAVIOLETA VISIBLE

Fundamento
La espectroscopia UV-Vis está basada en el proceso de absorción de la radiación ultravioleta-visible
(radiación con longitud de onda comprendida entre los 160 y 780 nm) por una molécula.

La absorción de esta radiación causa la promoción de un electrón a un estado excitado.

Los electrones que se excitan al absorber radiación de esta frecuencia son los electrones de enlace
de las moléculas, por lo que los picos de absorción se pueden correlacionar con los distintos tipos de
enlace presentes en el compuesto.

La radiación ultravioleta (UV) y visible comprende sólo una pequeña parte del espectro
electromagnético, que incluye otras formas de radiación como radio, infrarrojo (IR), cósmica y rayos X

Debido a ello, la espectroscopía UV-Vis se utiliza para la identificación de los grupos funcionales
presentes en una molécula. Las bandas que aparecen en un espectro UV-Vis son anchas debido a la
superposición de transiciones vibracionales y electrónicas.
El espectro electromagnético
Aplicaciones
 Determinación de grupos funcionales en moléculas orgánicas
El espectro Ultravioleta de una molécula se obtiene generalmente en forma adicional al espectro infrarrojo de la misma
especie. Este espectro IR frecuentemente sirve como dato confirmativo de la ausencia o presencia de ciertos grupos
funcionales.

 Determinación de metales en compuestos de coordinación

Las soluciones de iones metálicos de transición pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz visible) debido a que los
electrones en los átomos de metal se pueden excitar desde un estado electrónico a otro. El color de las soluciones de iones
metálicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de
una solución diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amoníaco se intensifica el color y cambia la longitud de onda
de absorción máxima.
 Análisis de semiconductores
 Medidas de color
Consiste en medir la intensidad del color (o de la radiación absorbida en UV) a una longitud de onda específica comparándola
con otras soluciones de concentración conocida (soluciones estándar) que contengan la misma especie absorbente.
 Determinación cuantitativa
La espectroscopia ultravioleta-visible se usa rutinariamente en química analítica para la determinación cuantitativa de
diferentes analitos, tales como iones de metales de transición, compuestos orgánicos altamente conjugados y
macromoléculas biológicas.
 Seguimiento de la cinética de procesos químicos y bioquímicos
Equipamiento
El instrumento utilizado en la espectrometría ultravioleta-visible se llama espectrofotómetro UV-Vis.
Mide la intensidad de luz que pasa a través de una muestra (I), y la compara con la intensidad de luz
antes de pasar a través de la muestra (Io). La relación I / Io se llama transmitancia, y se expresa
habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisión:
A = - log (%T)

Las partes básicas de un espectrofotómetro son una fuente de luz (a menudo una bombilla
incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lámpara de arco de deuterio en el
ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difracción o monocromador para separar las
diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD.
Los fotodiodos se usan con monochomadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de
onda alcanza el detector. Las rejillas de difracción se utilizan con CCDs, que recogen la luz de
diferentes longitudes de onda en píxeles.
Un espectrofotómetro puede ser único o de doble haz. En un instrumento de un solo haz (como
el Spectronic 20), toda la luz pasa a través de la célula muestra. La Io debe medirse retirando la
muestra. Este fue el primer diseño, y todavía está en uso en la enseñanza y laboratorios
industriales.

En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la muestra. Un
haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a través de la muestra. Algunos
instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y el haz de referencia y el de la
muestra se miden al mismo tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a través de un
bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de
muestra y la del haz de referencia.
Las muestras para espectrofotometría UV-Vis suelen ser líquidas, aunque la absorbancia de los gases e
incluso de los sólidos también puede medirse. Las muestras suelen ser colocadas en una célula
transparente, conocida como cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1
cm. Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley de Beer-Lambert. También se pueden
usar tubos de ensayo como cubetas en algunos instrumentos. Las mejores cubetas están hechas con
cuarzo de alta calidad, aunque son comunes las de vidrio o plástico. El cristal y la mayoría de los plásticos
absorben en el UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.
Requisitos de las muestras
 Las muestras deben entregarse adecuadamente etiquetadas, envasadas y acondicionadas para
asegurar su identificación, integridad y conservación durante el transporte y garantizar la
seguridad del personal que lo realiza.
 El equipo dispone de una esfera integradora, por lo que se pueden analizar muestras tanto
líquidas como sólidas o en suspensión.
 El volumen mínimo de líquido a analizar es de 3 ml. Las muestras sólidas deben ser placas con
dimensiones comprendidas entre 20 (altura) x 20 (anchura) x 0.5 (grosor) mm y 65 (altura) x 50
(anchura) x 25 (grosor) mm. Las muestras sólidas en polvo deben estar molidas y no ser
abrasivas.
 Para el análisis en el rango NIR de muestras en disolución evitar usar agua y alcohol como
disolventes.
 La muestra deberá presentarse en disolución siendo la concentración la adecuada para el
análisis. Si no se cumple este requisito, la unidad podrá actuar sobre la muestra
(preparando la disolución y/o obteniendo la concentración adecuada de analito) en cuyo
caso, previa aceptación del usuario, se procederá a facturar un importe en concepto de
preparación de la muestra.
 La disolución del analito debe ser estable en las condiciones de almacenamiento y
análisis.
 Los disolventes y los tampones utilizados no deben interferir en la zona de medida del
analito (ver documentación de la unidad)