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• ANACAHUITE
MEXICO
• PIRÚ
ARGENTINA
• AGUARIBAY
Arbusto o arbolillo perennifolio de hasta 10m. de alto.
• TALLO: Ramoso , hasta de 1 m. de longitud
• HOJAS: alternas, pinnadas, hasta 35 cms. de largo,
raquis ligeramente alado; folíolos sésiles, el terminal
en general presente y los laterales terminados en
acumen opuesto al raquis; pecíolo 2-4 cms. de
largo.
• FLORES: pequeñas, muy numerosas, uni ó
bisexuales ,pentámeras
• FRUTOS: drupa esférica de 5 mm. de diámetro de
color rosado oscuro brillante: semillas negras, lisas y
opacas.
• Es oriundo del Perú y abunda también en
Argentina, Chile, Ecuador y Bolivia. Cultivado
como árbol ornamental en México y Estados
Unidos.
• En el Perú se le encuentra hasta los 3300
msnm. En los andes del sur y 3000msnm de
los andes del centro.
Hojas y frutos. En
menor medida la
Corteza.
• Hojas :
Contienen flavonoides, pigmentos
antocianìdicos, Mirceno, fenoles,
triterpenos y aceite esencial (0,5%).
Además de los ácidos linolénico, linoleico,
lignocérico y esteárico.
• Frutos : Contiene aceite esencial(2,4%),
proteínas, sustancias reductoras.
• Afecciones respiratorias (bronquitis, tos)
Parte usada : ramas jóvenes, hojas
• Reumatismo y procesos inflamatorios :
Parte usada : hojas
• Tratamiento de hepatitis :
Parte usada : hojas
• Cicatrizante :
Parte usada : corteza (tallo), hojas y resina
• Depurativo :
Parte usada : hojas
• Hemostático :
Parte usada : frutos
• Antiespasmódico :
Parte usada : hojas
• Actividad antibacteriana:
• Actividad antimicótica:
• Actividad insecticida:
• Actividad antiinflamatoria:
• Otras acciones
ACTIVIDAD
1.2 ANTIMICROBIANA
• Por su origen:
Es una bacteria
anaerobia gram negativa que
se encuentra comúnmente en el
intestino de los seres humanos y
animales de sangre caliente, la
ingesta de estos alimentos
contaminados desencadena
cuadros diarreicos la mayoría
decepas
son inofensivas
GRUPOS FITOQUÍMICOS
1.3 ANTIMICROBIANOS
TERPENOIDES Y
ACEITES
ESCENCIALES
FENOLES Y
POLIFENOLE
S Schinus FLAVONAS,
molle FLAVONOIDES
Y FLAVONOLES
QUINONAS,
TANINOS ,
CUMARINAS Y
ALCALOIDES
MÉTODOS PARA LA
1.4 DETERMINACIÓN DE LA
ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA.
Este método se basa en la
determinación del crecimiento
antimicrobiano.
concentración mínima
inhibitoria CMI)
“ Molle ”
RECOLECCIÓN
RECOLECCIÓN
Y
TRATAMIENTO
DE SELECCIÓN-
LA LIMPIEZA
MUESTRA
SECADO
MOLIENDA
ALMACENAMIENTO
• Se realizó el screening fitoquímico utilizando
las hojas de Schinus molleL. “Molle”, siguiendo
la técnica modificada de LAPRONAT
(Laboratorio de Productos Naturales) a fin de
identificar los metabolitos secundarios, este
análisis es de carácter cualitativo, para lo cual
se extraen diferentes fracciones a las cuales se
le realiza reacciones químicas de coloración
y/o precipitación que sirven para identificar
los metabolitos secundarios
OBTENCIÓN DE LAS FRACCIONES:
• Fracción A FRACCION D: Sobre esta fracción se realiza directamente la reacción de:
• Fracción B • REACCION DE LIEBERMAN-BUCHARD
• Fracción C • REACCION PARA ALCALOIDES
• Fracción D • REACCION DE ROSENHEIN
• Fracción E • REACCION DE SHINODA
• Fracción F
FRACCION E: Sobre esta fracción se realiza directamente los ensayos de:
IDENTIFICACION DE METABOLITOS SECUNDARIOS: • REACCION DE ROSENHEIN
• REACCION DE SHINODA
FRACCION A: •
FRACCION F:
• REACCIÓN DE GELATINA • PRUEBA DE ESPUMA
• REACCIÓN DE CLORURO FÉRRICO
2.EXTRACTO ACUOSO
POR REFLUJO
Cepa utilizada :
Escherichia coli (ATCC 25922).
Sthapylococcus aureus (ATCC 25923)
Medios de Cultivo :
Agar Müller-Hinton
Caldo Nutritivo.
Control Positivo :
Cloranfenicol
Control Negativo :
Etanol 96º
Agua destilada
Preparación del Medio de Cultivo Sólido
• Se suspendió la cantidad requerida de cultivo (polvo en gramos por litro de agua destilada
. Luego se mezcló hasta uniformar. Se calentó agitando frecuentemente unos minutos
hasta que se disolvió y se llevó a autoclave entre 15 a 20 minutos a 121° c 0 15 lb de
presión. Luego se distribuyó en placas o en tubos.
• De un cultivo puro se tomó una asada de 4 a 5 colonias que presentaron las mismas características
morfológicas.
• Luego fueron sembradas en caldo nutritivo para bacterias.
• Seguidamente fueron incubados a 37 ºC por 24 horas, para determinar aproximadamente la
concentración microbiana estos caldos fueron ajustados a la turbidez del estándar Nº 0.5 de Mac
Farland.
• Método de Difusión en Agar
AL DISCO
100 µL.
25 mg 100 mg
Extracto A Extracto A
50 mg
Extracto B
25 mg 100 mg
Extracto B Extracto B
Acuoso – Reflujo - - - 21 -
Microorganismos Extractos Concentración decreciente de extractos mg/mL.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Concentración 250 125 62.5 31.25 15.6 7.8 3.9 2.0 1.0 CN
mg/Ml (25%)
aureus
Etanólico - - - + + + + + + +
Percolación
Acuoso x Reflujo + + + + + + + + + +
Escherichia coli
+ + + + + + + + + +
Etanólico
Percolación
CMI: mg/mL.
Extractos
Microorganismo
• En un trabajo anterior realizado por Gupta M. en 1995, determinó que las hojas tenían como
componentes químicos a los flavonoides, compuestos fenólicos, triterpenos y antraquinonas. Por
ello se consideró necesario realizarle un screening fitoquìmico, que permitió identificar a los:
taninos, grupos fenólicos, triterpenos y esteroides, antraquinonas, alcaloides, flavonoides y
saponinas.
• Estudios realizados por Anesini C, Pérez C, en 1993, demostraron que el extracto acuoso de las
hojas de Schinus molle L., no tienen actividad frente Staphylococcus aureus,Aspergillus nigery E.
coli. Mientras que en nuestro estudio, si se evidenció actividad antibacteriana frente a la cepa de S.
aureus, mientras que frente a la cepa de E. coli, no presentó actividad antibacteriana.
• La determinación de la actividad antibacteriana de los extractos acuoso y etanólico de las hojas, se
realizó por el Método de disco difusión a las concentraciones de 100, 50 y 25%, obteniéndose como
resultado halos de inhibición 15.6mm, 15.2mm y 15.1mm respectivamente, frente a
Staphylococcus aureus comparándolo con el control positivo de cloranfenicol, considerándose una
sensibilidad intermedia. El extracto etanólico a las concentraciones de 100, 50 y 25%, obtuvo halos
de inhibición de 7.2mm, 7.0mm y 6.9mm, al compararlo con el control positivo cloranfenicol, se
considera como resistente.
• Mientras que el extracto etanólico por percolación frente a Escherichia
coli, a las concentraciones de 100, 50 y 25%, presentó halos de inhibición
de 6.5 mm, 6.2mm y 6.1mm lo que según el control positivo cloranfenicol
se considera como resistente. El extracto acuoso por reflujo frente a
Escherichia coli no presentó halos de inhibición en las concentraciones
mencionadas.
• La ausencia de actividad inhibitoria del extracto acuoso de Schinusmolle L.
frente a Escherichia coli, comparado a lo observado con Staphyllococcus
aureus, se relaciona con las diferencias estructurales en dichas bacterias
representantes tanto de bacterias Gram negativas como bacterias Gram
positivas respectivamente, donde las Gram negativas presentan una
envoltura externa que protege a la pared bacteriana (que es mas angosta)
mientras que en las Gram positivas no se presenta dicha envoltura
estando más expuesta la pared bacteriana (más ancha o gruesa) donde
posiblemente actuaria el extracto evaluado, desestabilizando la pared
bacteriana.
• En lo referente a la Concentración mínima inhibitoria(CMI), a una
concentración de 250mg/mL (25%) para el extracto acuoso por reflujo se
puede observar el efecto inhibitorio a una concentración de 15.6 y para el
extracto etanólico por percolación se observó a una concentración de
62.5mg/mL.
• Los metabolitos secundarios presentes en los extractos de
las hojas de Schinus molle L. fueron : taninos, grupos
fenólicos, triterpenos y esteroides, antraquinonas,
alcaloides, flavonoides y saponinas. Falta
• La actividad antibacteriana de los extractos acuoso y
etanólico de las hojas de Schinus molle L. a una
concentración de 250 mg/mL, frente a Staphylococcus
aureus, mostró halos de inhibición de 15.1 mm y 6.9 mm
respectivamente
• El extracto etanólico por percolación, frente a Escherichia
coli, presentó un halo de inhibición de 6.1 mm, mientras
que el extracto acuoso por reflujo no presentaron halos de
inhibición.
• La Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) a una
concentración de 250mg/mL. para los extractos
acuoso por reflujo fue de 15.6mg/mL. y para el
extracto etanólico por percolación se observó a
una concentración de 62.5mg/mL..
• El porcentaje de inhibición relativa (PIR) frente a
Staphylococcus aureus, para el extracto acuoso
por reflujo fue de 55.92 %, mientras que el
extracto etanólico por percolación obtuvo un
25.55%. El PIR para el extracto etanólico por
percolación frente a Escherichia coli fue de
29.04%.
• Probar a la actividad antibacteriana de los
extractos de las hojas de Schinus molle L., frente
a otros microorganismos .
• Realizar estudios pre-clínicos para comprobar
otras actividades farmacológicas.
• Incentivar a los estudiantes de la Farmacia y
bioquímica a investigar plantas de nuestra región.
• Continuar con estudios de otras propiedades
terapéuticas de Shinus molle L.