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BACTERIANO
REQUERIMIENTOS PARA EL DESARROLLO
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES:
Las bacterias autotróficas (litòtrofas) sólo requieren agua,
sales inorgánicas y dióxido de carbono para su desarrollo.
Las bacterias heterotróficas (organótrofas) exigen una
forma orgànica de carbono para su crecimiento.
Los átomos de nitrógeno de los aminoácidos, las purinas y
las pirimidinas provienen del amonio.
El flujo de nitrógeno en estos compuestos comienza con la
reducción del nitrógeno atmosférico a amonio por los
microorganismos fijadores de nitrógeno.
Fotótrofos: microorganismos que no requieren una fuente
exógena de un determinado factor de crecimiento.
Auxótrofos: microorganismos que requieren del agregado
de un factor de crecimiento al medio de cultivo.
REQUERIMIENTOS PARA EL DESARROLLO
REQUERIMIENTOS FISICOS
Para cada bacteria existe una temperatura òptima en la
cual el microorganismo se desarrolla en forma màs ràpida y
un espectro de temperatura en la cual el desarrollo puede
producirse.
Las bacterias se dividen en tres grupos sobre la base de los
espectros de temperatura en los cuales se pueden
desarrollar: psicròfilas, -5 a 30ºC, òptima 10 a 20ºC;
mesòfilas, 10 a 45ºC, òptima 20 a 40ºC; termòfilas, 25 a
80ºC, òptima 50 a 60ºC.
Para la mayor parte de las bacterias patògenas el ph
òptimo es 7.2 a 7.6.
Los microorganismos fermentadores presentan un espectro
mayor de valores de ph dentro de los cuales se produce su
crecimiento que los m.o. que emplean vìas respiratorias.
CRECIMIENTO DE POBLACIONES
BACTERIANAS
Cuando una célula bacteriana se coloca en un medio
nutricionalmente complejo aumenta de tamaño y con el
tiempo se divide para formar dos células. Esto prosigue, lo
que da lugar a una población de células no diferenciadas.
En el desarrollo de un cultivo bacteriano se produce un
aumento de la masa celular y del número de
microorganismos, pero no existe una relación constante
entre los dos parámetros, por consiguiente es necesario
diferenciar entre la concentración celular, o sea el número
de células por unidad de volumen de cultivo y la densidad
bacteriana, que se define como el protoplasma total por
unidad de volumen.
CRECIMIENTO DE POBLACIONES
BACTERIANAS
DETERMINACION DE LA MASA BACTERIANA
Se puede determinar directamente en terminos de peso
seco.
El método más difundido para la estimación de la biomasa
total en suspensión es la medición de la densidad óptica de
un caldo de cultivo en un espectrofotómetro.
DETERMINACION DEL NUMERO DE CELULAS
Se puede determinar por un recuento total directo o por un
recuento viable indirecto.
Para la determinación del número de bacterias viables es
necesario plaquear una muestra del cultivo.La población
microbiana se diluye en un diluyente no tóxico y se
dispersa una alicuota de la población diluida en un medio
sólido adecuado, de manera que después de un período de
incubación cada unidad viable forme una colonia.
CRECIMIENTO DE POBLACIONES
BACTERIANAS
El número de individuos o agregados viables originalmete
presentes, se determina a partir del recuento de colonias y
de la dilución.
SISTEMAS DE CULTIVO BACTERIANO
Cuando un medio adecuado se inocula con bacterias y se
toman muestras pequeñas a intervalos regulares, la
representación gráfica de los datos dará una curva de
crecimiento característica. Las variaciones de la pendiente
en un gráfico de este tipo indican la transición de una a otra
fase del desarrollo. Los logaritmos en base 2 son los más
útiles, ya que cada unidad en la ordenada representa una
duplicación de la población.
CRECIMIENTO DE POBLACIONES
BACTERIANAS
La curva de crecimiento bacteriano se puede dividir en
cuatro fases principales: fase de latencia, fase del
crecimiento exponencial, fase estacionaria y fase de
declinación. Estas fases reflejan el estado fisiológico de los
microorganismos en el cultivo en cada momento particular.
Fase de latencia: después de la inoculación se produce un
incremento en el tamaño de la célula en un momento en el
cual la división celular es escasa o nula. Durante esta fase
hay un marcado aumento de los componentes
macromoleculares, de la actividad metabólica y de la
susceptibilidad a los agentes químicos y físicos.
Fase de crecimiento exponencial: en la fase exponencial o
logarítmica las células se encuentran en un estado de
desarrollo equilibrado. Durante este estado la masa y el
volumen de las células aumentan y las células se dividen a
una velocidad constante determinada.
CRECIMIENTO DE POBLACIONES
BACTERIANAS
El tiempo de duplicación para cultivos de E coli en caldo a
37°C es de alrededor de 20 minutos, comparado con un
tiempo de duplicación mínimo de alrededor de 10 horas
para las células de mamíferos mantenidas a la misma
temperatura.
Fases estacionaria y de declinación: cuando se emplean las
condicones de cultivo de rutina la acumulación de productos
de desecho, el agotamiento de los nutrientes y la variación
del ph ejercen un efecto nocivo sobre el cultivo, lo que
produce una disminución de la velocidad del crecimiento.
Durante la fase estacionaria el recuento de las células
viables se mantiene constante durante un período variable
pero que con el tiempo lleva a un período en que disminuye
la población. Las células en un cultivo que está muriendo
aparecen elongadas, henchidas o distorsionadas.
CICLO DE LA CELULA BACTERIANA