MECANISMOS DE

TRANSFERENCIA DE GENES
 INTRODUCCION

 Existen tres vìas principales por las cuales las bacterias

intercambian informaciòn genètica.
 Transformaciòn: implica la captaciòn directa y asimilaciòn
del DNA desnudo por la cèlula receptora y se produce de
forma natural sòlo en ciertas especies bacterianas.
 Transducciòn: es un proceso por el cual un virus
bacteriano actùa como vector para la transmisiòn de
genes, transportando genes bacterianos desde una
cèlula a otra.
 Conjugaciòn: una bacteria transmite de forma directa
parte o toda su informaciòn genètica a un receptor
adecuado.
 INTRODUCCION

 En cada uno de estos procesos el DNA introducido en el

receptor puede experimentar recombinaciòn con el
genoma residente de èste, lo que da lugar a una nueva
combinaciòn de caracteres genèticos.
 Las tres vìas de transferencia de genes tienen caràcter
unidireccional, con el DNA que pasa sòlo de la cèlula
dadora a la receptora.
 TRANSFORMACION

 Es el mecanismo màs importante de intercambio

genètico para ciertas especies de bacterias, en especial
Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzaey
Neisseria gonorrhoeae.
 Los pasos comunes en la transformaciòn implican la
uniòn de un DNA exògeno a la superficie celular, su
transporte al interior de la cèlula y luego la
recombinaciòn con el genoma residente.
 Casi cualquier segmento de DNA puede ser asimilado
durante la transformaciòn.
 TRANSFORMACION

 MICROORGANISMOS GRAMPOSITIVOS
 Cuando las cèlulas bacterianas se encuentran en un
estado que permite la transformaciòn se dice que son
competentes.
 El desarrollo de la competencia se debe a una señal
extracelular, llamada factor de competencia (FC) que se
acumula en el medio de crecimiento.
 Dada una cèlula competente grampositiva, el paso
siguiente en la transformaciòn es la uniòn del DNA a la
superficie externa de la cèlula. Los detalles de esta
reacciòn en general implican una uniòn laxa y reversible
del DNA seguida de una uniòn fortalecida en la cual el
DNA unido no puede ser separado de la superficie cel.i
 TRANSFORMACION

 MICROORGANISMOS GRAMPOSITIVOS
 En ambas circunstancias el DNA transformante todavìa
es sensible a la DNAasa agregada de forma exògena.
Sòlo se torna resistente a la acciòn de la DNAasa
cuando es transportado al interior de la cèlula.
 El transporte del DNA dentro de la cèlula requiere la
asociaciòn del DNA con una proteìna especial que sòlo
se encuentra en las cèlulas competentes y que es
inducida por el FC.
 Durante el curso de la uniòn y la penetraciòn en la cèlula
el DNA es fracturado en pequeños fragmentos, es
desnaturalizado y sòlo una de las dos hebras penetra en
la cèlula.
 TRANSFORMACION

 MICROORGANISMOS GRAMPOSITIVOS
 Los trozos monocatenarios que ingresan a la cèlula por
esta vìa ahora son equilibrados para la recombinaciòn
con el genoma residente.
 En general sòlo el DNA que comparte secuencias de
homologìa significativa con el genoma de la cèlula
huèsped es capaz de recombinaciòn.
 La recombinaciòn del DNA homòlogo es muy eficiente y
hasta un 50% del DNA transportado resulta integrado al
cromosoma.
 La hebra transformante reemplaza una de las dos hebras
en la regiòn adecuada del cromosoma.
 TRANSFORMACION

 MICROORGANISMOS GRAMNEGATIVOS
 Diferencias con los grampositivos:
 Ninguno de los microorganismos gramnegativos parece
apoyarse en señales extracelulares.
 Muchos de los microorganismos gramnegativos se
unirán y transportarán DNA únicamente si éste proviene
de una especie estrechamente relacionad.
 El DNA bicatenario dador ingresa primero en vesículas
adosadas a la membrana llamadas transformosomas.
 A medida que una hebra del DNA dador egresa de la
vesícula y forma un heterodúplex con el cromosoma
receptor, la otra hebra dadora es degradada.
 TRANSDUCCION

 Implica dos mecanismos diferentes por los cuales un

bacteriófago (un virus de bacterias) puede transportar
genes bacterianos de una célula a otra.
 TRANSDUCCION GENERALIZADA
 Permite la transferencia de casi cualquier gen bacteriano
 TRANSDUCCION ESPECIALIZADA
 Puede operar sólo sobre genes determinados.
 TRANSDUCCION

 TRANSDUCCION GENERALIZADA
 Surge de la multiplicación virulenta del bacteriófago.
 Cada bacteriófago cuenta con un mecanismo para
empaquetar su genoma dentro de una cápside proteica y
algunos bacteriófagos a veces empaquetan fragmentos
del DNA del huésped en su lugar. Este empaquetamiento
aberrante se produce al azar con respecto a las
secuencias del huésped que son empaquetadas y por
consiguiente cualquiera de los genes bacterianos puede
ser transferido.
 La cantidad del DNA del huésped que se puede transferir
está limitada por el tamaño de la cápside del fago.
 TRANSDUCCION

 TRANSDUCCION GENERALIZADA
 El DNA empaquetado está contenido en una cápside que
es totalmente competente para adsorberse a una
segunda célula bacteriana e inyectar su DNA.
 La posterior recombinación entre el DNA inyectado y el
genoma residente puede dar lugar a la transmisión de
cualquier información genética contenida en el DNA
empaquetado.
 Debido a que la partícula transductora con DNA
bacteriano no transporta ninguna información genética
del bacteriófago, la célula receptora es capaz de
sobrevivir a esta seudoinfección.
 TRANSDUCCION

 LISOGENIA Y TRANSDUCCION ESPECIALIZADA

 Otra forma importante de multiplicación para ciertos
bacteriófagos es la que implica una relación benigna con
el huésped llamada lisogenia.
 En el estado de lisogenia el genoma de un bacteriófago
está integrado en una ubicación determinada en el
cromosoma bacteriano.
 Mientras se encuentran en estado de lisogenia la mayor
parte de los genes virales están reprimidos y por
consiguiente el fago lisogénico tiene escaso efecto sobre
el crecimiento de la bacteria.
 TRANSDUCCION

 LISOGENIA Y TRANSDUCCION ESPECIALIZADA

 Una variación de estímulos puede inducir que el estado
de lisogenia pase a la forma virulenta de multiplicación.
 Cuando esto ocurre, el genoma del virus es extirpado del
genoma del huésped y sufre ciclos repetidos de
replicación, expresión de genes virales y finalmente es
empaquetado dentro de las cápsides del fago.
 La extirpación del genoma de un bacteriófago del
cromosoma bacteriano está a cargo de un mecanismo de
recombinación especial que en general produce la
escisión exacta del genoma del fago. Sin embargo este
mecanismo de recombinación no es perfecto.
 TRANSDUCCION

 LISOGENIA Y TRANSDUCCION ESPECIALIZADA

 En ocasiones la escisión se produce de tal manera que
se incluyen en el DNA escindido genes bacterianos
vecinos, lo que puede llevar a una transducción
especializada de ese gen.
 Una vez que se produce esta escisión aberrante, el gen
bacteriano se convierte en parte integrante del genoma
del fago para todas las infecciones ulteriores.
 La nueva cepa de fago producida de esta manera se
puede propagar de forma estable y recibe el nombre de
fago de transducción especializada.
 TRANSDUCCION

 LISOGENIA Y TRANSDUCCION ESPECIALIZADA

 Si este fago particular de transducciòn entra en algùn
momento en una relaciòn lisogènica con una segunda
cèlula, esta segunda cèlula habrà ganado genes
bacterianos del huèsped previo y por consiguiente es un
transductante.
 La mayor parte de los genomas de los bacteriòfagos se
integran en regiones particulares, denominadas sitios de
uniòn, en el cromosoma bacteriano. Esto limita los genes
bacterianos que pueden ser ganados en la transducciòn
especializada a aquellos que se encuentran cerca de los
sitios de uniòn.
 CONJUGACION

 Los plàsmidos son los elementos genèticos que màs

frecuentemente se transfieren en la conjugaciòn.
 TRANSFERENCIA DEL FACTOR F
 La forma màs simple del factor F es un plàsmido de
94,500 pares de bases que transporta genes implicados
en su propia replicaciòn y en la transferencia por
conjugaciòn. Las E coli dadoras que transportan F
(llamadas F +) pueden transmitir el factor a receptores
adecuados, con lo cual convierten un receptor F- en uno
F+. La transferencia por conjugaciòn es un proceso
replicativo y por lo tanto el dador permanece como una
cèlula F+ despuès de la conjugaciòn.
 CONJUGACION

 TRANSFERENCIA DEL FACTOR F

 El proceso de conjugaciòn depende de manera crìtica de
la producciòn de un apèndice especializado, el pilus F,
presente sòlo en las cèlulas que contienen factor F.
 El pilus F en apariencia se une a cèlulas receptoras (F-)
y luego se retrae para llevar el par en conjugaciòn a una
estrecha proximidad. El contacto entre las paredes
celulares del par parece ser necesario para permitir la
transferencia del DNA.
 La pilina F y las proteìnas necesarias para el ensamblaje
del pilus son codificadas por genes situados dentro del
factor F.
 CONJUGACION

 TRANSFERENCIA DE GENES CROMOSOMICOS POR

EL FACTOR F
 El factor F fue reconocido primero por su capacidad para
efectuar la transferencia de genes cromosòmicos.
 La cèlula receptora debe ser recombinante-competente
(recA+) para incorporar los genes cromosòmicos
transferidos a su propio genoma.
 La naturaleza de la transferencia del gen cromosòmico
por un F+ depende de la capacidad del factor F para
integrarse al cromosoma bacteriano.
 Todos los cultivos F+ con una densidad razonable
contienen cèlulas con F integrados.
 CONJUGACION

 TRANSFERENCIA DE GENES CROMOSOMICOS POR

EL FACTOR F
 Estas cèlulas pueden aislarse y muestran la nueva
propiedad de una alta frecuencia de recombinaciòn en la
transferencia de los marcadores cromosòmicos, por lo
que se las llama Hfr.
 La transferencia de genes cromosòmicos de una Hfr se
produce exactamente por los mismos mecanismos
usados para la transferencia del F autònomo por una
cèlula F+. Dado que el factor F està integrado en el
cromosoma de una Hfr, el clivaje y la transferencia de
una ùnica hebra de DNA, dan lugar a la transferencia de
segmentos de la secuencia del factor F y del DNA
cromosòmico.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 Los plàsmidos son elementos genèticos auxiliares que

generalmente se replican como DNA bicatenario circular
en forma independiente del cromosoma bacteriano.
 Muchos, como el plàsmido F, son capaces de
autotransmitirse en virtud de proteìnas codificadas en el
plàsmido que permiten la conjugaciòn bacteriana.
 El tamaño de los plàsmidos varìa desde menos de 1,000
hasta màs de 400,000 pares de bases y pueden
transportar una amplia variedad de genes entre bacterias
de la misma o de diferente especie.
 Los plàsmidos confieren la mayor parte de las
propiedades de resistencia a los antibiòticos de las
bacterias y varios casos de virulencia de patògenos.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 CLASIFICACION DE PLASMIDOS
 El contenido genètico de varios plàsmidos forma la base
de uno de los sistemas de clasificaciòn.
 Los plàsmidos de resistencia (R) transportan genes de
resistencia a los antibiòticos y con frecuencia varios
genes de resistencia son transportados por un ùnico
plàsmido R.
 Los plàsmidos colicinògenos (Col) codifican pequeñas
proteìnas ( colicinas ) que destruyen una variedad de
bacterias entèricas relacionadas con los
microorganismos productores. Cada plàsmido codifica
tambièn una proteìna inmunològica de modo que la
cèlula productora de colicina no se suicide.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 Las proteìnas antibacterianas tambièn son especificadas

por plàsmidos estreptocòcicos y estafilocòcicos;
miembros de esta categorìa general de proteìnas son las
llamadas bacteriocinas.
 Los plàsmidos de virulencia codifican varias proteìnas
implicadas en las propiedades patògenas de las
bacterias: producciòn de toxinas como las del tètanos,
carbunco y las enterotoxinas.
 Algunos plàsmidos de virulencia codifican proteìnas
importantes en la colonizaciòn ( ej: factores que permiten
la adherencia de bacterias a cèlulas en el intestino
delgado).
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 Otra clase amplia de plàsmidos afecta las actividades

metabòlicas de las bacterias. Varios plàsmidos de
Pseudomonas permiten que sus huèspedes degraden y
por lo tanto destoxifiquen productos quìmicos orgànicos
como el tolueno, el octano y el naftaleno.
 MICROORGANISMOS GRAMNEGATIVOS
 Se ha encontrado que los plàsmidos relacionados con F
son importantes en ciertos casos de resistencia a los
antibiòticos y en la producciòn de algunas colicinas.
 Algunos plàsmidos tienen un espectro muy amplio de
huèspedes y son capaces de propagarse y de promover
la conjugaciòn casi en cualquier bacteria gramnegativa.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 MICROORGANISMOS GRAMNEGATIVOS
 La importancia crìtica de los plàsmidos con amplio
espectro de huèspedes reside en que permiten la
transferencia de genes entre muchas cèlulas bacterianas
no relacionadas.
 Un plàsmido de resistencia a los antibiòticos en un
germen no patògeno puede ser transferido a una cepa
de bacterias patògenas, lo que pone en peligro la
terapeùtica antibiòtica contra el patògeno.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 MICROORGANISMOS GRAMPOSITIVOS
 Se han encontrado plásmidos conjugadores en
Streptococcus, Clostridium y Bacillus.
 Ninguno de los sistemas de conjugación de
grampositivos depende de pilis sexuales.
 Las células receptoras sin el plásmido secretan un
pequeño péptido que funciona como una feromona
sexual, al hacer que la célula dadora se vuelva
adherente y forme pares de apareamiento estables con
las receptoras. La feromona interactua con las células
dadoras por medio de un receptor en la superficie celular
para inducir la s´ntesis de una sustancia especialde
agregación conocida como adhesina.

 PLASMIDOS BACTERIANOS

 PLASMIDOS DE RESISTENCIA A DROGAS

 El fenómeno de la transmisión de la resistencia a las
drogas fue reconocido por primera vez en Japón hacia
fines de la década de 1950.
 En la práctica casi cualquiera de las drogas
antibacterianas en uso puede ser convertida en ineficaz
por un plásmido R u otro y muchos de estos plásmidos
contienen múltiples determinantes de resistencia a las
drogas.
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 EVOLUCION RAPIDA DE LOS PLASMIDOS R

 Los plásmidos R tienen gran plasticidad y evolucionan
con rapidez en presencia de la presión selectiva de los
tratamientos antibióticos.
 Todos los genes de resistencia a las drogas de un
plásmido R conjugador típico están agrupadas en una
región del plásmido llamada “ determinante r”, en tanto
que los genes implicados en la transferencia por
conjugación están agrupados en otra región llamada “
factor de transferencia de resistencia”
 El determinate r es un conjunto complejo de elementos
genéticos móviles
 PLASMIDOS BACTERIANOS

 El determinante r completo está flanqueado por copias

repetidas inmediatas de IS 1 las que permiten un
reordenamiento significativo, a saber, la disociación del
determinate r y del RTF.
 El propio determinate r puede mudarse sobre otro
plásmido completamente distinto.
 Cualquier tramo de DNA rodeado por elementos IS
funcionales se convierte en un elemento génetico móvil
 más grande que se transpone por medio de los
elementos IS repetidos.
 Los determinates r de muchos plásmidos R pueden
hacer una transposición en masa sobre otro plásmido o
sobre un cromosoma bacteriano.