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Bactericida
Bacteriolítico
Curva de muerte
• El número de microorganismos
• El tiempo de exposición
• La concentración del agente de control
• El tipo de microorganismos
• El estado físico de el microorganismo
• Condiciones ambientales locales
• La temperatura
Efecto de la concentración del agente de
control
Tiempo (minutos)
Efecto de diferentes concentraciones de fenol
sobre una población de E.coli
ESTERILIZACION POR CALOR
Desinfección por UV
http://www.cepis.ops-oms.org/eswww/fulltext/aguabas/ultravio/ultravio.html
Condiciones Ambientales
Tiempo
• Calor
• Agentes químicos
• Radiaciones
• Filtración
CALOR
• Esterilización por calor húmedo:
– Sobrepresión
– Tindalización
• Esterilización por calor seco:
– Horno
– Incineración
Autoclave
• La esterilización comienza cuando se ha alcanzado la
temperatura óptima en el interior del aparato (autoclave o
estufa)
• Según el contenido, un autoclave puede requerir tiempos
más largos para alcanzar la temperatura de esterilización.
No se deben esterilizar en el autoclave:
Tipos de pasteurización:
- BAJA: 62 - 68ºC 30 minutos
Proceso discontinuo, volúmenes pequeños, envasados.
Incineración
• La destrucción de los microorganismos por combustión o
cremación.
• En los laboratorios, las ansas de siembra se calientan a la llama
de mecheros Bunsen.
• La incineración también se utiliza en la eliminación de residuos
hospitalarios.
Radiaciones
• Radiaciones ionizantes
– Rayos gamma
– Rayos catódicos
• Radiaciones no ionizantes
– Luz ultravioleta
Rayos gamma
Rayos catódicos
• Radiación con haz de electrones
• Se usan para esterilizar material quirúrgico, medicamentos y otros
materiales.
• Ventaja: el material se puede esterilizar después de empacado (ya
que éstas radiaciones penetran las envolturas) y a la temperatura
ambiente.
Dosis de radiación absorbida: 1rad = 100erg/g
100 rad = 1Gray (Gy)
Los filtros H.E.P.A (High efficiency Particulate Air) son filtros descartables de medio
filtrante seco y extendido.
Eficiencia mínima de 99,97 %: (penetración máxima del 0,03 %) en aerosoles de
0,3 micrones generados térmicamente (Norma MILSTD-282).
Los filtros U.L.P.A. (Ultra Low Penetration Air) son filtros con características
similares a los filtros H.E.P.A.
Eficiencia mínima de 99,999 % (penetración máxima inferior al 0,001 %) para
partículas de un tamaño entre 0,1 y 0,2 micrones.
2.2. Curva de crecimiento: fases de la curva. Métodos de medida del crecimiento bacteriano, medida del
incremento de masa y número. Crecimiento exponencial, aritmético y diauxico. Crecimiento continuo, turbidostato y
quimiostato. Crecimiento sincronizado. Influencia de parámetros extrínsecos e intrínsecos sobre cada etapa del
crecimiento bacteriano, mecanismo molecular de cada uno (pH y ácidos, temperatura, concentración de sustrato,
actividad acuosa, concentración de oxígeno, presión, radiaciones), Clasificación de microorganismos sobre la base
de los requerimientos de factores intrínsecos y extrínsecos.
2.3 Metabolismo microbiano: Conversión de energía: conversión de la glucosa en piruvato, glicólisis, vía de las
pentosas, vía de Entner-Doudoroff. Ciclo de los ácidos tricarboxílicos. Fosforilación oxidativa. Fermentación y
fosforilación a nivel de sustrato. Respiración anaeróbia. Catabolismo de glúcidos, lípidos y aminoácidos.
Fotosíntesis. Utilización de energía y biosíntesis: fijación fotosintética de carbono, fijación de nitrógeno, azufre y
fósforo. Biosíntesis de aminoácidos, bases nitrogenadas, vitaminas, lípidos y peptidoglicano. Síntesis de ácidos
nucleicos y proteínas: replicación, transducción y traducción. Regulación de transcripción, traducción y actividad
enzimática. Control del ciclo celular.
2.3.
Trabajos experimentales y seminarios:
- Preparación y esterilización de medios de cultivo. Siembras.
- Curva de crecimiento bacteriano por turbidez a distintas temperaturas y en diferentes medios. Recuento de
bacterias viables (recuento de colonias y NMP).
- Métodos de preservación de cepas (congelación y liofilización).
NUTRICIÓN MICROBIANA
microorganismo
Agua 80-90%
Hidrógeno, 8%
Peso seco 10% Oxígeno, 20%
K Na Mg Ca Fe *** Mn Co Cu Mo Zn 5%
Requerimientos de Carbono Energía Categoría
Luz
Fotoautótrofo
CO2
Quimioautótrofo
Compuestos inorgánicos
H2, H2S, Fe++, NH4+ …
Quimioheterótrofo
Compuesto orgánico
Compuesto
orgánico C
Luz Fotoheterótrofo
NO3- NH4+, N2
Requerimientos de N, S y P
SO4-2 Cys, Met
PO4-3
Requerimientos de K, Mg, Ca - Na
Medios de enriquecimiento:
son medios líquidos que favorecen el crecimiento de un tipo de microorganismo en
particular, permitiendo aumentar su número.
Usualmente contienen una o más sustancias inhibidoras del crecimiento de los
microorganismos con excepción de los que se quieren cultivar.
Aerobios estrictos
Anaerobios facultativos