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Metodologia
Análise de células meristemáticas e/ ou geração F1
SEMENTES
Allium cepa
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Metodologia
1. GERMINAÇÃO
- Realizado em placas de Petri
- Placas + papel filtro + água ou químico a ser testado
- 100 sementes / placa (48 a 72 h)
- Mesma condições de luminosidade e temperatura
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Parâmetros avaliados
Toxicidade (morfologia, coloração e crescimento das raízes);
Toxicidade (morfologia, coloração e crescimento das raízes);
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Parâmetros avaliados
Toxicidade (índice de germinação e índice mitótico);
Parâmetros avaliados
Toxicidade (índice de germinação e índice mitótico);
Ex. Tratamento 1
1. 2,5 cm VCMR= 2,5 + 3,0 + 2,0 + 2,5
2. 3,0 cm 4
3. 2,0 cm VCMR = 2,5 cm
4. 2,5 cm
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Metodologia
1. CONFECÇÃO DE LÂMINAS
- Coleta 10 às 14 horas
- Fixação Carnoy (3 etanol : 1 ácido acético)
- Lavagem 3x em água destilada
- Hidrólise HCL 1N
- Coloração Reativo de Schiff
- Lâminas região meristemática e F1
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Metodologia
1. ANÁLISE DAS LÂMINAS
Parâmetros avaliados
Citotoxicidade (Índice mitótico e morte celular)
Parâmetros avaliados
Genotoxicidade (alterações cromossômicas)
- Alterações passíveis de reparo
Efeito Aneugênico
Agente aneugênico
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Parâmetros avaliados
Mutagenicidade (transmitida aos descendentes)
- Alterações que não podem ser reparadas
Efeito Clastogênico
Agente
clastogênico
SISTEMA-TESTE A. CEPA
Análise Estatística
- Testes Estatísticos
- Kruskal- Wallis (p< 0,05)
- Mann- Whitney (p< 0,05)