“UNIVERSIDAD PRIVADAD ANTENOR

ORREGO”

DOC. JOSE GONZALES CABEZA.

ALUMNA.VINCES DIAZ THALIA.
 PRUEBAS DE DIAGNOSTICO VIRAL

1. MICROSCOPIO ELECTRÓNICO: Permite la detección directa de las partículas virales en las muestras obtenidas (p. ej. heces).
2. CULTIVO: permite multiplicar y detectar los virus en la muestra. Los frotis deben transportarse en un medio para cultivos celulares (líquido de Hanks)
o en NaCl al 0,9 %; el líquido de vesículas cutáneas en un tubo capilar cerrado; las muestras de tejidos y otras biopsias en tubos secos; el líquido
cefalorraquídeo y los lavados con el líquido de Hanks; heces, sangre entera tomada con heparina, orina.
3. PRUEBAS SEROLÓGICAS: son el procedimiento más importante para el diagnóstico viral en la práctica clínica. Permiten detectar anticuerpos
específicos IgM e IgG en el suero y confirmar la seroconversión o el aumento de su concentración. Material:
1) Suero (1-2 ml) sin hemolizar: tomado en condiciones estériles y depositado en tubos de cierre hermético. Guardar y transportar la muestra a 5 ±3 °C
hasta 48 h desde su obtención. Si no es posible enviar la muestra lo antes posible a temperatura ambiente (21 ±4 °C). Si la muestra se va a almacenar
durante >48 h congelarla y transportarla evitando la descongelación.
2) Sangre entera (~5 ml): depositar la sangre en un tubo estéril, sin anticoagulante. Transportar la muestra al laboratorio en 2 h desde la extracción.
3) Líquido cefalorraquídeo (~1 ml): extraer en condiciones estériles, depositar en un tubo de cierre hermético. Conservación y transporte como en el
caso del suero. La detección de anticuerpos específicos en el líquido cefalorraquídeo se debe realizar siempre simultáneamente con la determinación de
anticuerpos en el suero.
4. DETECCIÓN DE ANTÍGENOS VIRALES: mediante inmunofluorescencia (IFA), EIA, ELISA, aglutinación látex (LAT), RIA:

1) Frotis o lavados de nasofaringe (para identificar los virus del aparato respiratorio, de sarampión etc.). Obtener con un hisopo
estéril empapado en NaCl al 0,9 % o con líquido de Hanks y depositarlo en un tubo estéril herméticamente cerrado con 1-1,5 ml de
líquido de Hanks evitando que quede seco. Entregar el material al laboratorio inmediatamente después de recogerlo. En caso de virus
respiratorios se pueden usar preparaciones microscópicas fijadas en acetona.

2) Sangre entera: tomar 6-10 ml, depositar en un tubo estéril con anticoagulante y enviar inmediatamente al laboratorio

3) Orina: tomar 10-50 ml, depositar en un frasco estéril y enviar al laboratorio inmediatamente después de recogerla

4) Heces: conservación y transporte: como en caso del cultivo

5) Muestra de tejido: inmediatamente después de la recogida colocarla en un contenedor de cristal estéril, entre piezas de gasa
empapada en NaCl al 0,9 %. Transportar al laboratorio lo antes posible (<3 h desde la obtención), guardar en nevera a 8-12 °C hasta
el transporte.
5. TÉCNICAS MOLECULARES (detectan el genoma del virus o fragmentos específicos). Depositar las muestras en tubos o contenedores estériles de
cierre hermético. Tipo de material:

1) sangre entera (~3 ml): recoger con anticoagulante (lo mejor EDTA; no usar heparina, es un inhibidor inespecífico de PCR). Durante las primeras
24 h del transporte al laboratorio la muestra puede guardarse a una temperatura de 21 ±4 °C. Debe mantenerse a 5 + 3ºC en caso de prolongar su
almacenaje hasta 5 días.
2) Líquido cefalorraquídeo (1-2 ml): transportar la muestra al laboratorio inmediatamente después de tomarla a una temperatura de 5 ±3 °C. Si
no se puede entregar la muestra al laboratorio en 24 h, se debe congelar y transportar evitando la descongelación.
3) Suero (2-3 ml): hay que centrifugar la sangre inmediatamente después de la obtención y enviar el suero al laboratorio lo antes posible (líquido
cefalorraquídeo). Si no se puede entregar inmediatamente proceder como en caso del líquido cefalorraquídeo.
4) Orina (10-20 ml): recoger la orina del primer chorro >2h después de la última micción (mejor por la mañana). Entregar la muestra al
laboratorio lo antes posible (durante las primeras horas se puede transportar a temperatura ambiente; después debe hacerse a 5 ±3 °C y
transportarla lo más rápido posible).
5) Muestras de tejidos (≥0,2 g): depositar en un tubo o contenedor estéril con NaCl al 0,9% estéril; conservación y transporte → orina. Si es
necesaria una conservación más prolongada → líquido cefalorraquídeo.
6) lavado bronco alveolar (1-2 ml de líquido del LBA): conservación y transporte → suero.