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37ºC 5 –
7 % CO2 48 – 72 H en humedad
Filtros de cosecha
25 ul
6H
Liquido centello
Índice de estimulación de 3 o mayor es
generalmente considerado normal
Metodo enzimatico
adenosindeaminasa
• La adenosina deaminasa ADA, reacciona con
adenosina para producir inosina y liberar
amoniaco.
• Los iones amonio que se forman y valoran por el
método de berthelot modificada por Giusti y
Galanti , donde el amoniaco en un medio alcalino
reacciona con el fenol e hipoclorito de sodio
formando azul de indofenol, el catalizador es el
nitroprusiato de sodico. Se lee 630 nm.
Blanco Standar Blanco Blanco Muestra Muestra
reactivo (ml) adenosina Muestra (ml) D (ml)
1: BA – (ml)
2: BR – 3: STD –(ml)4: BMx(ml)– 5: Mx – 6: Mxd
•Buffer 0.5 ----- ----- 0.5 ------ ------
fosfato
BR STD BA BM MX MXd
•Sol. ------ ------- 0.5 ------ 0.5 0.5
Adenosina
•Standard ------ 0.5 ------ ------- ------- -------
BR STD BA BM MX MXd
Tipo de muestra Punto de corte
5 ul 5 ul
std std
alto medio
Anti Ig G
5 ul 5 ul
mx std
probl. bajo
• A punto final: 48h
Alto
Alto Medio
Medio Bajo
Bajo Mues
Mx
mg/dl
mg/dl gr/dl
gr/dl gr/dl
gr/dl mg/dl
tra
IgIgGG 2350
2350 1155
1155 200
200 1050
x
diametro
Diametro 8.7
8.7 6.5
6.5 4.0
4.0 6.2
6.2
mm
(Diametro)2 76 42 16 38
(Diametro)2 76 42 16 38
mm
• A tiempo limitado: 18h
Alto
Alto Medio
Medio Bajo
Bajo MxMx
mg/dl
mg/dl gr/dl
gr/dl gr/dl
gr/dl mg/dl
mg/dl
IgIgGG 2350
2350 1155
1155 200
200 1000
x
Diametro
Diametro 7.8
7.8 6.3
6.3 3.7
3.7 6.0
6.0
mm
mm
• Nefelometría: basado en la dispersión de la luz
que genera al atravesar los complejo
insolubles Ag-Ac y se mide la luz desviada
Blanco Calibrador Calibrador Blanco Muestra
calibrador 1 (ul) 2 (ul) muestra
(ul) (ul)
Calibrador 1/51 20 20 20 ------ -----
Anti
BC Ig G dil. C1 ----- C2500 500 BMX ----- 500MX
C2 BMX MX
BC C1
1: BC – 2: C1 – 3: C2 – 4: BMx – 5: Mx
DISMINUIDO AUMENTADO
Ig G •Agammaglobulinemia •infeccion o inflamacion cronicas
•Leucemia •Hiperinmunizacion
•Mieloma •Mieloma multiple por IgG
Inmunoglobulinas
•preeclampsia Valores normales
•Enfermedad hepatica artritis reumatoidea
Ig M •Agamaglobulinemia •Mononucleosis infecciosa
Ig G
•Leucemia 560 a 1800 mg/dL
•Linfoma
•Mieloma •Macroglobulinemia
•Mieloma
Ig M 45 a 250 mg/dL
•Artritis reumatoidea
Ig A
Ig•Agammaglobulinemia
A 100 a 400 mg/dL
•Infecciones crónicas, que comprometen
•Deficiencia hereditaria de IgA especialmente el tracto gastrointestinal
•Mieloma •Enfermedad intestinal inflamatoria
•Gastroenteropatía por •Mieloma
pérdida de proteínas
Valoracion de la produccion in vitro de
inmglobulinas
• eleccion celulas de mieloma sin capacidad de
sintetizar hipoxantina-guanina-fosforribosil-
transferasa. (HGPRT). Aminopterina anula
posibilidad de sobrevida. hipoxantina La union
de un linf. y una C.M elegida el linf. le dara la
enzima HGPRT y las C.M que no se unieron no
sobreviviran y solo nos queedaran los
hibridoma, y este hibridoma nos daran Ac
monoclonales en el sobrenadante
Proteina A S. aureus---- mitogeno.
• Podemos usar la hemaglutinación si
producimos anticuerpos contra grupos
sanguíneos para serotipificar
• Podemos dar por hecho que es funcional si
comparamos nuestro resultado con otros
otras pruebas stadarizadas como:
• ELISA, Western Blot, IF y/o Citometría de flujo