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VIA ASCENDENTE:
Gram Negativos: Escherichia coli, Proteus, Klebsiella,
Enterobacter, Serratia, Pseudomonas, Acinetobacter, etc.
Gram Positivos: Staphylococcus saprophyticus; Enterococcus,
Corynebacterium urealyticum.
Pacientes cateterizados: infecção polimicrobiana!
AGENTES ETIOLÓGICOS
• Staphylococcus aureus
• Salmonella typhi
• Leptospira spp.
• Mycobacterium tuberculosis
• Candida albicans
Sintomas de ITUs
Avaliação da Piúria
Métodos diretos: sedimentoscopia à fresco
Mais de 10 piócitos por campo de 400X (Sensibilidade – 95%)
Visualização de cilindros leucocitários/ hemácias
(pielonefrite)
Avaliação da Bacteriúria
Métodos diretos:
Métodos indiretos:
Cultura quantitativa (padrão ouro)
Teste da redução do nitrato a nitrito (presença de
enterobactérias)
Falsos negativos: uso de ácido ascórbico.
Cultura Quantitativa
TIPOS DE COLETA:
Amostra de urina de jato médio: mais comum
Falso-negativos:
Uso de antimicrobianos;
Hiper hidratação;
Falso-positivos:
Condições ideais
Tamanho
Cor
Hemólise
Forma da Colônia
Podemos “fabricar” nossos meios?
Semeadura Quantitativa
Principais Provas de Identificação
Bacteriana
Catalase
Coagulase
Oxidase
Indol
PYR
Discos: Bacitracina / Optoquina / Novobiocina
TSA auxiliar à Identificação
Crescimento a 42 e 44°C
Utilização de fontes de carbono/aminoácidos /enzimas
Teste de Motilidade
Meios Comerciais para Provas de
Identificação
Rugai
Reações bioquímicas: fontes de
carbono / aminoácidos / enzimas
Fluxograma: Não Fermentadores
Antibiograma
Fundamentos
Penicilinas;
Cefalosporinas;
Carbapenemicos;
Monobactamicos;
Associação com Inibidores de Betalactamase;
Aminoglicosídeos;
Quinolonas e Fluorquinolonas;
Sulfas;
Polimixinas
Glicopeptídeos;
Outros;
Mecanismos de Resistência
Microbiana.
Bomba de efluxo;
Alteração de permeabilidade de porinas;
Sítio de ligação;
Alteração de via metabólica;
Inativação enzimática;
Característica da Resistência
Constitutiva ou Intrínseca;
Induzível ou Cromossômica;
Adquirida
Padronização
CLSI
Mesclar característica farmacológica x
mecanismo de resistência x padrões
propostos CLSI x realidade do laboratório
Atualizações...
Técnica: Kirby e Bauer
Princípio;
Vantagens do método
Baixo custo;
Flexibilidade;
Estudo de resistência;
Resultados de fácil interpretação clínica;
Não requer utilização de equipamentos
especiais.
Desvantagens do Método
Técnica qualitativa;
Susceptível a erros técnicos e interpretativos;
Técnica trabalhosa;
Conservação de material;
Tempo para liberação do laudo;
Ausência de padronização do método para alguns
microrganismos;
Falta de mecanização ou automação para realização
deste teste;
Método de disco difusão
Cloreto de bário 1%
Ácido sulfúrico 1%
Inóculo
Escolha dos Discos
Gram
Provas bioquímicas preliminares
Suspeita de determinados germes
Normas CLSI
Disposição dos discos
Cepas ATCC
Discos:
Certificação ISO 9001;
registro M.S.;
Rígidos limites de impregnação do
antiibiótico -> erros de interpretação!!!
Embalagem desenvolvida para controle de
umidade e estabilidade;
Para quais germes se aplica o TSA?
Enterobactérias;
Pseudomonas spp.,
Acinetobacter spp.;
Staphylococcus spp.;
Enterococcus spp.;
Streptococcus pneumoniae;
Streptococcus do grupo viridans e beta-hemolítico;
Haemophilus influenzae;
Complexo Burkholderia cepacia;
Stenotrophomonas maltophilia;
Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis.
Principais Resistências
Intrínsecas
Enterobactérias: Carbapenêmicos
E.coli – Klebsiella sp. – Proteus sp: CFO
Pseudomonas sp – Acinetobacter sp: POL
Stenotrophomonas maltophilia : SUT
Não fazer o TSA para:
Staphylococcus saprophyticus:
Ampicilina, Cefalexina, Ciprofloxacin,
Nitrofurantoína, Penicilina e
Sulfametozaxol + Trimetroprim.
Vamos dar um plús!!!
Espécies: Escherichia coli; Klebsiella
pneumonae; Proteus sp.
Como Reportar?
Resistência à cefoxitina;
Não inibida associações de antibióticos
associados aà inibidores de betalactamases.
Como Reportar?
Detecção de Carbapenemases;
Importante: Enterobactérias -> resistente a
maioria dos ATM e halo limítrofe ou
resistente para carbapenemicos -> KPC?
Atenção com BGN oxidase positivo e
assacarolíticos.
E. coli ATCC 25922 - Disco de IMP ou ERT
Metalobetalactamases
AMP
AMC
CFO
CFZ
CRO
SUT
TET
FOS
GEN
CIP
NIT
NOR
TSA: Enterobactérias na urina
(Hospitalar)
IMI ou MER
PPT
CFO
CRO
CAZ
CPM
SUT
TET
AMI
GEN
LEV
CIP
TSA : Staphylococcus sp.
Espécies: Staphylococcus sp.
TSA para Pseudomonas sp.
VAN
AMP
TET
GEN (HLAR) 120
CIP
NOR
NIT
Sistemas Poli Discos: Fácil e
Atualizado
Caracteristicas Importantes dos
Discos no TSA
Clindamicina Lincomicina
Cefazolina CEFENS orais de 1º e 2ºG
NIT / PIP / NAL / Sulfonamidas /
Trimetoprim testar somente em
amostras de urina.
Antibiograma x Identificação
Staphylococcus aureus x Vancomicina;
Enterobactérias x Carbapenemicos;
Pseudomonas aeruginosa x Polimixina B;
Streptococcus pneumonae x Vanco,
Penicilina (MIC), Cefalosporinas de 3° G.
Enterococcus sp. x vanomicina, linezolida,
teicoplamina
Resultados Incompatíveis: Revisão
Imipenem sensível
Sulfazotrim resistente
Perfil TSA Clássico
Material: xxxxxxx
Material: xxxxxxx
Germe isolado: Escherichia coli
Contagem de colônias: quando aplicável
Sensibilidade: Amicacina, Ciprofloxacin...
Resistência: Ceftriaxona, Cefepime...
Observação: Cepa bacteriana sugere
produção de ESBL...
Laudo não convencionais:
contaminação / indeterminados
http://www.anvisa.gov.br/servicosaude/contr
ole/rede_rm/cursos/boas_praticas/modulo5/in
troducao.htm
www.hematosul.com.br
Leitura recomendada: Resistência
Bacteriana – Raquel Rossi
Contato: ricardo@hospsl.com.br