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Reacciones de

Aglutinación pasiva
Aglutinación

 Se basa en la reacción
antígeno- anticuerpo y
consiste en la agrupación de
partículas en suspensión
formando un inmunocomplejo
compuesto de un
aglutinógeno que se
encuentra en la superficie de
la partícula y una aglutinina.
Directa (Activa): El antígeno se
encuentra presente en la
superficie de las células
0.3 μg Ac/mL

Tipos de
aglutinación
Indirecta (Pasiva): El antígeno con el
que interacciona el anticuerpo
específico no forma parte de la
estructura nativa de la partícula, sino
que se incluye artificialmente en su
superficie.
0.006-0.06 μg Ac/mL
Aglutinación Pasiva
 Se mezclan la muestra clínica que alberga al antígeno
con el reactivo que contiene a los anticuerpos
específicos. Al entrar en contacto los anticuerpos
mediante los dos puntos de unión con el antígeno
establecen entramados de muchas moléculas de
antígeno y de anticuerpos. Esta aglutinación de
partículas antigénicas forma grumos. Los anticuerpos
están unidos por el fragmento Fc a partículas inertes de
mayor tamaño, tales como partículas de látex.
 2-10 minutos.
 0.006-0.06 μg
Soportes

 Leucocitos
 Plaquetas
 Eritrocitos
 Partículas de látex
(poliestireno 1-5 μm)
 Partículas de
gelatina

Prueba de embarazo
Es una prueba que mide una hormona en el cuerpo
llamada gonadotropina coriónica humana (GCH),
producida durante el embarazo. Esta hormona
aparece en la sangre y en la orina de las mujeres
embarazadas incluso ya a los 10 días después de la
concepción.
Una prueba de embarazo se lleva a cabo utilizando
sangre u orina. Existen 2 tipos de exámenes:
 Cualitativo, el cual mide si la hormona GCH está
o no presente
 Cuantitativo, el cual mide cuánta hormona GCH
está presente
Inmunoensayo
cromatográfico
 Se basa en una migración capilar de los
reactantes realizada sobre membrana de
nitrocelulosa como soporte sólido, en la
que se encuentran dispuestos los
anticuerpos específicos anti-hCG. De estar
presenta la hormona específica en la
muestra de orina que se analiza, el sistema
nos revela finalmente la reacción con un
color determinado, apreciable a simple
vista en forma de línea en el lugar donde
se depositó el anticuerpo de captura.
Inhibición de la aglutinación
 El principio de este análisis es que, el anticuerpo
incubado previamente con antígenos homólogos
solubles o de reacción cruzada, es «inactivada» cuando
se incuba con eritrocitos recubiertos de antígeno
Alteraciones

Falsos positivos:
 coriocarcinomas
 deficiencia de inmunoglobulina A
 anticuerpos heterófilos
 Enterocistoplastias
 enfermedades trofoblásticas gestacionales (GTD)
 tumores de células germinales
Falsos negativos
 realizar el test demasiado pronto
Inhibición por hapteno
No. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Tubo
Diluci 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:102
ón 4
suero
20 μg - - - - - - - - - -
10 μg - - - - - - - - - -
5 μg + + - - - - - - - -
2.5 μg + + + - - - - - - -
1.25 + + + + - - - - - -
μg
0.62 + + + + + - - - - -
μg
0.31 + + + + + + - - - -
μg
Hapteno: Sulfametazina-ah
Proteína C reactiva
 Producida por el hígado.
 Se envía al torrente sanguíneo en
respuesta a una inflamación o
necrosis tisular
 Proteínas de fase aguda y se
incrementa en suero. Los niveles de
reaccionantes de la fase aguda
responden a las proteínas
inflamatorias denominadas
citocinas.
 Los niveles altos pueden ser signos
de una infección grave o de otro
trastorno.
Fundamento del método
 El método se fundamenta en una reacción de aglutinación de
una suspensión de partículas de látex poliestireno sensibilizadas
con anticuerpos altamente purificados de anti-proteina C-
reactiva. La aglutinación es visible a una concentración de PCR
en suero igual o superior a 6 mg/L
 Ac
La PCR se encuentra comúnmente aumentada en:
 artritis reumatoide activa
 infecciones virales
 tuberculosis
 fiebre reumática activa
Factor Reumatoide
 El factor reumatoide (FR) es un autoanticuerpo, una
inmunoglobulina de tipo IgM producida por el
sistema inmune del organismo contra la porción Fc
de la inmunoglobulina G (Ig G)
 El FR proporciona información al diagnóstico de una
artritis reumatoide (AR).
 Puede también detectarse FR en individuos con
otros trastornos, como enfermedades autoinmunes
(por ejemplo el síndrome de Sjögren, LES), así como
en infecciones duraderas o persistentes de tipo
bacteriano, vírico o parasitarias, y en algunos
cánceres.
Fundamento

 El Reactivo látex-FR posee


inmunoglobulinas IgG humanas,
absorbidas sobre las partículas de
látex. Mezclando de forma directa la
muestra con el Reactivo látex-FR, la
presencia de Factores Reumatoides
(con capacidad anti IgG) provocan
la aglutinación de las partículas de
látex.
 Ag
Objetivo

 Realizar ejercicios de aglutinación pasiva en tubo (semi-


cuantitativa) y en placa (cualitativa), utilizando
eritrocitos y partículas de látex como soportes.
Diagnóstico precoz de embarazo

0.25 0.25 mL
0.25 mL
mL suero
suero T
T M M control
T M anti-
GCH

Gota de
Observar Incubar eritrocitos
resultados TA T M sensibilizados
2 hrs. Homogenizar
Resultados

A B C D

B C

A GCH y α-GCH
B Orina +
C Orina problema
D Solución Salina
Proteína C Reactiva y Factor
Reumatoide
Gota de
suero Control positivo y
problema control negativo

Observar Gota de reactivo


gamma globulina /
anti-PCR
Resultados PCR

4/ 14
28% (+)
Resultados FR
2/14
14% (+)
Bibliografía
 Kindt, Goldsby, Osborne, “Inmunología de Kuby”, Ed Mc Graw Hill, 6ta edición, 2007, págs. 153-
154
 Peakman, Vergani, “Inmunología básica y Clínica”, Ed. Elsevier, 2da edición, 2011, págs. 176-
182
 Roitt, “Inmunología. Fundamentos”, Ed. Médica Panamericana, 10ma edición, págs. 124-130
 Prats Guillem, “Microbiología Clínica”, Ed. Médica Panamericana,1era edición, 2005, pág 160
 Siachoque Heber Orlando, “Inmunología. Diagnóstico e interpretación de pruebas de
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 http://www.fcv.unl.edu.ar/archivos/grado/catedras/inmunologia/material/Clases_Inmunologia
_Basica/ClaseIX.pdf
 https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicrobiologia/seimc
-procedimientomicrobiologia19.pdf
 http://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2004/gms043p.pdf
 http://www.revistasbolivianas.org.bo/scielo.php?pid=S2304-
37682014000500004&script=sci_arttext
 http://www.centis.cu/documentos/especificacion/car230.pdf