CURSO DE PROFUNDIZACIÓN EN

SANEAMIENTO BÁSICO, ÉNFASIS EN

ANÁLISIS DE AGUAS RESIDUALES

MÓDULO 3.
MÉTODOS ANALÍTICOS PARA
LA CARACTERIZACIÓN DE
AGUAS RESIDUALES
Martha Trinidad Arias Peñaranda
Ing. Química, MSc. Ing Química, Doctora en Biotecnología
marthatrinidadap@ufps.edu.co
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
 INTRODUCCIÓN

Leaving no one behind

 INTRODUCCIÓN

CONTAMINACIÓN
DEL AGUA
 INTRODUCCIÓN

TIPOS
Tipos de
DE contaminación
CONTAMINACIÓN
 INTRODUCCIÓN
ORIGEN DE LA CONTAMINACIÓN DEL AGUA
 INTRODUCCIÓN

PARAMETROS INDICADORES DE CONTAMINACIÓN

 INTRODUCCIÓN

CONTAMINANTES ORGÁNCOS
INTRODUCCIÓN

METALES PESADOS
 INTRODUCCIÓN
MERCURIO

HIERRO
 INTRODUCCIÓN

PLOMO
 INTRODUCCIÓN

CADMIO
INTRODUCCIÓN
 INTRODUCCIÓN

NITRÓGENO
Es un indicador relevante en los estudios medioambientales, debido a
la importancia que este tiene en los procesos de tratamiento, en el
control de la calidad de las aguas y de las descargas de las aguas
residuales al medio.
• Necesario para el crecimiento de los microorganismos, si no hay
suficiente pueden ocurrir problemas por deficiencia durante el
tratamiento secundario

• Principal contribuyente para el agotamiento del oxígeno y la

eutrofización.
 INTRODUCCIÓN

En las aguas residuales se encuentran diferentes

especies nitrogenadas, como son: nitrógeno
orgánico y amoniacal, nitritos, nitratos.

Nitrógeno orgánico : Nitrógeno químicamente

ligado en moléculas orgánicas tal como proteínas,
aminas y aminoácidos y ácidos nucleicos en
diversos estados de degradación, urea, aminas,
etc.)
 INTRODUCCIÓN

Si la aguas residuales son frescas, el nitrógeno se encuentra en

forma de UREA y compuestos proteicos, pasando posteriormente
a forma amoniacal por descomposición bacteriana.
INTRODUCCIÓN
 INTRODUCCIÓN
NH3, NH4+
Es el producto natural de descomposición de los compuestos orgánicos
nitrogenados. En el agua puede aparecer en forma molecular o como
ion amonio, dependiendo del pH.

El AR doméstica suele
contener de 20 – 50 mg/l
de nitrógeno total y
12 – 40 mg/l de amonio.

Las aguas superficiales no deben contener normalmente amoniaco. La

presencia de amoniaco libre o ion amonio se considera como una
prueba de contaminación reciente y peligrosa. Si el medio es aerobio,
el nitrógeno amoniacal se transforma en nitritos y nitratos.
 INTRODUCCIÓN

NO3- Personas con problemas gástricos o en

niños de menos de tres meses, el nitrato
puede reducirse a nitrito, el cual se
absorbe en los glóbulos rojos de la sangre,
oxidando el hierro de la hemoglobina a
metahemoglobina, disminuyendo la
capacidad de los glóbulos rojos para
transportar oxígeno. Asimismo, algún tipo
de cáncer del tracto gastrointestinal ha
sido atribuido a la acción de compuestos
nitrosos, formados en el interior del
organismo a partir de los nitritos

El predominio de la forma de nitrato es un fiel indicador de que el

residuo se ha estabilizado con respecto a la demanda de oxigeno.
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
 INTRODUCCIÓN
Contaminantes
orgánicos volátiles
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
INTRODUCCIÓN
 INTRODUCCIÓN

• Indicadores de contaminación física:

SST , ST , SS y pH.

• Indicadores de contaminación orgánica:

OD, DQO, DBO5, CT , Fosfatos, Detergentes.

• Indicadores de contaminación Inorgánica:

•Conductividad, Nitratos, Calcio, Magnesio, Sodio, Cloruros,
Sulfatos.

• Indicadores de contaminación tóxica:

Cd, Cr(VI), Hg, Cu, Pb, Zn, CN-, Fenoles.
 INTRODUCCIÓN

CALIDAD DE AGUAS

Para su vertido
Tratamiento de depuración,
potabilización o cualquier otro uso

Determinar una serie de parámetros fisico-químicos mediante

métodos normalizados, con objeto de conocer si el valor de
estos parámetros se encuentra dentro del intervalo que marca
la legislación vigente.
MÉTODOS ANALÍTICOS
 PRESABERES
Exactitud:
Analito: Precisión:
Magnitud: Repetibilidad:
Mensurando: Reproducibilidad:
Muestra: Disolución patrón o estándar:
Muestreo: Curva de calibración:
Alícuota: Linealidad:
Matriz de la muestra: Intervalo de linealidad:
Análisis: Proceso analítico:
Datos: Técnica analítica:
Interferencia: Método analítico:
Interferente: Procedimiento analítico:
Enmascaramiento: Protocolo analítico:
Medición: ANALISIS GRAVIMÉTRICO
ANALISIS VOLUMÉTRICO
 TÉRMINOS BÁSICOS EN
QUÍMICA ANALÍTICA
Analito: especie química o componente que se determinan en una muestra.
Magnitud: propiedad de un fenómeno, cuerpo o sustancia, que puede expresarse
cuantitativamente mediante un número y una referencia.
Mensurando: Magnitud particular sometida a medición.
Muestra: parte representativa de la materia objeto de análisis
Muestreo: Es el procedimiento empleado para obtener una o más muestras de una
población.
Alícuota: porción o fracción de la muestra que ha sido tomada de un todo con un error
despreciable.
Matriz de la muestra: conjunto de todas aquellas especies químicas que acompañan al
analito en la muestra.
Análisis: estudio de una muestra para determinar sus composición o naturaleza química.
Datos: Es el producto de las observaciones efectuadas en las personas, y objetos en los
cuales se produce el fenómeno que queremos estudiar.
Interferencia: error sistemático en el análisis causado por la presencia de sustancias
interferentes en la muestra.
Interferente: especies químicas distinta del analito que altera la respuesta del analito,
pudiendo disminuir dicha respuesta (interferencia negativa) o incrementarla (interferencia
positiva).
 TÉRMINOS BÁSICOS EN
QUÍMICA ANALÍTICA
Exactitud: grado de concordancia entre el valor medido y el verdadero.
Precisión: Indica el grado de concordancia de varias medidas
individuales, se expresa como receptibilidad o reproducibilidad.
Repetibilidad: proximidad de concordancia entre los resultados de
mediciones sucesivas del mismo mensurando realizadas con el mismo
procedimiento de medición, el mismo
observador, el mismo instrumento de medición, utilizado bajo las
mismas condiciones, el
mismo lugar, repetición en un período corto de tiempo.
Reproducibilidad: proximidad de concordancia entre los resultados de
mediciones sucesivas del mismo mensurando bajo condiciones de
medición que cambian.
Medición: proceso que consiste en obtener experimentalmente uno o
varios valores que pueden atribuirse razonablemente a una magnitud
 TÉRMINOS BÁSICOS EN
QUÍMICA ANALÍTICA
Enmascaramiento: es una vía comúnmente empleada para eliminar
interferencias, mediante la cual la especie interferente es
transformada en otra especie química que no altera la respuesta del
analito.
Disolución patrón o estándar: disolución de concentración
exactamente conocida.
Curva de calibración: gráfica que representa la respuesta analítica
en función de la concentración del analito.
Linealidad: capacidad del método para establecer una relación
directamente (o matemáticamente) proporcional entre el resultado
y la concentración del analito en la muestra.
Intervalo de linealidad: Es el intervalo de concentración entre los
niveles de analito extremos (mayor y menor) que puede utilizarse
con precisión, exactitud y linealidad).
 TÉRMINOS BÁSICOS EN
QUÍMICA ANALÍTICA
Proceso analítico: Conjunto de operaciones analíticas que están
intercaladas entre la muestra y el resultado
Técnica analítica: Principio científico adaptado a uno o varios
instrumentos, que nos es útil o necesario para obtener información
sobre la composición de la muestra. (fluorimetría, potenciometría
etc.)
Método analítico: adaptación variada de una técnica, para llevar a
cabo una medida determinada. (pueden existir varios métodos
analíticos distintos para determinar el mismo analito mediante la
misma técnica).
Procedimiento analítico: Instrucciones escritas para aplicar un
método
Protocolo analítico: descripción más específica de un método.
Deben seguirse – sin excepción - las directrices detalladas, si es que
los resultados analíticos deben ser aceptados para un propósito
particular.
 MÉTODOS ANALÍTICOS

Análisis Gravimétrico

Conjunto de técnicas de análisis en las que se mide la masa de un producto para determinar
la masa de un analito presente en una muestra. Se cuentan entre los métodos más exactos de
la Química Analítica Cuantitativa.

Requiere fundamentalmente dos medidas experimentales:

 Peso o volumen de la muestra a analizar.

 Peso de un sólido seco que o bien es el propio analito o una sustancia de composición
química conocida que contenga el analito
MÉTODOS ANALÍTICOS
 MÉTODOS ANALÍTICOS

Métodos gravimétricos por extracción

Separación del analito del resto de los componentes de la
muestra mediante un proceso de extracción (sólido-líquido)

• Solventes orgánicos que Obtención del

solubilicen el compuesto
objeto de estudio
• Solución ácida, básica, o
neutra que separe
compuestos interferentes.
analito.
Una vez conseguida la
separación cuantitativa se
elimina el disolvente y se
pesa el producto buscado.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Gravimetrías por Volatilización

conlleva separar los componentes de nuestra mezcla por medio de calor o de

descomposición química. Esto hace que se separe cualquier compuesto
volátil, lo que resulta en un cambio de masa que podemos medir.

Método directo Método indirecto

El producto volátil se recoge sobre un Se calcula la masa del producto
sorbente y se pesa volatilizado por diferencia

Volatilización de NH3 amoniaco en la etapa de destilación Determinación de la humedad o la pérdida

del método Kjeldahl para la determinación de nitrógeno.
Determinación del carbono e hidrógeno de los
compuestos orgánicos, por absorción, del dióxido de
carbono y del agua formados en la combustión.
por calcinación de una muestra de caliza.
El componente buscado quede en el residuo,
como sucede en la determinación de sólidos no
volátiles en el agua por evaporación de la
misma y pesada del residuo.

Su principal dificultad es la falta de selectividad, pues, frecuentemente, junto con el constituyente

de interés se pueden volatilizar total o parcialmente otros componentes de la muestra.
 MÉTODOS ANALÍTICOS

Análisis Volumétrico

Método cuantitativo, que consiste en la determinación exacta de

la cantidad de sustancia de un analito contenido en una muestra
problema, a partir de la medida precisa del volumen gastado de
una disolución patrón (de concentración perfectamente conocida)
que reacciona estequiometricamente con el analito a estudiar.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Para llevar a cabo una valoración se añade un volumen, medido con gran exactitud, de una
disolución cuya concentración se conoce (reactivo valorante), de modo que se produzca una
reacción cuantitativa con el analito que se ajuste exactamente a una ecuación definida.
Disolución estándar
o valorante

Se añade al analito en disolución para

producir cambios físicos observables (ponen
en evidencia el punto final) cuando se llega al
punto de equivalencia o cerca de él.
analito
Indicador
aparición o desaparición de un
color, cambios de color, y la
aparición o desaparición de
turbidez
 MÉTODOS ANALÍTICOS
El valorante reacciona de forma
cuantitativa y completa con el analito
Analito + Reactivo Producto
A R AR

Agregamos disolución estándar de reactivo

a la muestra problema
¿Hasta cuando?

Hasta que la reacción se haya completado

El volumen del valorante, nos permite determinar la

cantidad de analito en la muestra problema.
 MÉTODOS ANALÍTICOS

TALLER
Standard Methods
For the Examination of Water and Wastewater

MÉTODO Y CONDICIONES DE MUESTREO

• GRASAS Y ACEITES ,
• ACIDEZ, ALCALINIDAD, DUREZA Y NITRÓGENO
• COLOR, SAAM, FÓSFORO
• METALES
• INDIVIDUAL ORGANIC COMPOUNDS
 MÉTODOS ANALÍTICOS
«cualquier material recuperado como
Aceite y grasa una sustancia soluble en el solvente»

Compuestos orgánicos constituidos principalmente por ácidos grasos de

origen animal y vegetal, así como de hidrocarburos del petróleo.

En la determinación de grasas y aceites no se mide una sustancia

específica sino un grupo de sustancias con unas mismas características
fisicoquímicas (solubilidad). Incluye ácidos grasos, jabones, grasas,
ceras, hidrocarburos, aceites y cualquier otra sustancia susceptible de
ser extraída con hexano.

Indicativa del grado de contaminación del agua por usos industriales y

humanos.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

Solventes
La 12ª prescribió el uso del éter de petróleo como solvente para aguas naturales
y tratadas y n hexano para aguas contaminadas.

La 13ª agregó triclorotrifluoroetano como un disolvente opcional para todos los

tipos de muestras.

14ª a 17ª , solo se especificó el triclorotrifluoroetano. Sin embargo, debido a los

problemas ambientales asociados con los clorofluorocarbonos, se incluyó un
solvente alternativo (80% n-hexano y 20% de metil-terc-butil éter) para los
métodos gravimétricos en la 19ª edición.

20ª el triclorotrifluoroetano se ha eliminado de todos los procedimientos

gravimétricos y reemplazado por n-hexano.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

Importancia de la medición
El conocimiento de la cantidad de aceite y grasa presente es útil
para el diseño y funcionamiento adecuados de los sistemas de
tratamiento de aguas residuales y también puede llamar la
atención sobre ciertas dificultades de tratamiento.

En cantidades excesivas, pueden interferir con los procesos

biológicos aeróbicos y anaeróbicos y reducir la eficacia del
tratamiento de aguas residuales.

Cuando se descargan en aguas residuales o efluentes tratados,

pueden causar películas superficiales y depósitos en las orillas que
conducen a la degradación ambiental (falta de oxigeno, luz…).
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

Selección de método
• Partición gravimétrica : grasa disuelta o emulsionada previamente
acidificada se extrae por contacto intimo con Methyl-tert-butyl
ether (MTBE) y n-hexane.

• Partición infrarrojo : diseñado para muestras con hidrocarburos

volátiles que de otra manera se perderían en las operaciones de
remoción de solventes del procedimiento gravimétrico y para
niveles bajos de aceite y grasa (<10 mg / L).

• Soxhlet (D). cuando hay fracciones de petróleo pesadas y

relativamente polares, o cuando los niveles de grasas no volátiles
pueden desafiar el límite de solubilidad del disolvente.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN

Este método permite una estimación del contenido de

grasas y aceites en aguas naturales, residuales y
residuales tratadas al determinar gravimétricamente las
sustancias que son extraídas con hexano de una
muestra acuosa acidificada.

No es aplicable a la medición de fracciones de bajo

punto de ebullición que Se volatiliza a temperaturas
inferiores a 85 ° C.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
PRINCIPIO

Los jabones metálicos solubles se hidrolizan por

acidificación, cualquier aceite y grasa sólida o viscosa
presente se adsorben en tierra de diatomeas, los cuales
son extraídos en un Soxhlet empleando hexano como
disolvente. Una vez terminada la extracción se evapora el
hexano y se pesa el residuo que ha quedado en el
recipiente; siendo este valor el contenido de grasas y
aceites

.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
Muestreo, conservación y almacenamiento de muestras

Recipiente: botella de vidrio de boca ancha que se haya lavado con

jabón, se haya enjuagado con agua y finalmente se haya enjuagado con
disolvente para eliminar cualquier residuo que pueda interferir con el
análisis.

Como alternativa al enjuague con solvente, tape la botella con papel

de aluminio y hornee a 200 a 250 ° C durante al menos 1 h. Use tapas
con recubrimiento de PTFE , poliamida, PVC polietileno o metálica para
botellas de muestra; limpie las tapas como se indica arriba, pero limite
la temperatura a 110 a 200 ° C.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
Muestreo, conservación y almacenamiento de muestras

Muestreo: muestras de aprox 1 L. Si se espera que la [ ] sea > 1000 mg de

material extraíble/L, recolecte volúmenes proporcionalmente más pequeños.

Recoja una muestra separada para la determinación de aceite y grasa.

No llene en exceso el recipiente de la muestra y no subdivida la muestra en el
laboratorio.

En caso de existir la presencia de aceites emulsionados en el agua a muestrear,

hacerlo 20 a 30 cm de profundidad, cuando no haya mucha turbulencia para
asegurar una mayor representatividad.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

Muestreo, conservación y almacenamiento de muestras

• Preservar por acidificación con ácido clorhídrico 1:1 o ácido sulfúrico 1:1 a
pH 2 o menor y refrigerar a 4°C.

• El tiempo máximo de almacenamiento previo al análisis es de 28 días.

• En el laboratorio, marque la botella de muestra en el menisco o pese la

botella para determinar el volumen posteriormente.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

REACTIVOS
- Agua características: a 25ºC
a) Resistividad, min 0,2 megohm-cm;
b) Conductividad, max 5,0 μS/cm
c) pH: 5,0 a 8,0.
- Hexano (C6H14);
- Suspensión de tierra de diatomeas-sílice o tierra Sílice de aprox 10 g/L de
agua
- Ácido Clorhídrico (1:1):
- Acido Súlfurico (1:1):
- Aceite de referencia: (mezcla de mineral SAE20 y vegetal mixto) pesar acorde
a la cantidad esperada de grasas y aceites en la muestra y agregar la mezcla a
1 L de agua.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

MATERIALES
- Cartuchos de extracción de celulosa para Soxhlet
- Papel filtro con tamaño de poro fino;
- Embudo Büchner
- Discos de muselina
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

EQUIPO
- Equipo de extracción Soxhlet;
- Bomba de vacío
- Estufa eléctrica 103°C;
- Balanza analítica 0,1 mg
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

Procedimiento
Si la muestra no se ha acidificado previamente, hágalo
Tarar los matraces de extracción introduciéndolos a la estufa a una T de 103°C -
105°C, enfriar en desecador y pesarlos, repetir el procedimiento hasta obtener el peso
constante de cada uno de los matraces.
Preparar el material filtrante : coloque un disco de tela de muselina superpuesta con
papel de filtro en el embudo Büchner sobre un matraz Kitazato , humedezca el papel y
la muselina y presione hacia abajo los bordes del papel. Usando el vacío, pase 100 ml
de suspensión de tierra de diatomeas-sílice y lave con 100 ml de agua destilada.
Aplicar vacío hasta que no pase más agua el filtro.
Filtración de la muestra: Transferir el total de la muestra acidificada al embudo
Büchner preparado aplicando vacío hasta que cese el paso de agua. Medir el volumen
de la muestra.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

Procedimiento
Con ayuda de unas pinzas, transferir el material filtrante a un cartucho de extracción. Limpiar
las paredes internas del embudo y el frasco contenedor de la muestra, así como la parte
interna de la tapa del frasco con trozos de papel filtro previamente impregnados de
disolvente (hexano) tener cuidado en remover la película de grasa y los sólidos impregnados
sobre las paredes; colocar los trozos de papel en el mismo cartucho. Limpie el cristal del reloj
con un papel de filtro empapado en disolvente de extracción y colóquelo en dedal de
extracción.

Secar el cartucho en una estufa a 103°C - 105°C por 30 min. Transcurrido este período
colocar en el equipo Soxhlet.

Adicionar 100 ml de hexano al matraz de extracción previamente tarado y preparar el equipo

Soxhlet. Evitar tocar con las manos el cartucho y el matraz de extracción, para ello utilizar
pinzas ó guantes de látex.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
Procedimiento
Colocar a calentar el equipo de extracción , controlar la
temperatura del reflujo y extraer a una velocidad de 20
ciclos/hora durante un período de 4 h.

Una vez terminada la extracción retirar el matraz del

equipo Soxhlet, y evaporar el disolvente.

El matraz de extracción libre de disolvente se coloca en el

desecador hasta que alcance la temperatura ambiente.

Pesar el matraz de extracción y determinar la

concentración de grasas y aceites recuperables.

Analizar un blanco de reactivo bajo las mismas condiciones

de la muestra.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
Interferencias
Los disolventes orgánicos tienen la capacidad de disolver no solo el aceite y la
grasa, sino también otras sustancias orgánicas. Cualquier sustancia soluble en
solvente filtrable (por ejemplo, azufre elemental, compuestos aromáticos
complejos, derivados hidrocarbonados de cloro, azufre y nitrógeno, y ciertos
colorantes orgánicos).

Los que se extraen y recuperan se definen como aceite y grasa. Ningún solvente
conocido disolverá selectivamente solo aceite y grasa. Los residuos de petróleo
más pesados ​pueden contener una porción significativa de materiales que no son
extraíbles con solventes.

El método es totalmente empírico; resultados duplicados con un alto grado de

precisión solo puede obtenerse mediante el estricto cumplimiento de todos los
detalles.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa
5520 D. Soxhlet Extraction Method
Interferencias
La eliminación del solvente produce la pérdida de hidrocarburos de cadena corta y
aromáticos simples por volatilización. En este proceso se pierden porciones
significativas de destilados de petróleo desde la gasolina hasta el fuel oil.

Para estandarizar la pérdida gradual de peso debido a la volatilización, cumplir

estrictamente con el tiempo de secado de la muestra.

Durante el enfriamiento del matraz de destilación y el material extraído, se puede

observar un aumento gradual del peso, probablemente debido a la absorción de
agua si no se usa un desecador.

Use exactamente la velocidad y el tiempo de extracción especificados en el aparato

Soxhlet debido a las diferentes solubilidades de diferentes grasas.
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

CÁLCULOS

donde:

A es el peso final del matraz de extracción (mg)

B es el peso inicial del matraz de extracción (mg)
 MÉTODOS ANALÍTICOS
Aceite y grasa

5520 D. Soxhlet Extraction Method

CÁLCULOS

donde:

A es el peso final del matraz de extracción (mg)

B es el peso inicial del matraz de extracción (mg)