Su cultivo está enfocado como alimento vivo

para estadios iniciales de vibalvos, peces y

crustáceos.
Tenemos a Dinoflagelados y Diatomeas como
base de la cadena trófica marina.
 Se sabe que 1 millón de larvas de vibalvos puede
consumir 1 400 l de algas cultivadas en altas
densidades.

Aislado con Aireación

luz y T. con CO2
controlado enriquecido
Mantenimiento de cepas e inóculos
Cultivo patrón como base de cultivo. Erdschreiber, o si
no en medio F/2, o en portaobjetos o placas de agar
inclinadas y enriquecidas con nutrientes son sistemas
de almacenamiento.
Son usados para generar líneas de inóculos cuidando
de no contaminar, se almacena en frascos
transparentes y se estirilizan en autoclave.
Las cepas se almacenan a temperatura de 4 a 12 °C
con iluminación de 2 lámparas de 8 vatios generando
una intensidad lumínica de 450 lux.
Procedimiento para el manejo de cepas
Es necesario replicar las cepas para mantenerlas en
buen estado. Se obtiene un inóculo de 20 a 50 ml en
un matraz inocuo.
El nuevo matraz se rotula con el nombre de la especie
y la fecha y se coloca a la incubadora.
El procedimiento de trasferencia de cepas se
desarrolla mejor si se realiza en un armario esterilizado
con luz UV para así reducir todavía más el riesgo de
contaminación.
Medio de cultivo F/2 de Guillard utilizado para el cultivo de algas en criaderos
de bivalvos (1975)
Disuelva en 900 ml de H2O destilada, añada 1 ml de cada una
de las siguientes soluciones de metales traza:
CuSO4.5H2O 0,98 g por 100 ml
ZnSO4.7H2O 2,20 g por 100 ml
CoCl2.6H2O 1,00 g por 100 ml
MnCl2.4H2O 18,00 g por 100 ml
Na2MoO4.2H2O 0,63 g por 100 ml
Prepare 1 l con H2O destilada (pH ca. 2,0), añada 1 ml por litro
FSW de las soluciones anteriores (#1-4).
Vitaminas
Biotina 1,0 mg
B12 1,0 mg
Tiamina HCl 20,0 mg
Disuelva en 1 l de H2O destilada y congele.
Añada 1/2 ml de solución de vitaminas por cada 1 l de agua
de mar.
 Manejo de cultivo de inocuos
Se cultivan en matraces de ebullición de 500 ml en 250 ml
de medio de cultivo. Se cultivan de 18 a 22 °C y a una
distancia de 15 - 20 cm de las lámparas fluorescentes de 65
ó 80 W, proporcionando un nivel de iluminación de la
superficie de cultivo de 4 750 a 5 250 lux. Los cultivos de
inóculos suelen airearse con una mezcla de aire ó dióxido
de carbono (CO2).
En diatomeas toma de 3 a 5 días y en algas flageladas
toma de 7 a 14 días.
Cultivo a escala intermedia
Son sistemas de cultivo de tipo semicontinuos en
botellas de 25 l, con cosechas parciales evitando llegar
a la etapa donde la alta densidad no permite el ingreso
de luz al centro.
Ejemplo: Tetraselmis suecica, los cultivos duran 3 meses
o más con cosechas de 25 a 50% del volumen de
cultivo 3 veces por semana.
Fases de cultivo
Fase de inducción

• Se da la aclimatación celular.

Fase de crecimiento
exponencial

• Se acelera la división celular..

Fase estacionaria

• El crecimiento se estabiliza debido al

limitado ingreso de luz.
Funcionamiento de cultivo a escala intermedia
Se realizan en matraces de 2 a 25 litros llenados con
medio de cultivo, se inocula con la especie a cultivar y
se airea con CO2 al 2%, obteniendo un pH de 7.5 a 8.2.
La mezcla de CO2 se filtra a 0.2 µm, mientras que la
luminosidad está en el rango de 1 500 a 2 500 lux con
crecimiento óptimo en 18 a 22 °C.
Opciones para tratar el agua de cultivo:
a) filtrar el agua de mar para eliminar las bacterias utilizando filtros
de cartuchos de membrana de 0,22 ó 0,45 µm,
b) pasteurizar por tandas o de forma continua de 65 a 75 °C,
c) esterilizar en autoclave a 1,06 kg por cm2 durante 20 minutos
(después de pasar el medio por la autoclave, debe reposar 2 días
en un contenedor hermético apropiado),
d) esterilizar químicamente empleando una solución de hipoclorito
de sodio a 25 mg por l cloro libre (añadiendo 0,5 ml de lejía común
- 5% hipoclorito de sodio - por l de agua de mar filtrada). Antes de
emplearse, se neutraliza el cloro libre residual añadiendo un
exceso de solución de tiosulfato sodico (50,0 mg por l) preparada
en agua destilada.
Estimación de la densidad de algas
Existen varios métodos para calcular la densidad de
algas incluyendo el empleo de espectrofotómetros,
fluorómetros, hemocitómetros, y contadores tipo
Coulter.
Es portaobjetos de 1,0 x 1,0 mm con
profundidad de 0,1 mm y volumen total
de cada cámara de 0,1 mm3. Cada
cámara se marca con una cuadrícula.
En especies móviles de algas, es
recomendable añadir 1 ó 2 gotas de
formalina al 10% a una muestra de 10 a
20 ml del cultivo antes de iniciar el
recuento.
La densidad celular se calcula de la manera
siguiente: se subdivide la cuadrícula central de
cada cámara en 25 cuadrados, cada uno de 0,2
x 0,2 mm. Cada cuadrado se vuelve a subdividir
en 16 cuadrados más pequeños de 0,05 x 0,05
mm. Se cuenta el número de células en 10
cuadrados de 0,2 x 0,2 mm elegidos al azar y se
calcula la media o el promedio. Esto nos
proporciona el número medio de células de
algas por 0,2 mm x 0,2 mm x 0,1 mm, ó 0,004 mm3