Ensayos Preclínicos y

Clínicos

Departamento Médico
Immunotech
 Desarrollo
Nueva droga
 Desarrollo
Nueva droga

Obtención de la droga bajo normas GLP

y control de calidad del producto terminado

Estudios
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Estudios
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos
 “lo que la droga le hace al cuerpo”

Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinami
a

Estudios
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos

La acción de una droga es la modificación de las funciones inherentes a

una, varias o todas las células que conforman un ser vivo sano o enfermo

Modificación: aumento o disminución, no creación de nuevas funciones.

 1 Absorción
2 Distribución
Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica 3 Metabolismo
4 Excreción
Farmacodinamia
Farmacocinética

Estudios
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos “lo que el cuerpo le hace a la droga”
 Absorción: determina la vía de administración

Distribución: concentración en órganos efectores.

Metabolismo: Transformación en productos tóxicos,

inactivos o más activos. (Hígado, riñón,

mucosa intestinal, plasma, pulmón, piel
y a nivel de las células blanco)

Excreción: metabolizado
inalterado
degradado

Farmacocinética Eliminación = Metabolismo + Excreción

 Absorción Eliminación
Medio exterior

Medio exterior
Sangre
Filtración glomerular
Vía injectable
Secreción tubular

Eliminación pulmonar
Vía inhalatoria
Vía oral y mucosal

Excreción biliar o salival

Vía transdérmica
Eliminación intestinal
Absorción / excreción

CION RACION PLASMAT ICA

CURVAS DE CONCENT

45
40
CONCENTRACION PLASMATICA

35
30

25
20

15
10

5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 12
Distribución

Droga unida a proteínas

Droga libre en plasma

Órgano SNC Hígado Feto Riñón Bazo Testículos

Blanco
100% 0% 50% 10% 25% 100% 0%
 Absorción
Distribución

Metabolismo

Reacciones de Fase I o no sintéticas:

* óxido reducciones
* hidrólisis

Reacciones de Fase II o sintéticas:

* conjugaciones con ácido glucurónico, ácido sulfúrico,
glicina o ácido mercaptúrico
* acetilaciones
* metilaciones

Excreción
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica Efecto biológico
adverso
Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos
Estabilidad
Métodos analíticos
Toxicidad Aguda

Se emplean 3 especies animales (una de ellas NO debe

pertenecer al orden Rodentiae) Se ensayan machos y hembras.
Se administra la dosis total en una sola aplicación o en varias en un
máximo de 24 hs.
Se emplea una dosis siempre mayor a la terapéutica para humanos
multiplicada por 10.
Se usa la vía de administración que se empleará en el humano y la vía
endovenosa. Esta última puede reemplazar a las demás en los ensayos
de toxicidad aguda. La vía intraperitoneal podría reemplazar a la
endovenosa en animales pequeños salvo que se espere toxicidad
debida a efecto de pico o que la droga ensayada se degrade durante
la absorción peritoneal.
Se observan los animales por un período de 15 días. Si algún animal
presentara signos de enfermedad se lo observa por 2 semanas más,
luego de las cuales se los sacrifica y se estudian anatómica e
histologicamente sus órganos.
Dosis Letal 50 (DL50)

Estrategia actual: Ensayo Límite

 Ensayo Límite
Se emplea un pequeño número de animales, a los que se les
administran dosis crecientes hasta producir la muerte de algún
animal del ensayo. Los animales sobrevivientes deben ser
observados durante dos semanas. Si al cabo de este período hay
síntomas de enfermedad en algunos de ellos, estos deberían ser
observados durante dos semanas más.
Al final del ensayo los animales enfermos son sacrificados.

En algunos casos no se produce

ninguna muerte, debido a la baja
toxicidad del fármaco ensayado, pero
siempre se puede fijar una
dosis límite que nunca debería ser
superada en el humano.
 Antes de comenzar un ensayo de toxicidad

Reunir toda la información de las drogas análogas, para orientar en:

la elección de la dosis, los efectos tóxicos esperados, los órganos
blanco, los animales a emplear, la vía de administración, etc.

Para determinar la dosis y la vía de administración, se tendrá en cuenta

Factores dependientes del animal

Variación interespecie: Los animales en general son de 6 a 10 veces

menos sensibles que el hombre.
Variación intraespecie: edad, sexo, salud, nutrición,
stress, etc

Factores dependientes de la droga

Estado físico, solubilidad, solventes, concentración,
presencia de otras substancias, etc.
 Determinación de la dosis mediante ensayo exploratorio

Un macho y una hembra por dosis

1
RIP
Dosis Dosis Dosis Dosis Dosis
0.6 log 0.6 log 0.6 log 0.6 log

Dos machos y dos hembras por dosis

2 RIP RIP RIP
Dosis Dosis Dosis Dosis Dosis
0.2 log 0.2 log 0.2 log 0.2 log

Diez machos y diez hembras por dosis

3 RIP 50%
Dosis Dosis Dosis Dosis Dosis
0.05 log 0.05 log 0.05 log 0.05 log
DL50
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos
Ensayo de Toxicidad Subaguda
Se trata de establecer la dosis tóxica mínima y la máxima
tolerada. Se buscan fenómenos de acumulación y tolerancia.
(NO DL50)

Se emplean como mínimo

2 especies, una de ellas
no perteneciente al orden
Rodentiae

Numero mínimo de animal

es pequeños: 10 de cada
sexo por cada nivel de dosis. (25 + 10 de cada sexo si se
continua con el ensayo de toxicidad crónica).

Dosis: Tres niveles de dosis (uno debe ser no tóxico) que se

administran durante un período y con una frecuencia que se
determina para cada ensayo.

Siempre se usa un grupo control que no recibe medicación.

Duración: 1 a 3 meses dependiendo del uso que se dará en humanos.
(Farmacología Clínica, Rothlin, Tessler, Zieher)

3 meses (Safety of chemicals in food, drugs and

cosmetics, Subacute toxicity, Garth Fitzhgh and
Paul Schouboe) Estos tiempos se pueden prolongar
4 o 6 meses y hasta un año.

3 a 6 meses (Disposición 5330/97, Anmat)

Administración de la droga: 15 días en dosis repetidas como mínimo.

 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Ensayo de toxicidad crónica
Se realiza solamente con fármacos que serán empleados en
forma crónica. (no se usaría para vacunas y la mayoría de los
antibióticos)

Se emplean como mínimo 2 especies, una de ellas no

perteneciente al orden Rodentiae

Número mínimo de animales pequeños: 25 de cada sexo por

cada nivel de dosis. Este número debe ser incrementado si
se van a realizar sacrificios a intervalos durante el ensayo.

Siempre se usa un grupo control que no recibe medicación.

Ensayo de toxicidad crónica
Se trata de establecer la dosis tóxica mínima y la máxima
tolerada. Se buscan fenómenos de acumulación y tolerancia
a largo plazo. (NO DL50)

Dosis: Tres niveles de dosis (uno debe ser no tóxico) fijados de

acuerdo a los resultados del ensayo de toxicidad subaguda. Se
administran durante un período y con una frecuencia que se
determina para cada ensayo.
Duración: 3 a 6 meses dependiendo del uso que se dará en
humanos se podrá extender hasta los 2 años.
(Farmacología Clínica, Rothlin, Tessler, Zieher)

2 años (Safety of chemicals in food, drugs and

cosmetics, Subacute toxicity, Garth Fitzhgh and
Paul Schouboe) Estos tiempos se pueden prolongar
hasta 5 o 10 años según la expectativa de vida del
animal empleado.

6 meses (Disposición 5330/97, Anmat), como mínimo

de acuerdo a la naturaleza del producto empleado,
terapéutica propuesta y especie animal utilizada.

Administración de la droga: en dosis repetidas.

 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Mutagénesis
Se determina por diferentes métodos:

El más empleado es el test de Ames de mutagénesis

bacteriana.

Se emplea bacterias del género Salmonella con mutaciones

puntuales que revierten con una frecuencia determinada.
Esta frecuencia de reversión puede ser o no modificada por
el fármaco estudiado.

El test se realiza con el fármaco no modificado y con el

mismo en contacto con un extracto hepático. Las enzimas
presentes en este, modificarán el fármaco produciendo
metabolitos que podrían ser mutagénicos.
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
 Carcinogénesis

Es muy difícil determinar que un medicamento es potencialmente

cancerígeno.

Se realiza luego del ensayo de toxicidad crónica con los animales

que no fueron sacrificados. Observándolos durante un período
no menor al 25 % de la vida del animal.

Un resultado negativo del ensayo de mutagénesis bacteriana

(Test de Ames) apoya la baja probabilidad de efecto
carcinogénico.

La verificación de efecto carcinogénico en la fase preclínica

excluirá su uso en terapéutica humana, excepto que los beneficios
superen los riesgos. Ej antineoplásicos y anti- HIV
 Desarrollo Farmacología
Nueva droga Preclínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
Teratogénesis
Teratogénesis
Se realizan en dos especies, rata y conejo.
La droga es administrada durante el período
de organogénesis. Tiene como objetivo la
evaluación de la potencialidad embriotóxica,
teratogénica y toxicidad sobre la madre
 Desarrollo Farmacología Farmacología
Nueva droga Preclínica Clínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
Teratogénesis
 Desarrollo Farmacología Farmacología Fase I
Nueva droga Preclínica Clínica

Farmacodinamia
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
Teratogénesis
 Desarrollo Farmacología Farmacología Fase I
Nueva droga Preclínica Clínica

Farmacodinamia
Fase II
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
Teratogénesis
 Desarrollo Farmacología Farmacología Fase I
Nueva droga Preclínica Clínica

Farmacodinamia
Fase II
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Fase III
Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis
Teratogénesis
 Desarrollo Farmacología Farmacología Fase I
Nueva droga Preclínica Clínica

Farmacodinamia
Fase II
Farmacocinética
Toxicología
Estudios Aguda
Físico-químicos Fase III
Subaguda
Estabilidad
Métodos analíticos Crónica
Mutagénesis
Carcinogénesis Fase IV
Teratogénesis