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Coleccin, conservacin y transporte de muestras microbiolgicas

Mara Cecilia Arango Jaramillo

Para desarrollar un estudio microbiolgico es necesario que previamente se conozcan:


    

El propsito del estudio Los objetivos Las metodologas Las variables Los procedimiectos de anlisis Las metas a alcanzar.

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TIPOS DE ESTUDIOS


Los estudios microbiolgicos se clasifican de acuerdo con sus objetivos y el tiempo de ejecucin en tres tipos:

Estudios base Estudios de monitoreo Estudios de evaluacin

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Estudios base

Permite un conocimiento global del sistema y de las comunidades de microorganismos.


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Se considera que los ecosistemas dulceacucolas tropicales manifiestan cambios ambientales y biolgicos considerables, dependientes de las temporadas de sequa y lluvia.

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CONDICIONE AMBIENTA E FLUCTUANTE

Estr t

i r

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CONDICIONE AMBIENTALE E TABLE

Estr t

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MONITOREO


Se extiende en el tiempo ( a travs de los aos) Su propsito: observar peridicamente ecosistemas susceptibles de cambios (positivos o negativos), por alteraciones de origen natural o antrpicas, tanto puntuales como continuos.

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Permiten definir:  Si la capacidad ambiental de un ecosistema se est superando  O si los tensores estn siendo asimilados adecuadamente por estos
(disolucin, dispersin, mezcla, descomposicin, biodegradacin, oxidacin u otros).

As mismo, su implementacin puede darse para observar la recuperacin de ecosistemas deteriorados.


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Los programas de monitoreo pueden llevarse a cabo para: Valorar planes de manejo ambiental Evaluar efectos ambientales Seguimiento continuo a procesos industriales.
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Muestreos no programados deben hacerse:


 

Cuando ocurran cambios importantes En caso de presentarse condiciones anmalas que puedan conducir a variaciones en la calidad del medio (positivas o negativas).

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A lo largo del programa de monitoreo, se debe mantener contacto permanente con el ecosistema bajo estudio Para no llegar a conclusiones errneas o falsas interpretaciones

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El cotejo de resultados de un tiempo con los ya existentes, permite inferir cuales sern las condiciones futuras.

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Estudios de evaluacin


Estos estudios tienen lugar cuando condiciones de contaminacin de origen natural o antrpico, se producen en forma espordica pero en magnitudes importantes, causando un cierto deterioro del ecosistema con cambios en la comunidad de microorganismos. microorganismos.

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DISEO DE ESTUDIOS MICROBIOLGICOS


Evaluacin

preliminar Eleccin de los microorganismos a muestrear Eleccin de variables fsico qumicas Muestreo Ubicacin de estaciones Tipo y nmero de muestras
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Evaluacin preliminar

La evaluacin preliminar es la etapa en la cual se realiza la planificacin del estudio y requiere del tiempo necesario para aclarar todos los interrogantes que se presenten.

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Paralelamente se debe llevar a cabo un reconocimiento del rea con el propsito de:
Precisar los principales gradientes ambientales naturales Las variables antropognicas presentes Un premuestreo es necesario para definir los anlisis que se harn y los equipos de muestreo Definir el tratamiento numrico que habr de implementarse con cada variable
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La planeacin de detallada del estudio evitar resultados intiles, sesgados o errneos o errneos, incrementos no programados de esfuerzo, costos y tiempo.

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Validez de los resultados del anlisis de aguas


Dependen de  El nmero de muestras que adecuadamente representen el cuerpo de agua o el efluente.
Calidad estndar Lmites permisibles


Sitios de muestreo y registros previamente planeados y conocidos


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Recipientes para la toma de muestras




Frascos de muestreo 125 ml muestreo: como mnimo, tapa metlica hermtica. Limpieza: 1. Lavado con detergente y agua caliente 2. Enjuague con agua caliente 3 veces 3. Enjuague con agua destilada
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Agente desclorinizador.
Para muestras tratatadas con cloro. Tiosulfato de Na al 10%, 0,1 ml por frasco de 125 ml suficiente para neutralizar 15 mg de cloro.

Cobertura del frasco papel Kraft, frasco: aluminio o pelcula plstica Esterilizacin:
Autoclave: 121C por 15 minutos Calor seco 170C por 2 horas
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Tcnicas de muestreo


 

Primero las muestras de estaciones menos contaminadas evitar contaminacin cruzada Nunca muestras compuestas Aguas profundas: Botella Kemerer

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Aguas superficiales: 15 - 30 cm de profundidad Siempre en contra de la corriente

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Abrir el frasco slo en el momento del muestreo Llenado de frascos hasta 2-3 cm antes de la tapa para agitar

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Identificacin y manejo de muestras


Caractersticas de las etiquetas:  Limpias  Impermeables  Indelebles  Fijas, pero fciles de remover  Tamao suficiente para consignar los datos
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Muestras sin etiqueta o con etiquetas deficientes no son aceptadas en el laboratorio.

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Nombre de la entidad o del estudio Estacin echa Hora Muestra No. No. Localizacin de la estacin olector Tipo de anlisis a practicar Preservativo Tipo de muestra omentarios

Secretara de Salud Municipio de El armen Estacin echa Hora Muestra No. No. 4 11-08-01 13:00 2 ntes de la bocatoma Jairo Prez olimetra completa Preservativo: Tiosulfato de Na 10% Simple ultivos abonados con gallinaza hasta la Mara Cecilia Arango orilla de la quebrada Jaramillo

Registro de datos de campo


Registr e t s e H j No. Colectores: Est ci Nmero Fecha de Hor de l colecci Toma Entrega muestr

Otros

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Registro de datos de campo Hoja No. Colectores:

2/2

Javier Trujillo y Sandra Pelez


Otros

Estaci n Nmero Fecha de Hora de la colecci n Toma Entrega muestra

1/3 Antes de la escuela

28-08-01 8:00

14:35

Epoca de lluvia Basuras en el lecho Alrededores abonados con gallinaza Agua turbia Riberas erosionadas

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Seleccin de sitios de muestreo

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Lago o represa (recreacin)

C D
Piscinas diariamente en temporadas de mximo uso

B C C C E

B
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Abastecimiento de agua
A

D C, a la r D D

i ad de la t

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Ro de orden mayor

60 m

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Muestreos en la red Se necesita una cobertura sistemtica para:  Detectar averas  Contaminacin cruzada Frecuencia de la toma de muestras:  Tablas de la EPA  Legislacin vigente  Standard Method

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Frecuencia del muestreo:


Decreto 475 de 1998, Calidad del agua potable

Po laci n ser ida

mero mnimo de muestras or mes

a . .

. a a

. .
q q

nter alo m imo or muestras consecuti as Me nsua l Quincena l C/ das 6 por da 7 por da 11 por da 12 por da 15 por da 16 por da

320.001 a 450.000 450.001 a 600.000


q q

180 450 330 360 450 480

1.230.001 a 1.520.000 1.230.001 a 1.520.000


q q

3.020.001 a 3.960.000 3.960.001 o ms

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Toma de muestras en la red

Dejar correr el agua

Tomar la muestra Si utiliza preservativo, no la deje rebosar Mara Cecilia Arango Jaramillo

Flamear

Dnde tomar las muestras de la red?


        

Edificios municipales y pblicos Parques Escuelas Estaciones de gasolina Teatros Aeropuertos Restaurantes Plantas industriales Residencias privadas
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Transporte de muestras


Refrigeradas, evitar que el hielo las cubra Fijarlas para evitar roturas

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Almacenamiento de muestras

   

0C a 4C 6-12 horas en refrigeracin 30 horas aguas tratadas < 6 horas aguas residuales

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Seguridad

Parte de la confiabilidad depende de la vigilancia y custodia de las muestras

Ellas son la base de obras o acciones legales Debe demostrarse posesin fsica o registros

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El colector de las muestras es responsable de ellas hasta su entrega en el laboratorio

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El laboratorio:


Es responsable de las muestras que se le entreguen Debe registrar su entrada y los resultados del anlisis, la fecha de entrega de resultados y la de destruccin de la muestra

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El laboratorio debe utilizar mtodos estndar de acuerdo a la legislacin vigente Los laboratorios que analicen agua para consumo humano debern llevar un programa de aseguramiento de la calidad que garantice los resultados (Decreto 475 8)
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El coordinador del estudio debe recibir copia del registro de laboratorio. El original queda archivado en el laboratorio

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Para tener en cuenta

Manipule la muestra lo menos posible muchos microorganismos sufren estrs o mueren Las muestras deben ser manejadas por el menor nmero de personas Mara Cecilia Arango Jaramillo posible

 

Utilice tcnicas de muestreo estndar Use cuaderno de campo para registrar datos de cada muestra

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La de la tapita oxidada era la de la estacin 2 o 3? La estar confundiendo con la muestra 12 que tiene la tapa rayada?

Fije las etiquetas en el campo antes de tomar la muestra

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Sitios de muestreo y polucin visible deben ser registrados con fotos

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El contacto con el laboratorio




Contacte un laboratorio especializado en anlisis microbiolgico de aguas: garantiza que tiene estandarizados los anlisis

Hable con las personas encargadas sobre el tipo de anlisis que necesitar, la frecuencia de muestreo, el propsito y la duracin del estudio

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Averige en el laboratorio:  Los das y horas en los que el laboratorio recibe muestras para anlisis microbiolgico.  El nmero de muestras que le pueden recibir simultneamente  Los requerimientos del laboratorio para la entrega y procesamiento de muestras
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Anlisis microbiolgicos corrientes:




Microorganismos hetertrofos:ufc 100 ml Su presencia se utiliza para indicar la eficiencia en la reduccin de microrganismos en procesos de sedimentacin, cloracin, filtracin

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NMP coliformes totales: No. 100 ml Su presencia significa que hay que tratar el agua, pero no significa necesariamente contaminacin fecal. Esta contaminacin puede provenir del suelo, el agua, etc.

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NMP coliformeds fecales : No. 100 ml Significan contaminacin fecal de origen humano o animal. Se debe buscar el origen, pero en ambos casos puede haber patgenos Su nmero es igual o menos que el de los coliformes totales
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NMP enterococos : No. 100 ml Los estreptococos confirman contaminacin fecal cercana y reciente Los estreptococos menos que los coliformes


Enterovirus : No. Ufc (calvas) ml En estudios limnolgicos se utiliza el ndice de saprobidad

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ecreto

de 1

, Calidad del agua potable

T cnica utili ada icroorganismos Filtraci Sustrato definido Tubos m ltiples de fermentacin indicadores n por aceptable asta el membra a o 2000 na Coliformes 0 UFC 0 microorganismos <2 3 3 totales /100 cm /100 cm microorganismos /100 cm 3 negativo Escherichhia coli 0 UFC 0 microorganismos Ninguna muestra /100 cm 3 /100 cm 3 de agua potable debe contenerla en una muestra de100 cm 3 independdienteme nte del mtodo

Se recomienda un valor mximo de 100 UFC /100 cm3, para microorganismos mesfilos, como prueba complementaria de calidad microbiolgica del agua
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Control de calidad microbiolgica del agua potable:  Libro de registro de calidad del agua
% Aceptabilidad = Na X 100 Nt
Na = Nmero de muestras aceptables: cumplen con requisitos Art 5 Nt = Nmero total de muestras por mes: total de muestras analizadas y registradas
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