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Bioqumica Industrial
Captulo IV - Enzimas
Parte I
Conceitos Fundamentais
Enzimas - Definio
Todas as enzimas so macromolculas que pertencem classe das protenas globulares; algumas so holoprotenas (protenas simples) constitudas unicamente de um encadeamento de aminocidos; outras so heteroprotenas (protenas conjugadas) que possuem uma parte noprotica, o cofator, em geral necessria atividade cataltica e ligada, mais ou menos fortemente, protena Cada protena constituda por cadeia proteica (estrutura terciria ou quaternria), com seqncia de aminocidos e conseqentes interaes que determinam uma conformao estrutural nica, a qual determina a atividade e especificidade enzimtica
Convm ressaltar que o restante da estrutura que torna possvel a existncia desse local na molcula
Enzimas Cofatores
So os constituintes no proteicos, em geral de alguma forma determinantes da atividade cataltica da enzima
Os cofatores so divididos em grupos prostticos e coenzimas. A diferena bsica entre ambos est no fato de que o grupo prosttico est fortemente ligado estrutura da enzima e a coenzima no.
NAD: Nicotinaamida Adenina Dinucleotdeo; NADP: Nicotinaamida Adenina Dinucleotdeo Fosfato; ATP: Adenosina Trifosfato; UTP: Uridina Trifosfato: Citidina Trifosfato; FMN: Flavina Mono-Nucleotdeo; FAD: Flavina Adenina Dinucleotdeo
Parte II
Mecanismo de Atuao
Mecanismo Chave-Fechadura
Mecanismo Chave-Fechadura
Conseqncias:
Reaes altamente especficas: no h formao de subprodutos Baixa energia de ativao: temperaturas brandas
The three-dimensional structure of invertase. (a) The overall threedimensional structure of invertase. Three glycosylation sites could be allocated to invertase on residues Asn116, Asn143 and Asn299 (indicated in red). The glycosylation chains are indicated in orange. The figure was prepared with PyMOL (DeLano, 2002 ). (b) Schematic diagram of the topology of invertase. Strands are depicted by arrows and helices by cylinders. Asterisks represent the glycosylation sites.
Especificidade Enzimtica
Em funo da conformao da complexa molcula protica, da singularidade de seu stio ativo e da configurao estrutural da molcula do substrato, uma enzima selecionar somente um nmero limitado de compostos Esta especificidade pode ser de grupo, quando grupo de compostos pode servir de substrato, como as quinases que fosforilam aldoexoses. Pode ser de grupo absoluta, quando atua sobre um nico substrato (glicose, por exemplo), ou de grupo relativa (uma srie homloga de aldoexoses). Pode-se ter estereoespecificidade (por um ismero tico D ou L) ou especificidade cis-trans.
3. Hidrolases: catalisam reaes de hidrlise (ligaes steres, glicosdicas, peptdicas, etc) 4. Liases: catalisam a adio a duplas ligaes 5. Isomerases: catalisam reaes de isomerizao 6. Ligases: formam ligaes, com desdobramento de ATP
Porque Enzimas ?
Alta especificidade Exigncia de condies brandas de reao Baixa formao de subprodutos Alta capacidade cataltica Biodegradveis
Porque Enzimas ?
Forma o produto: -amilase, amiloglicosidase, invertase, b-galactosidase, inulinase, lipase
Conferir uma propriedade a um produto (modifica o produto): b-galactosidase, pectinase Elimina substncias indesejveis em um produto: glicose-oxidase
Fontes de Enzimas
Fontes de enzimas
Animais Vegetais Microrganismos
Parte IV
Cintica Enzimtica
Exemplos
Bacterial Amylase Novo (480-1.000 KNU/g)
1 KNU (Kilo Novo Unit): quantidade de enzima que ir quebrar 5,26 g de amido Merck por hora nas condies do experimento (37oC, pH 5,6, 20 min, 0,0043M Ca)
Number
Atividade Molecular
Nmero de molculas de substrato convertidas por molcula de enzima por minuto
Mecanismo chave-fechadura (Emil Fischer, 1894): a enzima possui centro ativo complementar ao substrato
Efeito do pH
Amina
-NH3+ = NH2 + H+
aLocalizado
Efeito da Temperatura
Polifenoloxidase: 7,8 oC
Peroxidase: 35 oC
K2 ES E P
K 2 [E o ][So ] vo K m [S o ]
Modelo de Michaelis-Menten
v max [So ] vo K m So