MEDIOS DE CULTIVO

DEFINICION: ES AQUEL QUE CONTIENE LOS NUTRIENTES NECESARIOS PARA EL CRECIMEINTO, DESARROLLO Y MULTIPLICACION DEL MICROORGANISM O

MEDIOS DE CULTIVO
ES NECESARIA LA UTILIZACION DE MEDIOS DE
CULTIVO PARA: El aislamiento de las diferentes especies microbianas presentes en una muestra biolgica. Identificacin de un microorganismo problema. Conocer el tipo de metabolismo que presenta en funcin del nutriente o sustrato que utiliza o metabolito que produce. Estudios macroscpicos, visualizar las caractersticas de las colonias en medios slidos. La realizacin de pruebas de sensibilidad por difusin. Pruebas de CIM Conservacin de especies microbianas o muestras biolgicas.

Medios de Cultivo
CONDICIONES QUE DEBE CUMPLIR UN MEDIO DE CULTIVO: Composicin de nutrientes adecuada a las necesidades de ese microorganismo. Condiciones fsico-qumicas adecuadas. De acuerdo con ello habr que considerar: Temperatura ptima Grado de humedad pH Presencia o ausencia de oxgeno

MEDIOS DE CULTIVO CLASIFICACION :

SEGUN SU CONSISTENCIA

MEDIOS SLIDOS

MEDIOS LQUIDOS

MEDIOS SEMISOLIDOS

MEDIOS BIFASICOS

MEDIOS DE CULTIVO CLASIFICACION :

SEGN SU UTILIZACION

MEDIOS PARA AISLAMIENTOS

MEDIOS DE ENRIQUECIMENTO

MEDIOS ESPECIALES

MEDIOS DE TRANSPORTE

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

SEGN SU PROPORCION DE AGUA: MEDIOS SLIDOS: contienen una proporcin de agar por encima del 15%. El agar es una sustancia inerte, polisacrido de algas marinas. Sirve de soporte Ej: agar nutritivo, Triptena soya

contienen nutrientes en solucin tamponada. Ej: caldo nutritivo, caldo tioglicolato

MEDIOS LIQUIDOS: llamados caldos,

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS SEMISOLIDOS: la concentracin

de agar-agar es baja. Ej: medio de transporte( Stuart; Cary-Blair ) Medio de movilidad SIM

MEDIOS BIFASICOS: son los que tienen

una fase lquida y una fase slida se utilizan para la recuperacin de microorganismos. Ej: Medio de Ruiz Castaeda para Brucella spp

SEGN SU UTILIDAD: Medios de aislamiento: Medio Enriquecido: son aquellos a los que se les adicionan sustancias que los hacen ms ricos en elementos nutrientes, permitiendo el crecimiento de bacterias ms exigentes que no crecen en medios comunes. Ej: agar sangre-agar chocolate

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIO SELECTIVO: son medios slidos que
contienen sustancias inhibidoras de las bacterias que forman parte de la flora normal, permitiendo el desarrollo solo de las bacterias que nos interesan aislar. La selectividad se debe al agregado de colorantes, sales en altas concentraciones o antimicrobianos. Ej: agar de Thayer- Martin( para N gonorroheae con antimicrobianos); Agar SS para Salmonella y Shigella ( con sales biliares y citrato).

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS DIFERENCIALES:
Son medios que contienen sustrato sobre los que actan determinados microorganismos demostrando alguna de sus propiedades metablicas. Se utilizan para la identificacin bacteriana. Ej: Levine o EMB ( eosina azul de metileno) este medio contiene lactosa permitiendo diferenciar las bacterias que fermentan de las que no. Las colonias que fermentan se ven rojas y las que no transparentes o rosas.

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: Son medios lquidos que favorecen el crecimiento de ciertas bacterias presentes en baja densidad en una muestra clnicas que inhiben transitoriamente otras, presentes en las misma que pueden ser no patgenas. Se utilizan frecuentemente para la siembra de materia fecal, manteniendo el desarrollo de bacterias entricas en fase de retardo ( inhibiendo) y favoreciendo solo la multiplicacin de bacterias que son enteropatgenas. ( Salmonella spp, Shigella spp ) Ej: Caldo Selenito

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS DE TRANSPORTE: son los que
permiten preservar la viabilidad del microorganismo hasta que la muestra sea procesada en el laboratorio. Son medios inertes, no tienen factores de crecimiento por lo que las bacterias no se multiplican. Se utilizan cuando el tiempo entre la recoleccin y el cultivo de la muestra supera las dos horas o cuando el m.o a investigar es muy lbil. Ej: Cary- Blair, Stuart; Tab

CLASIFICACION DE MEDIOS DE CULTIVO

MEDIOS ESPECIALES:
Son los que se utilizan para aquellas bacterias que tienen requerimientos nutricionales y metablicos especiales para su desarrollo. Ej: Lowestein Jensen ( Mycobacterium tuberculosis) Medio de Loeffler (Corynebacterium diphtheriae)

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

Los medios de cultivo se preparan: En el laboratorio a partir de sus

componentes. A partir de los productos en polvo deshidratado comerciales. Pueden adquirirse medios listos para su uso.

 Agua: recipientes donde se almacena el agua

PARAMETROS A TENER EN CUENTA PARA OBTENER UN BUEN RESULTADO:

deben ser inertes. Se utiliza agua destilada. pH: ajuste del mismo con 1M NaOH o 1M CLH 15 ml de Agar para espesor en placas de Petris 90mm ( exceptuando Mueller Hinton 25ml4mm) Secado de placas en estufa 25-35 C ( 20 min. ) Incubacin 24 hs para control.

Aseguramiento de calidad de los medios de cultivo Posibles Problemas

Anormalidad

Falla en la solidificacin del medio slido

Posibles causas * Sobrecalentamiento del medio durante la preparacin * pH incorrecto * Contaminacin externa. * Pesada incorrecta. * Pobre calidad del agua. * Pobre calidad del medio deshidratado. * pH medido incorrectamente. * Contaminacin externa con qumicos. * Sobrecalentamiento del medio durante la preparacin

pH anormal

Aseguramiento de calidad de los medios de cultivo Posibles Problemas

Anormalidad

Formacin de precipitado

Posibles causas * Sobrecalentamiento del medio durante la preparacin. * pH incorrecto. * Pobre calidad del agua. * Pobre calidad del medio deshidratado * Pobre calidad del agua.. * Ingredientes mal pesados. * Sobrecalentamiento del medio durante la preparacin. * Pobre calidad del medio deshidratado * Sobrecalentamiento del medio durante la

Medio inhibitorio/ productibilidad baja

Control de esterilidad: Para verificar la esterilidad del medio, incubar en estufa de 35 C durante 24 hs. (agar sangre 24hs en estufa a 35C, 24 hs a T ambiente ) Control de pH: Controlar el pH de cada lote. Control de profundidad del agar. De tres a cinco mm ( Mueller Hinton 4 mm ) Cepas patrones para control de calidad: Agar sangre: Streptococcus pneumoniae ; Streptococcus pyogenes. Agar chocolate: Haemophilus influenzae

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE CULTIVOS

CONTROL DE CALIDAD DE MEDIOS DE CULTIVOS

Cepas patrones para control de calidad: Agar Mueller Hinton : Enterococcus faecalis ATCC 29212 para controlar los niveles de timina o timidina. Bateria de identificacin de enterobacterias: ( TSI, CITRATO, UREA ,SIM, FA) Escherichia coli, Proteus mirabilis

MEDIOS DE CULTIVO

ALMACENAMIENTO DE MEDIOS DE CULTIVO: En General los medios preparados se guardan: En la heladera no ms de siete das. A temperatura ambiente no ms de un mes en condiciones que impidan que su composicin sea modificada. Observa cambio de color, evaporacin, la deshidratacin o el crecimiento microbiano.

LOS MEDIOS DE CULTIVO NO SON TAREA DIFICIL SIMPLEMENTE ..

HAY QUE SER .. PRECISO

MUCHAS GRACIAS