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TRADUÇÃO

É o processo em que os
códons do RNAm são convertidos
em uma seqüência de
aminoácidos na proteína
nascente (síntese de proteínas).
Obs. conversão entre linguagens:
DNA PTN
(4 LETRAS) (20 LETRAS)
ESTRUTURA DO RNAt

São as moléculas adaptadoras que transferem a informação do


genoma para as proteínas.

Características:
1 - Massa em torno de 25 kd;
2 – Possuem de 75 – 85 pb
3 - Bases incomuns;
* Bases raras (diidrouridina, pseudouridina e ribotimidina)
* Bases metiladas (metilcitidina, metilguanosina e metiladenosina)
4 – Ponta 5’ com fosfato.
•Nucleotídeo terminal é G.
5 - Ponta 3’ termina com CCA = é o ponto de ligação do AA.
• 6 – Regiões não pareadas
• * Região CCA
• * Alça → TψC onde ψ = pseudouridina;
• → DHU onde D = diidrouridina;
• → Variável = varia no número de pb entre os RNAt;
• → ANTICÓDON;
• 7 – Alça Anticódon.
• 5’ – Py – Py – ANTICÓDON – PU* - N - 3’
• 8 – Molécula em forma de L. Em uma ponta =
Anticódon; na outra ponta = AA.
• 9 – Regiões (duas) de dupla hélice. Estrutura
secundária na forma de folha de trevo. Comum a
procariotos e eucariotos. Pareamento entre seqüências
complementares
Propriedades:
* Aminoacil-RNAt = RNAt ligado ao seu aminoácido;
RNAtMet = RNAt para Met (metionina)
* Cada RNAt é ligado a apenas um AA;
* Contém o anticódon que é complementar ao códon no
RNAm e que representa o AA.
ATIVAÇÃO DO AMINOÁCIDO

• * Formação de um Aminoacil – RNAt.


• * Ação das aminoacil-RNAt sintetases.
• Função:
• 1 – Ativar aminoácido para formar a ligação
peptídica (↑ custo de energia).
• “Ativa-se a carboxila.”
• 2 – Reconhecer o códon específico no RNAm.
• “AA não reconhece códon.”
ETAPAS
• 1 - Seqüência de reação de ativação:

• Enzima ativadora

Aminoácido + ATP Aminoácido-AMP + 2Pi

• 2 – Ligação do aminoácido ao RNAt


• Enzima ativadora

Aminoácido – AMP + RNAt Aminoacil-RNAt + AMP
• Enzima ativadora
∀ ⇒ 1para cada Aminoácido.
∀ ⇒ Reconhecem o braço CCA e o anticódon do RNAt específico.
∀ ⇒ Atividade Revisora (correção de erro)
• Centro Hidrolítico
• ↓ ↓
• Catalítico Reconhece AA errado
• ↓

Reconhece AA correto
RIBOSSOMOS
São ribonucleoproteínas (RNAr + proteínas) formadas por duas
subunidades.
Função: Síntese de PTN’S
Comparação dos ribossomos nos dois tipos celulares existentes.
Procarioto Eucarioto
Ribosso Ribosso
Menor Maior Menor Maior
mo mo

Svedberg 70S 30S 50S 80S 40S 60S

28S,
RNAr 16S 23S e 5S 18S 5,8S e
5S

% RNA 66 60 70 60 50 65
nº PTN 52 21 31 82 33 49
% PTN 334 40 30 40 50 35
• Vários sítios nos ribossomos:
• * Sítio A = liga aminoacil-RNAt;
• Está na subunidade maior.
• * Sítio P = liga peptidil-RNAt;
• Está na subunidade menor.
• * Sítio E = sítio de saída da
cadeia polipeptídica.
VISÃO GERAL DO PROCESSO
∀ ⇒ Síntese da PTN: No sentido da ponta amino para a
ponta carboxila.
∀ ⇒ Leitura do RNAm: A tradução é feita no sentido 5’ →
3’.
∀ ⇒ Vários Ribossomos traduzem um RNAm (são os
polissomos)

• ETAPAS DA TRADUÇÃO
• Usando E. coli como modelo
• INÍCIO
• * Reconhecimento da seqüência Shine – Dalgarno pelo
RNAr 16S.
• * Reconhecimento do códon de início.
• Estrutura do RNAm procariótico
• 5’ ....AGGAGG NNNNNNN AUG ......................................3’
RNAm
• Região rica em purina (Shine-Dalgarno)
• Códon de início
• Seqüência a ser traduzida

3’ ....UCCUCC NNNNNNN UAC ...................................... 5’
RNAr 16S
• Estrutura do RNAm eucariótico
• * Não existe a região rica em purinas;
• * Reconhecimento do cap em 5’ pela subunidade 40S.
• * A subunidade 40S desloca-se até o AUG.
• Estrutura do RNAm eucariótico
• * Não existe a região rica em purinas;
• * Reconhecimento do cap em 5’ pela subunidade 40S.
• * A subunidade 40S desloca-se até o AUG.
• Início da tradução em procarioto

• * Ação das IF1, IF2, e IF3 (Fatores de iniciação)


• IF3 carrega 30S ao RNAm eimpede a 50S de se ligar na 30S
• SUBUNIDADE 30S
• IF1, IF2 e IF3
• GTP
IF3 carrega 30S ao
• COMPLEXO 30S / IF1 / IF2 / IF3 RNAm e impede a
• IF2 se liga no RNAt-fMET 50S de se ligar na
30S
• RNAm

IF3 RNAt-Fmet (formilmetionina)

• COMPLEXO DE INÍCIO 30S


• 50S
• IF1 H2O
• IF2
• RIBOSSOMO 70S
• Alinhado no RNAm com o RNAt-fMET no sítio P
• Início da tradução em procarioto

• RESULTADO
• * Primeiro AA em E. coli ⇒ Formilmetionina;
• * RNAt-fMET no sítio P do Ribossomo (é o único que se liga no
sítio P)
• * Sítio A no ribossomo livre = a espera do próximo AA.
ELONGAMENTO E TRANSLOCAÇÃO

• Ribossomo desloca no sentido 5’ para o 3’ no RNAm;


• Proteína sintetizada no sentido amino-terminal para o
carboxi-terminal.
• * Ação das EF (fatores de elongamento).
• * O códon posicionado no centro A.
• * EF-TU leva o RNAt-AA para o sítio A
• * EF-TU funciona com GTP.
• * Após carregar o RNAt-AA, EF-TU quebra GTP em
GDP.
• * Hidrólise de GTP pela EF-TU libera o RNAt-AA no sítio
A.
• * EF – TS ativa EF-TU, trocando GDP por GTP.
• Reação de ativação da EF-TU

• 1 – EF-TU-GDP + EF-TS EF-TU-EF-TS + GDP

• 2 - EF-TU-EF-TS + GTP EF-TU-GTP + EF-TS


• * EF – TU não reconhece RNAt-fMET.
• * Edição
• Interação Correto RNAt-AA no sítio A
Códon-Anticódon Incorreto Sai o RNAt-AA
TRANSLOCAÇÃO
• * RNAt-fMET no sítio P.
• * RNAt-AA no sítio A.
• * Transferência do sítio P → A.
• Ação de peptidil-transferase (subunidade maior) = Ligação
Peptídica = Amina do AA no sítio A ataca carboxi do AA no
sítio P.
• A ligação peptídica é uma ligação do tipo amida entre um
grupo amino e um carboxi. Ligação planar e pouco flexível.
• * RNAt descarregado deixa o sítio P.
• * Movimento de A →P.
• * RNAm move-se 3 códons.
• * O códon no sítio A fica a espera do seu anticódon.
• * Depende de EF-G que consome 1 GTP por vez.
• TÉRMINO
• * Ribossomo chega na seqüência de término (códon
de fim).
• * Ação das RF (Fatores de término) que reconhecem
o códon de fim.
• * RF1 reconhece UAA ou UAG e RF2 reconhece UGA
ou UAA.
• * RF1 ou RF2 se liga no sítio A.
• * Hidrólise entre o polipeptídio e o RNAt no sítio P.
• * Dissociação da maquinaria de tradução.
• * Liberação da proteína do ribossomo
TRADUÇÃO EUCARIOTO/PROCARIOTO

• * Ribossomo
• Procarioto = ribossomo 70S e subunidades 30S e 50S
• Eucarioto = ribossomo 80S e subunidades 40S e 60S
• * RNAr
• Procarioto três moléculas de RNAr
• Eucarioto quatro moléculas de RNAr.
• * RNAt iniciador
• Procarioto = inicia com formilmetionina.
• Eucarioto = inicia com metonina.
• * Códon de início
• Procarioto = Shine/Dalgarno precede o AUG.
• Eucarioto = AUG e sem Shine/Dalgarno.
• * Tradução
• Procarioto = policistrônico = um RNAm = várias PTN’s.
• Eucarioto = monocistrônico = um RNAm = uma PTN.

• * controle da tradução
• Procarioto = transcrição e tradução simultâneas.
• Eucarioto = transcrição (núcleo) e tradução (citoplasma).
• * Em eucariotos o controle da tradução é feito por PTN’s
quinase que inativam um fator de iniciação.
• * Em eucariotos são encontrados IF’s, EF’s e RF’s.

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