PREPARACION DE MUESTRAS

PREPARACION DE MUESTRAS
1.- ALIMENTOS SOLIDOS 2. ALIMENTOS LIQUIDOS 3.- ALIMENTOS CON TRATAMIENTO ESPECIAL

MATERIALES Y EQUIPOS

EQUIPOS Y MATERIALES

PREPARACION DE MUESTRAS

PREPARACION DE MUESTRAS

PREPARACION DE MUESTRAS
USO DE HOMOGENIZADORES (STOMACHER): Velocidad excesiva de las cuchillas Trituracin y mezcla insuficiente Generacin de aerosoles

PREPARACION DE MUESTRAS

EQUIPOS Y MATERIALES

EQUIPOS Y MATERIALES

TODO EL MATERIAL DEBE ESTAR ESTERIL EN EL MOMENTO DE SU USO

DILUYENTES Y REACTIVOS

Agua peptonada al 0,1% Citrato de Sodio al 2% Twen 80

PROCEDIMIENTO
Si la muestra est congelada,descongelar en su envase original. Perodo mximo de 18 horas en refrigerador( a 5C)

PROCEDIMIENTO
e) Homogenizar el alimento controlando el tiempo, no superar los 2 minutos a velocidad de 15.000 a 20.000 rpm. en licuadora, o no ms de 1 minuto si se utiliza Stomacher . De esta manera se obtiene la dilucin 10 -1 f) Traspasar 1 ml de la dilucin 10 -1 a un tubo que contiene 9 ml del diluyente 10 ml en 90 ml de diluyente 10-2

PREPARACION
LA PREPARACION DE CADA DILUCION REQUIERE EL USO DE UNA PIPETA ESTERIL EL PERIODO TRANSCURRIDO ENTRE LA PREPARACION DEL HOMOGENIZADO DE LA MUESTRA Y LA SIEMBRA NO DEBE SUPERAR LOS 20 MINUTOS.

PROCEDIMIENTO
2.- MUESTRAS LIQUIDAS 2.1 Alimentos que pueden ser pipeteados a) Agitar manual o mecnicamente b) Medir 10 ml de la muestra y aadir 90 ml de diluyente (10 1) c)Proseguir segn tcnica de alimentos no lquidos

PREPARACION DE MUESTRAS

PROCEDIMIENTO
2.2 Alimentos lquidos viscosos que no pueden ser pipeteados Tratar como alimentos no lquidos

PROCEDIMIENTO
3.- Alimentos que necesitan tratamiento especial 3.1 Alimentos cidos (pH inferior a 4,5):Jugos,nctares,yogurt a)Mezclar 10 ml de la muestra con 10 ml de solucin buffer pH7 b)Traspasar 2ml de la muestra tamponada a tubo

PROCEDIMIENTO
que contiene 8 ml de diluyente :10(-1) Proseguir como alimentos no lquidos (1 f) 3.2 ALIMENTOS DESHIDRATADOS a) Alimentos tales como leche en polvo, gelatinas, sopas, caldos,flanes,budines,huevo en polvo,etc .requieren diluyente temperados a 45C

PROCEDIMIENTO
b) Alimentos con gran capacidad de absorcin como gomas,especias molidas y vegetales deshidratados. Pesar 2 grs y aadir 200 ml de diluyente (dil. -2) En vegetales deshidratados,dejar rehidratar por 30 minutos a t de refrigeracin y luego agitar 3 minutos.

PROCEDIMIENTO
C) Proseguir las diluciones segn letra f de procedimiento detallado en punto 1

PROCEDIMIENTO
3.3 ALIMENTOS GRASOS a) Alimentos con contenido de grasa superior al 20%, agregar al diluyente 1% de Twen 80 u otro tensoactivo no txico,con el fin de aumentar la dispersin de los glbulos de grasa. b) En el caso de mantequilla o margarina,fundir la muestra bajo agitacin en bao termorregulado a 40C,por no ms de 15 minutos

PROCEDIMIENTO
c) En quesos, usar como diluyente citrato sodio al 2% (slo para la dilucin -1)

PREPARACION BASICA DE DILUCONES

10-25 -50 grs

90-225 -450 ml

DILUCIN 1/10 ( 10 1) 1 ml
9 ml Agua Peptonada 0,1 %

10 2
9 ml Agua Peptonada 0,1 %

103

9 ml Agua Peptonada 0,1 %

10 4