El Procesamiento Histopatolgico

Dr. Carlos Morales Mendoza.

Toma de muestra

Fijacin de la muestra
Permite mantener la estructura y evita la descomposicin del tejido tomado como muestra, el fijador ms empleado es el formaldehdo en microscopa de luz, mientras que en microscopa electrnica se utiliza ms el glutaraldehdo.

Deshidratacin.

Este paso de la tcnica histolgica es empleado para eliminar el exceso de agua en la muestra. Se lleva a cabo con la utilizacin de sustancias deshidratantes como el alcohol etlico.

Aclaramiento

En este paso de la tcnica histolgica, la sustancia empleada es el xilol.

Inclusin en parafina

Durante este paso de la tcnica histolgica se emplea la parafina para los tejidos que sern observados con microscopia de luz,.

Corte al micrtomo

Se realiza con un microtomo en aquellas muestras incluidas en parafina. En las muestras incluidas en resinas plsticas se emplea el ultramicrotomo. En muestras que fueron congeladas se utiliza el criostato o criotomo, por ejemplo en estudios transoperatorios.

Tincin. El mtodo de tincin ms empleado en histologa es el de hematoxilina y eosina.

Coloracin de Hematoxilina-eosina
La tincion ms usada o tambin llamada "de rutina" es la de hematoxilina y eosina (H&E). Se usa un colorante llamado hematoxilina que tie las sustacias cidas o que las contengan, como el ncleo que contiene cido desoxirriboncleico (ADN) La eosina tie las estructuras bsicas como el citoplasma y dems orgnulos eosinoflicos de la clula.

El montaje secado.

Consiste en colocar el cubreobjetos encima de la laminilla, para que queden adheridos se emplea el Blsamo del Canad.

Observacin, lectura o Examen microscpico Informe (protocolo) - Diagnstico

Examen microscpico.

 Algunos autores no consideran la observacin como un paso de la tcnica histolgica sino el objetivo final de la misma. Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se buscan las LESIONES que permitan llegar a un diagnostico. La tcnica histolgica es muy empleada en laboratorios y hospitales. Permite hacer diagnsticos de distintas enfermedades, como para saber si un tumor es maligno o beningno, etc.

Ejercicio.

Con la coloracin de Hematoxilina y Eosina se apreciaron los ncleos azules, el citoplasma rosado y la presencia de un pigmento pardo amarillento. Pregnta: Que rgano o tejido es? Por que el citoplasma se aprecia difusamente claro transparente?

 El mismo rgano coloreado con PAS mostrando el glucgeno teido de color magenta. Vista a 40x.

Coloraciones especiales.

ALGUNAS COLORACIONES ESPECILES.

Tricrmico de Masson PAS Perls Plata metenamina Warthin-Starry Ziehl-Neelsen Van Gieson Sudn III Rojo Congo