CITOLOGA GINECOLGICA

HISTORIA TOMA DE MUESTRAS

HISTORIA

1600, invencin del microscopio por Hans y Zacharias Janssen en Michelsburg, permiti observaciones 60 veces en relacin al tamao original. 1678, Anthony Van Leeuwenhoek, en Delft, logr identificar espermatozoides, aumento 275

1838, botnico Schleiden, hace descubrimiento de la clula en las plantas

1838 Alfred Danne en Paris descubri Trichomonas

1845 Alfred Danne hizo publicaciones sobre examenes microscpicos de lquidos corporales (calostro)

HISTORIA

1847 Pouchet, realiz estudios citolgicos del ciclo menstrual 1847 Carl Bruch public un atlas de citologa de los tumores. 1855 Rudolf Wirchow en Berln public un libro de Patologa celular 1860 Lionel Beale en Londres, Atlas de Citologa del esputo Despus de estos trabajo en Europa y EE UU, salen publicaciones sobre citologa de orina, lquidos corporales, rbol bronquial, tracto gastrointestinal.

La citologa ginecolgica en sentido estricto comienza en 1943 con George Papanicolaou.

HISTORIA

George Papanicolaou. Naci en 1833, Kymi, en la isla de Eurea 1904, termin estudios de medicina en Atenas En Munich, Doctor en Filosofa En 1913, decidi emigrar a los EE UU donde residi varios aos Fu profesor de anatoma clnica en Cornell, New York Se ocup de estudiar el comportamiento del ciclo del epitelio vaginal, primero en animales (caballos) mas tarde en seres humanos Al estudiar extendidos citolgicos procedentes de clnicas vecinas, descubri clulas tumorales.

HISTORIA

Para reconocer ms exactamente estas clulas y poder descubrirlo, Papanicolaou desarroll la fijacin alcohlica y la tcnica de tincin En 1928, public : Nuevo Diagnstico de Cncer En este mismo ao el antomo patolgo Ruman Babes, public : Diagnstico del Cncer de cuello uterino por frotis, con diferente tcnica de preparacin y tincin Ambas publicaciones pasaron casi inadvertidas

En 1943 Papanicolaou junto con eI gineclogo Traut, public su monografa : Diagnstico del Cncer Uterino mediante el frotis vaginal. Obtuvo el reconocimiento internacional.

HISTORIA

Aos siguientes gracias a la iniciativa de numerosos cientficos el nuevo mtodo se extendi 1961 Papanicolaou, director de un instituto nuevo en Miami. Florida 1962, muere a la edad de 79 aos, de un ataque cardaco Aos siguientes se aceptan estas tcnicas en EEUU, luego en otros paises Existen sociedades cientficas en todos los paises, siendo la Academia Internacional de Citologa su organizacin central.

Mtodos de obtencin, preparacin y coloracin de muestras ginecolgicas. TOMA DE MUESTRA

Recomendaciones Previas.

No manipulaciones intravaginales (duchas vaginales) No medicamentos vaginales o locales Evitar toma de muestra durante la menstruacin

Evitar tener relaciones sexuales (24 a 48 hrs antes)

No utilizar soluciones en el momento de toma de muestra, como cido actico

Mtodos de obtencin, preparacin y coloracin de muestras ginecolgicas. Obtencin de muestra : Condiciones. Colocar en mesa de exploracin ginecolgica

Colocar espculo

No utilizar lubricantes No utilizar desinfectantes

Puede usarse suero fisiolgico

Utilizar guantes de jebe para cada paciente

Utilizar el hocico de tenca

Mtodos de obtencin, preparacin y coloracin de muestras ginecolgicas. Obtencin de muestra : Condiciones. d) Toma debe efectuarse despus del examen ginecolgico
Colposcopa simple Toma de frotis Colposcopa tras aplicacin de cido actico y lugol Exploracin ginecolgica bimanual d) Tacto rectal

Mtodos de obtencin, preparacin y coloracin de muestras ginecolgicas. Obtencin de muestra : Condiciones. Obtencin del frotis con :

Torunda
Esptula de madera simple o cortada en forma cncava

Esptula de aire
Citocepillos Crvix brush

Cervix - Brush
Es una escobilla cervical Permite obtener un frotis limpio y uniforme Recoge en un solo movimiento, todas las clulas necesarias

DISEO
Compuesto de polietileno, mide 20 cmts.

El cepillo consta de 57 cerdas de plstico semi-redondas de distinta longitud Las del centro (mas largas) - zona endocervical Las externas (mas cortas) - superficie ectocervical y zona de transformacin

APLICACION
Introducir la cerdas del cepillo en el canal endocervical Presionar suavemente la escobilla, haciendo girar 5 veces en la direccin de las agujas del reloj

El material celular que adherido a los lados de las cerdas

Realizar el extendido en una lmina porta-objeto y fijar

Introducir el cervix-brush en el vial para la citologa de base

lquida

Mtodos de obtencin, preparacin y coloracin de muestras ginecolgicas. Obtencin de muestra : Condiciones. Mtodos de toma de muestra : toma vaginal : tercio superior de pared lateral de vagina (estudio hormonal) Toma de crvix : Ectocrvix y endocervix Toma endometrial : Debe ser simple y rpida No anestesia Por aspiracin (cnulas o aspirados) Lavado endometrio por presin

Mtodos de fijacin de la muestra

1.- Recomendaciones : No utilizar preparaciones desecadas al aire Fijar inmediatamente obtenida la muestra, aun cuando est hmeda Tiempo mnimo : 10 a 30 Tiempo mximo : 8 - 10 dias

Mtodos de fijacin de la muestra 2.- Fijadores empleados . A. Fijadores Lquidos: Licor de Hoffman en partes iguales de alcohol 96 y eter sulfrico Ventaja: excelente fijacin Desventajas : rpida evaporacin y muy inflamable Alcohol de 96

Mtodos de fijacin de la muestra 2.- Fijadores empleados B. Fijadores de Revestimiento: 1. Polietilenglicoles - solucin acuosa o alcoholtica Ventajas: protegen al material celular con fina capa - no voltiles Desventajas : debe ser disuelta completamente no disuelta evita buena coloracin se recomienda usa agua destilada y alcohol

B. Fijadores de Revestimiento: 2. Lacas spray: Polietilenglicol - Alcohol etlico o isoproplico Ventajas: son excelentes fijadores Protegen el material celular con una fina capa (distancia 30 cm) no son voltiles no inflamables a temperatura normal el frotis est seco a los 10 Desventajas : debe se completamente disuelta la solucin antes de iniciar la tincin (mala coloracin) Marcas : mercofix, spraycyte, profix.

Mtodos de Coloracin
Tincin de Papanicolaou Hematoxilina Esosina PAS - Alcian Blue Fluorescena Inmunocitoqumica PCR, otros

Mtodo de Papanicolaou Ventaja. Se obtiene un aspecto muy ntido y fino de la estructura nuclear. Gran transparencia del citoplasma coloreado. Las clulas son perfectamente reconocibles aunque se encuentren superpuestas El citoplasma toma la coloracin de diferentes tonalidades, hace una gran diferenciacin de las clulas maduras e inmaduras.

Mtodo de Papanicolaou
Fundamento. Es una coloracin policromtica por la mezcla de colorantes catinicos, aninicos y anfoteros. Hidratacin. Como los extendidos han sido fijados con alcohol, se requiere una serie descendente de concentracin de alcohol (hidratacin), para posibilitar la tincin con hematoxilina en solucin acuosa que tiene principalmente la heterocromatna del ncleo celular.

Mtodo de Papanicolaou

Decoloracin. Se produce con el bao de cido clorhdrico para eliminar el exceso de coloracin del citoplasma.

Mtodo de Papanicolaou
Deshidratacin. Se realiza mediante una serie ascendente de concentracin de alcoholes que nos permite seguir trabajando con colorantes citoplasmticos Orange G da una coloracin eosinfila, y el E 36 una coloracin basfila. Luego sigue otra deshidratacin de alcohol 96 Alcoholes absoluto y al final un aclaramiento con baos de xilol.

Montaje de la Preparacin

Laminillas de 22 x 40 Blsamo de Canad Merkoglas (resina sinttica) Tellan

Histologa y Citologa del Tracto Femenino

Vulva Vagina Utero Trompas de Falopio Ovarios

Utero

Organo muscular hueco, situado en el centro de la cavidad plvica, entre vejiga por debajo y el colon sigmoide por detrs Forma de pera El tero est compuesto :

Crvix o cuello uterino

Cuerpo uterino

Crvix.

Comprende aproximadamente el tercio inferior del tero y presenta una estructura tubular. Tiene dos porciones:

Exocrvix o Ectocrvix

Endocrvix

Cuerpo Uterino.

Se encuentra la cavidad endometrial, que tiene forma cnica y est en comunicacin con las dos trompas de Falopio

Histologia Del Ectocervix o Exocervix

Epitelio plano estratificado no queratinizado

Est constiudo por 3 estratos Clulas basales

A) Estrato basal :

B) Estrato Espinoso :
C) Estrato superficial :

Clulas parabasales Clulas intermedias pequeas

Clulas intermedias grandes Clulas superficiales.

Su grosor depende de las influencias hormonales Epitelio maduro ; 5 a 50 capas de clulas Epitelio atrfico ; 5 a 10 capas de clulas

Funcin epitelio plano

Proteccin mecnica contra agresiones debido a su estratificacin y disposicin horizontal de las clulas superficiales Proteccin biolgica de depuracin frente a las infecciones. Se debe a la produccin de glucgeno de la capa intermedia, que por accin de los bacilos de Doderlein, transforman el glucgeno en cido lctico, dando un pH cido a la secrecin crvico vaginal.

Citologa del Exocrvix o Ectocrvix

Se distinguen 4 tipos de clulas :

Basales

Parabasales
Indeterminadas Superficiales

Clulas Basales

Ubicacin :

Estrato basal

Tamao :
Forma : Ncleo :

12 a 20 micras
Redonda Redondo, central, 8 a 10 micras, cromatina finamente granular

Citoplasma : Cianfilo o basfilo denso Predominan : Atrofias intensas, normalmente no se observan en los frotis

Clulas Parabasales

Ubicacin : Tamao :

Estrato espinoso profundo 20 a 40 micras

Forma :
Ncleo :

Redonda u oval
Redondo u oval, central, 9 a 10 micras, cromatina es finamente reticular, ocasionalmente presenta nucleolo Cianfilo o basfilo, denso pero algo ms claro que en las clulas basales, pero ms intenso que en las clulas intermedias, no contiene glucgeno Clulas post parto atrofia senil, infancia, puerperio

Citoplasma :

Variedad : Predominan:

Clulas Intermedias pequeas

Ubicacin : Tamao :

Estrato espinoso profundo 25 a 40 micras

Forma :
Ncleo :

Redonda u oval
Posicin variable, redondo u oval, 7 9 micras, cromatina reticulada finamente distribuida Cianfilo o transparente, ligeramente plegado, contiene glucgeno. Naviculares Gestacin, insuficiencia hormonal folicular

Citoplasma : Variedad : Predominan:

Clulas Intermedias grandes

Ubicacin : Tamao :

Estrato espinoso superficial 40 a 60 micras

Forma :
Ncleo :

Poligonal
Redondo vesicular, cromatina finamente granular, 6 a 7 micras

Citoplasma :

Cianfilo muy transparente, plegado o extendido, dependiente de influencia hormonal

En mujer sexualmente activa

Predominan:

Clulas Superficiales

Ubicacin :
Tamao : Forma :

Estrato superficial
50 a 60 micras Poligonal

Ncleo :
Citoplasma : Predominan:

Central, 6 micras,(picntico)
Eosinfilo o basfilo, amplio, transparente y resistente En la ovulacin o en tumores quwe producen estrgeno

Histologa del Endocrvix.

Epitelio monoestratificado, cilndrico ciliado y no ciliado que reviste la superficie del conducto endocervical y sus formaciones glandulares. Se extiende desde la posicin interna ms profunda del endocrvix hasta el orificio externo del cuello uterino.

Funcin Epitelio Cilndrico.

Clulas endocervicales producen mucina, ms agua dando lugar al moco

El moco proporciona protecin a la cavidad endouterina y acta como veradadero tapn En la fase ovulatoria pierde este espesamiento y permite el paso del espermatozoide

Se produce de forma armoniosa los fenmenos de diferenciacin y maduracin cumpliendo su funcin designada.

Citologa del Endocrvix Clulas secretoras

Forma : Variable, alargadas o aspecto de luz de linterna

Tamao : 16 micras Citoplasma :Basfilo, son muy sensibles a la influencia del medio circulante, con frecuencia se presentan en estado de degeneracin, el citoplasma presenta numerosas vacuolas que a veces desplazan al ncleo hacia la base celular.

Ncleo : Redondo u oval, a veces en forma de clava, su posicin depende de la fase de ciclo, basal o central. Estructura finamente granular de la cromatina, suele mostrar cromocentros o micronucleolos.
Disposicin :Panal de abejas, hileras o sueltas

Clulas Cilndricas Ciliadas

Forma : Alargadas, bordes libres ms anchos provistos de cilios Citoplasma : Cianfilo de forma columnar, con colas delgadas Ncleo : Redondo o alargado, suele ser central, cromatina se dispone en grnulos o grumos, poseen nucleolos Disposicin : En empalizada o panal de abejas, hileras; sueltas.

Histologa del Endometrio

Epitelio cilndrico simple, que reviste tanto la superficie de la cavidad uterina (epitelio superficial), como los tubos glandulares situados en el estroma (epitelio glandular)

Citologa del Endometrio

En condiciones fisiolgicas normales es raro encontrar clulas endometriales en los frotis cervicales Se pueden encontrar en hemorragias uterinas, en la fase menstrual.

Clulas endometriales secretoras

Estn presentes en la segunda fase del ciclo menstrual Citoplasma es basfilo de tincin dbil y escaso Ncleos son redondos u ovales con bordes nucleares delicados y cromatina granular fina Se exfolian en grupos y tienden a superponerse.

Clulas endometriales ciliadas

Son pequeas y poligonales, se presentan agrupadas en forma de panal, en la fase proliferativa aparecen con escaso citoplasma basfilo, en la fase secretora los ncleos estn separados y el citoplasma es de mayor volumen. Los ncleos son redondos u ovales, con estructura cromatnica finamente granular.

GRACIAS