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CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS O crescimento bacteriano considerado o aumento do nmero de indivduos e no o aumento de tamanho de uma determinada clula.
Colnias grupos de clulas que contm milhares de clulas ou populaes que agrupam bilhes de clulas.
Temperatura
Crescimento mnimo
Termfilos
Psicrfilos
Crescimento mximo
Psicotrficos
Psicrfilos crescem a 0C . Existem dois grupos capazes de crescerem nesta temperatura. Psicrfilos pode crescer a 0C, temperatura tima de
crescimento 15C, no cresce a 20C. No causam problemas na preservao dos alimentos. Psicrotrficos crescem a 0C. Apresentam um crescimento timo nas temperaturas de 20C a 30C (temperaturas utilizadas em refrigeradores so mais encontradas em alimentos estragados).
Mesfilos
tipo
de
microrganismo
mais
comumente
encontrados, apresentando a temperatura tima de crescimento entre 25-45C. A temperatura fica tima em torno de de
crescimento de muitas bactrias patognicas 37C. So encontrados a maioria dos organismos que degradam os alimentos e que so patognicos.
Termfilos so microrganismos capazes de crescer em altas temperaturas. Muitos destes organismos tm uma temperatura tima de crescimento entre 50-60C. Alguns membros do grupo Archea, apresentam uma
temperatura timo de crescimento em torno ou superior a 80C (termfilos extremos). A temperatura que mais suporta alta o de
bacteriano
pH: definido como a acidez ou a alcalinidade de uma soluo. A maioria das bactrias crescem melhor dentro de variaes pequenas de pH sempre perto da neutralidade, entre pH 6,5 e 7,5. Poucas bactrias so capazes de crescer em pH cido com o pH 4,0 e 9,0. Os fungos filamentosos e as leveduras podem crescer em variaes de pH inferior, entre 5,0 e 6,0. O pH timo para o crescimento dos protozorios est
geralmente entre 6,7 e 7,7. As algas tm uma variao de pH mais extensa de 4,0 a 8,5.
Presso Osmtica Os microrganismos retiram da gua, presente no seu meio ambiente, a maioria dos seus nutrientes solveis necessitam de gua para seu crescimento e seu contedo celular composto de aproximadamente 80 a 90% de gua. A gua presente dentro da clula pode ser removida por elevao da presso osmtica. A perda da gua por osmose causa a plasmlise diminuio da membrana plasmtica de clula. ou a
sais
para
seu
crescimento,so
denominadas
haloflicas
Microrganismos
que
Aerbios
de
organismos
necessitam
Anaerbios os microrganismos anaerbios so aqueles que podem ser mortos pelo oxignio, no podem crescer em presena do ar e no utilizam oxignio para as reaes de produo de energia. Anaerbios Estritos so mortos por uma breve exposio ao
oxignio.
Anaerbios Facultativos podem utilizar capazes oxignio quando este est de continuar seu
DIVISO BACTERIANA
As bactrias normalmente se multiplicam pelo processo de reproduo assexuada, um processo que no envolve clulas
brotamento .
TEMPO DE GERAO
o tempo necessrio para uma celular se dividir. Este tempo pode sofrer variaes entre os organismos e depende das condies ambientais, meio de cultura, etc. A maioria das bactrias apresentam um tempo de gerao de 1 a 3 horas, mais algumas bactrias podem necessitar de mais de 24 horas para cada gerao.
perodo de tempo.
A maioria obtida quando se realiza a contagem da populaes em intervalos de tempo, aps o inoculo de um nmero pequeno de bactrias no meio lquido. Existem basicamente quatro fases de crescimento: 1. Fase lag: No h multiplicao;
2. Fase exponencial:
Duplicao da populao; Perodo de maior atividade metablica da clula; Sensibilidade s mudanas ambientais; Sensibilidade aos compostos antimicrobianos.
3. Fase estacionria:
Taxa de crescimento igual de morte; Esgotamento de nutrientes; Mudanas de ambientes; Produtos txicos.
4. Fase de morte:
O nmero de clulas mortas maior do que o nmero de
clulas vivas;
Identificao.
rea de Pesquisa:
Alimento; gua;
Clnica.
B) Quanto funo:
Meio de Enriquecimento aquele que permite o crescimento de microrganismos exigentes que necessitam de fatores de crescimento, mas no inibem o crescimento de outros. O meio favorece o crescimento da espcie desejada. Exemplo: Caldo Tetrationato usado para a recuperao de clulas de Salmonella
sp.
Meio Seletivo aquele que contm substncias que inibem o crescimento de certos microrganismos, porm permite o crescimento de outros.
Meio Diferencial Este meio possui substncias que evidenciam uma caracterstica que permite separar um grupo ou uma espcie de microrganismo. Essas substncias podem ser carboidratos ou outras. Exemplo: Agar MacConkey e Agar Eosina Azul de Metileno inibidores do crescimento de bactrias gram-positivas; tambm permitem diferenciar as bactrias gram-negativas (fermentadores e
no fermentadores de lactose);
Meio de Manuteno a manuteno adequada da viabilidade e das caractersticas fisiolgicas de uma cultura pode exigir um meio
C) Quanto Natureza:
Meio Sinttico aquele no qual a composio qumica exata definida. Ex: Caldo Lactosado, Agar Baird-Parker. Meio No-sinttico constitudo por compostos de nutrientes como extratos de levedura, de carne ou de plantas. Ex: Agar Sangue.
Prepare o meio em um recipiente de volume maior do que o volume a ser preparado, para se permitir uma melhor hidratao, mistura e aerao adequada;
Pese meio de cultura em uma rea livre de corrente de ar e com pouca umidade. Evite contato com a pele e a inalao do p durante a pesagem. Pese com preciso e rapidamente, no expondo ao ar mais do que o necessrio. Feche o frasco rapidamente. Retorne o meio ao local de estocagem; Os meios que contm Agar devem permanecer, em geral, durante 5 a 10 min. em repouso na gua antes de serem aquecidos, para se permitir que as partculas de Agar se reidratem adequadamente, elevando a solubilidade do Agar e resultando em um gel mais uniforme.
O princpio da autoclave se baseia em um recipiente fechado em que a gua aquecida, e o vapor dgua fica retido sob presso, podendo atingir temperaturas muito elevadas sem ferver.
O calor mido tem poder de penetrao superior ao calor seco e constitui, por isso, o agente esterilizante mais eficaz. O calor mido sob presso de ao esterilizante ainda mais energtica que a do vapor fluente.
Durante o procedimento de esterilizao dos meios de cultura recomenda-se: Fechar o frasco com tampes de algodo e gases, permitindo uma pequena folga da tampa antes de autoclavar, e apertar bem a tampa aps o meio ter sido esterilizado, para prevenir a perda de umidade e
possveis contaminaes;
Marque corretamente o intervalo de tempo de autoclavao. O tempo normal comear quando a presso e a temperatura tiverem alcanado a temperatura de 121C; No autoclavar excessivamente o meio de cultura. A autoclavao excessiva pode levar a formao de precipitados, alterao de pH, caramelizao, reduo do poder gelificante dos meios com agar e
Como
os
microrganismos
so
classificados
identificados ? Caracterizao dos microrganismos Populao microbiana espcies diferentes Cultura mista Cultura pura
Inculo
Manobras Asspticas
Tcnicas de Inoculao
(repicagem profunda);
Tcnica
se
semeadura
Adio do inculo
Contagem
Retirada do inculo
Adio do inculo
Ala de Drigalski
Espalhamento do inculo
Contagem
A semeadura consiste em :
a) Grande N de estrias;
Microscpio ;