MESTRADO EM BIOQUIMICA

The Nobel Prize in Physiology and Medicine 2011 Bruce A. Beutler, Jules A. Hoffmann, Ralph M. Steinman
Ralph M. Steinman, The Father of Dendritic cells

NOVOS ALVOS TERAPUTICOS NO TRATAMENTO DE DOENAS IMUNES: PAPEL DOS RECETORES TOLL-LIKE

Descrio Geral

INTRODUO

SISTEMA IMUNE INATO TLRs COMO SENSORES IMPORTANTES NA RESPOSTA IMUNE SISTEMA IMUNE ADQUIRIDO Doenas Oncolgicas Doenas Autoimunes

TLRs NAS DOENAS IMUNES

Ateroesclerose Esclerose Mltipla Lupus Sistmico Eritematoso Diabetes do Tipo I Artrite Reumatoide

Alergia e Asma

AGENTES TERAPEUTICOS COMO MODULADORES DA SINALIZAO DEPENDENTE DE TLRs COMCLUSES

INTRODUO Sistema Imune Inato

Importante

na defesa do hospedeiro Induo Citocinas inflamatrias

Modulao da Sinalizao mediada pelos TLRs

Descoberta de novos Alvos teraputicos

Sistema Imune

Doenas Humanas

Doenas Autoimunes & Inflamatrias

INTRODUO Sistema Imune Inato - TLRs

Fungi

Video TLRs

INTRODUO Sistema Imune Inato - TLRs

INTRODUO Sistema Imune Inato - TLRs

INTRODUO Sistema Imune Inato & Adquirido

INTRODUO Investigao direccionada para os TLRs

DOENAS IMUNES

TLRs NA ONCOLOGIA
TLRs ENVOLVIDOS: TLR 1 TLR 2

TLR 3
TLR 4 TLR 7

TLR 8
TLR 9

TLRs NAS DOENAS IMUNES Ateroesclerose

Principal causa de doenas cardiovasculares 20% de mortalidade Deposio de + lpidos Doena autoimune
Modificao Multifsica
1

colestero l

lipoprotenas Inflamao da parede arterial

fase: Disfuno endotelial Acumulao de lipoprotenas aterognicas na camada subendotelial

TLRs NAS DOENAS IMUNES Ateroesclerose

Representao esquemtica dos novos papeis das citocinas na ateroesclerose e seus mecanismos de aco relativamente s suas clulas alvo.

Leuccitos aderem ao endotlio Citocinas secretadas podem ativar macrfagos residentes, clulas endoteliais, e clulas do musculo liso vascular, que participam ativamente na imunidade celular e contribuem para a inflamao local

Gerao de uma placa e eventualmente formao de uma placa instvel ou mesmo a rutura da placa Libertao de muitos estmulos proinflamatorios, incluindo

TLRs NAS DOENAS IMUNES Ateroesclerose

OS TLRs
Dieta Rica em cidos Gordos

Dados Controversos na literatura para o TLR4

Michelsen et al. VS Wright et al. Duplo knockout ApoE/TLR4 Uso de diferentes backgrouds de estirpes de ratinho TLR -/-

cidos Gordos
Duplo knockout ApoE/TLR4 Duplo knock-out LDLr/TLR2 TLR 2, 4

FATORES GENETICOS
Gene TLR4 mutao D299G

Comprometimento da sinalizao do TLR4

Citocinas prinflamatrias Risco de Ateroesclerose

Aterosclerose

TLRs NAS DOENAS IMUNES Esclerose Mltipla

Doena crnica desmielinizante do sistema nervoso central (SNC)Clul Clul a a T ClulT Mediada por aT
Fatores ambientais
Fatores genticos DAMPs endgenos PAMPs exgenos

Modelo de Rato: Encefalomielite autoimune experimental (EAE)

Levam ao Inicio e Reincidncia da Doena

TLRs NAS DOENAS IMUNES Esclerose Mltipla

Infees virais e bacterianas podem desencadear e agravar EAE Estudos sobre o papel dos TLRs e MyD88
Clul aT

Knockout MyD88 -/Resistncia a EAE

DC

Wild-type Knockout TLR2 -/[IL6, IL12 e Ou IL17] Knockout TLR6 -/Citocinas proinflamatoria s TLR2 dimeriza com Resistncia a TLR 1 ou 6 EAE Heterodimer os funcionais

TLRs NAS DOENAS IMUNES Esclerose Mltipla

TLR4 -/-

DC

IL-6, IL-23

Th1 7

As Th17 cruciais patognese

so na

EAE Agravad a

TLR9 -/Controvrsia na literatura devido a: agendamentos de imunizao pptidos encefalitognicos

Parcialment e resistente a EAE

OU

EAE Severa

TLRs NAS DOENAS IMUNES Esclerose Mltipla

Agonist a TLR2

PREVENO DA EAE

As clulas Treg so cruciais na manuteno Expanso das Treg da homeostasia do Tre (ambas Treg CD8+ e sistema imune e tem Tre g Tre CD4+) mostrado regulao g Tre g Tre cruzada da funo de g g outras subpopulaes de clulas T. De facto, a resposta da Tr1 tem-se mostrado reduzida em pacientes com MS, com decrscimo associado IL10. As clulas Treg acumuladas no Inibe a sistema nervoso central recupera durante a fase de recuperao o e a sua depleo tem mostrado inibir a recuperao.

Tr1 Treg acumuladas no SNC Durante a fase de recuperao

Associado a IL-10

Tre Tre g Tre g Tre g g

Deple o

Tre Tre g Tre g Tre g g

TLRs NAS DOENAS IMUNES Lupus Eritematoso Sistemico (SLE)

Caracterizao da doena
Pequena

vasculatura dos vasos sanguneos Auto-anticorpos contra antignios nucleares

Defeitos: Apoptose Depurao detritos celulares

Importante

Desenvolvimen to da Doena

TLR 9 apresenta um papel regulador

Knockout TLR 9 -/-

SLE mais severa

Ativao: pDCs Clulas T IgG srico IFN-

Anti-dsDNA

TLRs NAS DOENAS IMUNES Lupus Eritematoso Sistemico (SLE)

TLR 9 apresenta um papel regulador
Knockout TLR 9 -/-

Anti-dsDNA

SLE mais severa

Ativao: pDCs Clulas T IgG srico IFN-

Knockout TLR 3 -/-

Anti-dsDNA SL E Mortalidad e

Mudana Rato MRL lrp/lrp Knockout TLR9 -/-

Auto-anticorpos anti-nucleosoma para

Auto-anticorpos anti-RNP

Protege da SLE Polimorfismo no Codo stop do TLR5

Diminui citocinas pro-inflamatorias

Efeito Protetor

TLRs NAS DOENAS IMUNES Diabetes do Tipo I

Destruio

seletiva das clulas do pncreas produtoras de insulina

Resposta Th1
inclui
Clulas T CD8+ Clulas do sistema imune inato

Manifestao clinica

Hiperglicemia Complicaes associadas diabetes, devido ausencia de insulina

TLRs NAS DOENAS IMUNES Diabetes do Tipo I

Moncitos,

expresso de TLR2 e TLR4

Vrus kilham

O TLR9 poder tambm estar envolvido Fatores virais podero ser importantes na induo de clulas T CD8+ autoreactivas e em clulas T especificas para autoantignios das clulas do pancreas
Activao TLR9 Manifestao clinica de TDI Ativao: Clulas do pncreas & mDCs

Fatores virais podero ser importantes para a induo de clulas T CD8+ autoreactivas e clulas T especificas para antignios de clulas do pncreas.

TLRs NAS DOENAS IMUNES Artrite Reumatoide (RA)

Afeta 1% da populao adulta Causa desconhecida & Prognstico reservado Quebra da Tolerncia Imunolgica Artropatia inflamatria crnica progressiva associada a dano articular
Inflamao Hiperplasia Destruio

sinovial

severa das articulaes Aparecimento de desordens cardiovasculares, pulmonares, psicolgicas e esquelticas

Incapacidade & Declnio Socioeconmico

A patognese da Artrite Reumatoide

Interaes Ambientais e Genticas na Artrite Reumatoide

Hiptese do Epiteto Partilhado
(Silver J & Govert SM, 1985)

Susceptibilidade conferida por alelos que codificam motivos comuns (QKRAA) na regio HLA-DRB1

para

(human leukocyte antigen (HLA)-DRB1 molecules that present the shared epitope)
Reviewed by PETER K. GREGERSEN, JACK SILVER, and ROBERT J. WINCHESTER, April 9, 1987

Interaes Ambientais e Genticas na Artrite Reumatoide

Estudo experimental

Wistar rat

BALB/c Mouse

Sprague Dawley rat

C57BL/6N Mouse

Lewis Rat

C3H/HeN Mouse

http://www.criver.com/en-US/Pages/home.aspx

Importncia dos TLRs no desenvolvimento da Artrite Reumatoide

Os TLRs e seus respectivos ligandos na Artrite Reumatoide

Processo sinovial imunolgico e inflamao

Ativao do sistema imunitrio inato Ativao do adaptativo sistema imunitrio Citocinas e vias intracelular na RA de sinalizao

Resposta tecidual mesenquimal

TLRs 2, 3, 4, 7 and 9 -Dano da cartilagem -Eroso do Osso

Os TLRs & SNC

Sistema Nervoso Autonomo e Artrite Reumatoide

Controlo da tolerncia imune pelos neuropeptidos antiinflamatorios

SSRIs como drogas antidepressivas e antirreumticas

Pacientes com depresso Tratamento com SSRIs (Fluoxetine e Citalopram) Falha no tratamento com SSRIs Nveis de citocinas

Nveis de citocinas
Nveis de citocinas mantm-se

TLR 3, 7, 8 e 9

Citalopram e Fluoxetine

TLR signaling
Citocinas inflamatrias, como TNF e IL6

Consequncias sistmicas da Artrite Reumatoide

TLRs NAS DOENAS IMUNES Alergia

A Alergia uma reao anormal do organismo que se manifesta em indivduos hipersensveis.

Predisposio hereditria Interao do gene com o ambiente

Hiptese Higinica

TLRs NAS DOENAS IMUNES

Reao Alergica
Receptor Fc
FcRI
Antgeno

IgE Mastcito Degranulao

IgE IL-4

Histamina Leucotrienes Prostaglandinas

Citocinas

TH-2
IL-4 IL-5 IL-6 IL-5 IL-9

Eosinfilos

GM CSF; TNF Selectinas Integrinas Molculas de Adeso IL-8 ; IL-9 Enzimas Proteolticas

TLRs NAS DOENAS IMUNES ALERGIA E ASMA

Leuco trienos e Hista mina

Alergia Espirros Coriza aquosa Coceira Obstruo nasal

Asma Brnquica Tosse seca Falta de ar Cansao respiratrio Sibilos ou chiados

TLRs NAS DOENAS IMUNES Asma Epidemiologia

A Asma acomete 300 milhes de pessoas de todas as idades (GINA, 2004).

caracterizada por limitao do fluxo areo e hiper-responsividade brnquica

TLRs NAS DOENAS IMUNES ALERGIA E ASMA

A prevalncia de doenas alrgicas atualmente de 35% da populao.

2011
Correia-de-Sousa et al. BMC Public Health 2011, 11:347

TLRs NAS DOENAS IMUNES ASMA

Modelos Experimentais na Asma

ALERGENOS

TLRs NAS DOENAS IMUNES ASMA - Alergnios

TLRs NAS DOENAS IMUNES ASMA

PAPEL DOS RECEPTORES TOLL-LIKE

MODULADORES

VIAS DE SINALIZAO Associadas aos TLRs

VIAS DE SINALIZAO Associadas aos TLRs

VIAS DE SINALIZAO Associadas aos TLRs

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Alvos teraputicos na Artrite Reumatoide

Doena Alvo TLR 9

TLR9 CpG oligonucleotide; Antagonista, fase I

Composto
AVE0675

TLR 4
Agonista (pre-clinico

NI0101

TLR 9
TLR9 CpG oligonucleotide; Agonista, fase I

QAX935 SAR21609 VTX1463

TLR 8 Asma
TLR8 ssRNA agonista; fase I

TLR7
TLR7 pequena molecula agonista; fase I

AZD8848

1018 ISS inalado (CpG BODN)66

TLR 9 TLR9
CpG oligonucleotide agonist; preclinical

CpG-ODN, segunda gerao HYB2093 (CpG-ODN) AZD1419 AstraZeneca/Dynavax Technologies

Concluso

Adicione a sua concluso aqui

TLRs NETWORK MAPA DETALHADO DA SINALIZAO MEDIADA POR TLRs

OBRIGADA PELA ATENO!

Questes
OBRIGADA QUESTION PELA S? ATENO!